波爾山羊腹腔內(nèi)窺鏡鮮胚移植試驗

竇玉鳳 孫延星

（新疆生產(chǎn)建設兵團農(nóng)五師獸醫(yī)站，博樂 833400）

胚胎移植技術(shù)是繼人工受精之后被廣泛采用繁殖新技術(shù)，可以充分發(fā)揮優(yōu)秀母畜在家畜品種改良和群體擴繁中的最大潛力，有效縮短時代間隔，加快遺傳進展，并在品種資源保存上具有重要意義。近年來，全國許多地方都引進了波爾山羊，同時為了提高其繁殖效率相繼開展波爾山羊胚胎移植工作。本試驗使用了2種超排藥物對波爾山羊進行超排處理并運用“腹腔內(nèi)窺鏡技術(shù)”進行沖卵和鮮胚移植。

1 材料與方法

1.1 供體和受體

供體為成年經(jīng)產(chǎn)波爾山羊40只，年齡3～4歲。受體為當?shù)爻赡杲?jīng)產(chǎn)山羊399只，年齡4～5歲。供、受體均健康無病。

1.2 藥物和器械

FSH：中國農(nóng)科院畜牧所（批號：20020619）。

OVAGEN：新西蘭2001年生產(chǎn)。

LH：杭州市動物藥品廠（批號：020112）。

氯前列烯醇：上海市計劃生育科學研究所（批號：990629）。

PMSG：寧波市激素制品有限公司（批號：20020718）。羊用陰道海綿栓：每只含氟孕酮35mg。

羊用手術(shù)沖卵和移植器械：1套（新疆農(nóng)墾科學院畜牧所研制）。腹腔內(nèi)窺鏡：1臺（西德）。

體視顯微鏡：1臺（北京光學儀器廠）。

1.3 供體超排處理

供體羊隨機分5組，每組8只。1～4組羊放置陰道海綿栓后第12 d開始用FSH進行超排處理，每只羊按總劑量6份，分3 d隔12 h藥量遞減肌肉注射（1.5、1.5；1、1；0.5、0.5）mg，第14 d上午去栓，發(fā)情羊靜脈注射LH 100 U，采用自然交配至發(fā)情結(jié)束。第5組羊放置陰道海綿栓后第12 d開始用OVAGEN進行超排處理，每只羊按總劑量10mg分3 d間隔12 h藥量遞減肌肉注射（2、2；1.5、1.5；1、1）mg，第14 d上午去栓并肌注氯前列烯醇0.1mg，第15 d試情。發(fā)情羊采用自然交配至發(fā)情結(jié)束。

1.4 受體同期發(fā)情處理

受體羊隨機均分為5組，與供體同步放置海綿栓、同步去栓肌注PMSG500IU。第15 d試情，發(fā)情羊打號備用。

1.5 沖胚與移植

配種后第7 d，通過腹腔內(nèi)窺鏡手術(shù)從子宮回收胚胎，在體視顯微鏡下檢出致密桑椹期與囊胚期的正常胚胎用腹腔內(nèi)窺鏡手術(shù)進行鮮胚移植。

1.6 妊娠鑒定

受體移植20 d后開始試情，2個情期不返情者視為妊娠。

2 結(jié)果與分析

2.1 超排處理與胚胎回收

對40只成年經(jīng)產(chǎn)波爾山羊進行超排處理，有2只未表現(xiàn)發(fā)情。共回收胚胎388枚，可用胚311枚，平均胚胎數(shù)10.21枚，平均可用胚數(shù)8.18枚。

2.2 受體羊同期發(fā)情

同期處理受體羊399只，發(fā)情320只，同期率80.20%。

2.3 不同藥物處理效果

FSH+LH處理供體32只，OVAGEN+氯前列烯醇處理供體8只，結(jié)果詳見表1。

表1 不同藥物超排效果統(tǒng)計表

OVAGEN+PG超排獲得平均胚胎數(shù)和可用胚數(shù)均略高于FSH+LH，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 鮮胚移植

移植受體2 6 7只，其中雙胚4 4只。妊娠率5 6.1 8%（150/267）。

3 討論

（1）使用2種方法對供體羊進行超排處理，結(jié)果差異不顯著，但每頭份OVAGEN+氯前列烯醇價格高出FSH+LH近200元，因此用FSH+LH處理更為經(jīng)濟合算。

（2）使用腹腔內(nèi)窺鏡技術(shù)可以直接在腹腔內(nèi)觀察到供、受體卵巢排卵情況，若供體羊卵巢上黃體數(shù)量小于4，或供、受體卵巢黃體發(fā)育不好，則無須進一步手術(shù)。同時在沖卵和移植手術(shù)過程中內(nèi)窺鏡技術(shù)比傳統(tǒng)的小挑法手術(shù)切口小，無須將卵巢牽引出體外，因此對羊只傷害較輕，利于術(shù)后盡快恢復。

[1] 趙曉娥，武浩，權(quán)富生等.波爾山羊胚胎移植試驗研究[J].西北農(nóng)業(yè)學報，2002，11（4）：92～94

[2] 郭志勤.家畜胚胎工程[M].北京：中國科學技術(shù)出版社，1998

[3] 桑潤滋.動物繁殖生物技術(shù)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002