洪江游 洪志慧 凌日金 謝清春

HPLC法測鹽酸左西替利嗪顆粒的含量

洪江游 洪志慧 凌日金 謝清春

目的建立鹽酸左西替利嗪顆粒含量的高效液相色譜測定法。方法采用C18柱，以甲醇-磷酸二氫鈉溶液(70∶30)為流動相，流速1ml/min，檢測波長230nm。結(jié)果在4.98～49.8μg/ml范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，進樣精密度、重復(fù)性試驗和中間精密度的RSD分別為0.25%、0.49%和0.61%，低中高三個濃度的回收率分別是99.41%、99.55%和99.64%。結(jié)論本法可用于鹽酸左西替利嗪顆粒含量測定。

鹽酸左西替利嗪;HPLC;含量測定

鹽酸左西替利嗪是選擇性組胺H1受體拮抗制劑，作為新型抗組胺藥，主要用于緩解變態(tài)反應(yīng)性疾病的過敏癥狀，臨床上用于治療變應(yīng)性鼻炎、蕁麻疹、血管神經(jīng)性水腫等皮膚黏膜過敏性疾病，具有口服吸收迅速，受體選擇性高，臨床療效強，副作用小，安全性好等多方面優(yōu)點［1，2］。其對組胺H1受體的親和力比西替利嗪高出2倍，是右西替利嗪的30倍，且受體結(jié)合時間更長［3］。本文研究了高效液相色譜法測定鹽酸左西替利嗪顆粒劑含量的方法。

1 儀器與試劑

島津LC-10A高效液相色譜儀;Chromstation色譜工作站;電子天平(型號:ALC，d=0.0001)。鹽酸左西替利嗪(湖南九典制藥有限公司，批號200604J03，含量:99.4%);鹽酸左西替利嗪對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號100659-200401);三批鹽酸左西替利嗪顆粒(海南中瑞康芝制藥有限公司制備，批號:060601、060602、060603);磷酸(分析純)，甲醇(色譜純)，水為雙蒸水。

2 方法和結(jié)果

圖1 對照品

圖2 樣品

圖3 陰性對照

2.1 溶液的配制 供試品溶液:取鹽酸左西替利嗪顆粒研細粉末適量(約相當(dāng)于鹽酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

陰性對照溶液:取空白輔料適量(約相當(dāng)于鹽酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。對照品溶液:取線性與范圍下25μg/ml即得。

2.2 色譜條件與系統(tǒng)適用性 色譜柱:Apollo C18柱(250×4.6mm，5μm);流動相:甲醇-磷酸二氫鈉溶液(取 NaH2PO4·2H2O 3.12g加水至1000ml溶解)(70∶30);流速1ml/min 檢測波長 230nm;進樣量 20μl。

精密量取供試品溶液、陰性對照溶液、對照品溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。同法測定。結(jié)果鹽酸左西替利嗪保留時間為7.758min，理論板數(shù)為5040;空白輔料峰均在4min之前，不干擾測定，見圖1、圖2和圖3。

2.3 線性與范圍 精密稱取鹽酸左西替利嗪25mg，置50ml量瓶中，加水適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，再分別精密稱取 1、3、5、7、10ml，置 100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果線性方程:A=16083C+1136.4，R2=0.9994。鹽酸左西替利嗪在4.98～49.8μg/ml濃度范圍內(nèi)，濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.4 進樣精密度 取線性與范圍項下的3號溶液，精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，連續(xù)進樣6次峰面積的RSD值為0.25%，精密度好。

2.5 重復(fù)性試驗 取鹽酸左西替利嗪顆粒研細粉末適量(約相當(dāng)于鹽酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，平行配制六份，分別精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取105℃干燥2h的鹽酸左西替利嗪對照品適量，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含25μg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算。結(jié)果鹽酸左西替利嗪顆粒的6份平行樣品的含量測定結(jié)果的RSD為0.49%，方法重復(fù)性好。

2.6 中間精密度 不同分析人(兩個人)、不同日期(兩天)，取鹽酸左西替利嗪顆粒研細粉末適量(約相當(dāng)于鹽酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，平行配制六份，分別精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取105℃干燥2h的鹽酸左西替利嗪對照品適量，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含25μg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，結(jié)果不同分析人、不同日期檢測鹽酸左西替利嗪顆粒樣品的含量測定的RSD為0.61%，方法中間精密度好。

2.7 回收率試驗 分別精密稱取鹽酸左西替利嗪20、25、30mg各3份，置1000ml量瓶中，并按處方比例加入輔料，加水適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，平行配制六份，分別精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取105℃干燥2h的鹽酸左西替利嗪對照品適量，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含25μg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積，計算回收率，結(jié)果見表1，高中低三濃度的回收率均在98.0% ～102.0%范圍內(nèi)，符合規(guī)定。

表1 鹽酸左西替利嗪顆粒含量測定回收率試驗結(jié)果

2.8 溶液穩(wěn)定性試驗 取重復(fù)性試驗項下樣品溶液之一，于室溫條件下放置，分別于0、2、4、6、8h測定，結(jié)果鹽酸左西替利嗪顆粒含量測定溶液在室溫放置8h，各時間點峰面積的RSD為0.20%，小于2%，說明在鹽酸左西替利嗪顆粒的水溶液8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 含量測定 取本品10袋，傾出內(nèi)容物，混勻研細，稱取細粉適量(約相當(dāng)于鹽酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取105℃干燥2h的鹽酸左西替利嗪對照品適量，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含25μg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，結(jié)果見表2。計算公式為:

C對照品:鹽酸左西替利嗪對照品溶液的濃度(μg/ml)

C供試品:鹽酸左西替利嗪顆粒供試品溶液的濃度(mg/ml)

A對照品:鹽酸左西替利嗪對照品溶液主峰面積

A供試品:鹽酸左西替利嗪顆粒供試品溶液主峰面積

W:鹽酸左西替利嗪顆粒平均裝量(g)

表2 三批樣品含量測定結(jié)果

結(jié)論:本品可采用高效液相色譜法進行含量測定。經(jīng)方法學(xué)研究結(jié)果表明，方法靈敏度、準(zhǔn)確度、重復(fù)性、精密度、線性均符合要求。

2.10 含量均勻度 取本品1袋，將內(nèi)容物置100ml量瓶中，加水適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，照含量測定項下的方法測定，應(yīng)符合規(guī)定(中國藥典2005年版二部附錄X E)。三批樣品含量均勻度檢查結(jié)果見表3，三批樣品的A+1.8S均小于15.0，含量均勻度符合藥典規(guī)定。

3 討論

本文的流動相先后考察過流動相1:甲醇-磷酸二氫鈉溶液(取NaH2PO4O2H2O 3.12g加水至1000ml溶解)(75∶25)，結(jié)果此條件下，鹽酸左西替利嗪出峰較快(約5.5min)。流動相2:庚烷磺酸鈉溶液(取庚烷磺酸鈉0.3g，加水580ml溶解)-乙腈(58∶42)(用稀磷酸調(diào)pH至2.4)，結(jié)果主峰拖尾較嚴重，加入三乙胺也不能改善峰的拖尾情況。如將流動相1的比例改為70∶30則出峰時間適宜，約8min，可滿足本品分析方法的要求。

表3 鹽酸左西替利嗪顆粒含量均勻度檢查結(jié)果

［1］Clough GF，Boutsiouki P，Church MK.Comparison of the effects of levocetirizine and loratadine on histamine-induced wheal，flar，and itch in human skin.Allergy，2001，56(10):985-988.

［2］張壹.鹽酸左西替利嗪.中國新藥雜志，2004，13(12):1420-1421.

［3］Gillard M，Van Der Perren C，Moguilevsky N，et al.Binding characteristics of cetirizine and levocetirizine to human H1histamine receptor’s:Contribution of Lys(191)and Thr(194).Mol Pharmacol，2002，61:391-399.

Content detemination of levocetirizine granules by HPLC method

HONG Jiang-you，HONG Zhi-hui，LING Ri-jin，et al.Kangzhi Pharmaceutical Co.LTD of Hainan，Hainan 570311，China

ObjectiveTo establish a HPLC method to determine the content of levocetirizine granules.MethodsC18column was used，menthol alcohol-Sodium dihydrogen phosphate(70∶30)as mobile phase，flow rate at 1ml/min，detection wavelength at 230nm.ResultsIn 4.98～49.8μg/ml was line.Instrument precision，Repeatability test，middle precision was 0.25%，0.49%and 0.61%respectively.Recoveries(low level，middle level，and high level)were 99.41%，99.55%and 99.64%respectively.ConclusionThe assay method can be used to determine content of levocetirizine granules.

Levocetirizine hydrochloric;HPLC;Content determination

570311海南康芝藥業(yè)股份有限公司(洪江游 凌日金);深圳市紅會醫(yī)院(洪志慧);廣東藥學(xué)院(謝清春)

謝清春