半夏瀉心湯對(duì)大鼠胃竇環(huán)行肌自發(fā)性活動(dòng)的影響

邢德剛 董艷芬 梁燕玲 鄧樹(shù)泳 張 琰 (廣東藥學(xué)院生理學(xué)教研室，廣東 廣州 510006)

臨床上很多疾病伴有胃腸動(dòng)力障礙〔1〕，很多中藥對(duì)胃腸道活動(dòng)具有明顯的調(diào)節(jié)作用，其中，半夏瀉心湯被廣泛運(yùn)用于治療消化道疾病，尤其是對(duì)胃病的療效卓著。以往的臨床應(yīng)用表明，該方不僅對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)障礙性疾病，如功能性消化不良、糖尿病胃輕癱有治療作用〔2，3〕，對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)亢進(jìn)性疾病如腸易激惹綜合征也有治療作用〔4〕。有實(shí)驗(yàn)研究認(rèn)為其無(wú)論對(duì)在體胃腸運(yùn)動(dòng)還是離體胃腸運(yùn)動(dòng)均具有雙向調(diào)節(jié)作用〔5〕，但也有研究認(rèn)為半夏瀉心湯全方對(duì)胃運(yùn)動(dòng)只有興奮性作用〔6〕;有研究認(rèn)為對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的作用是當(dāng)胃運(yùn)動(dòng)障礙時(shí)半夏瀉心湯促進(jìn)胃運(yùn)動(dòng)，胃腸功能亢進(jìn)時(shí)抑制胃腸運(yùn)動(dòng)〔7，8〕。本實(shí)驗(yàn)用急性分離的大鼠胃竇環(huán)行平滑肌肌條，觀(guān)察半夏瀉心湯對(duì)大鼠胃竇環(huán)行平滑肌自發(fā)性收縮的影響，并分析其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康SD大鼠 (廣州省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體重200～250 g，雌雄不限。共分為空白對(duì)照組與不同濃度半夏瀉心湯實(shí)驗(yàn)組7組，每組8例。

1.1.2 藥物制備 半夏瀉心湯由半夏55.78 g、黃芩、干姜、人參、炙甘草各46.875 g、黃連15.625 g、大棗42 g組成，依照人單位體重生藥量求得豚鼠單位體重生藥量，擴(kuò)大10倍。以蒸餾水煎煮30 min，提取2次。再合并煎液，分別制備成1%(含生藥0.01 g/ml)、10%(含生藥0.10 g/ml)、30%(含生藥0.30 g/ml)、50%(含生藥0.50 g/ml)、70%(含生藥0.70 g/ml)和100%(含生藥1 g/ml)濃度的水煎液，冰箱中備用。

1.2 方法 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前禁食24 h，飲水不限。實(shí)驗(yàn)時(shí)猛擊大鼠頭部致昏，迅速取出其全胃。沿胃小彎打開(kāi)胃，在Krebs液中漂洗干凈。去除其黏膜層，平行于胃竇環(huán)形肌纖維走向切取肌條 (10 mm×1.5 mm)，將其固定于恒溫灌流槽內(nèi)(37℃)，用Krebs液連續(xù)灌流，并持續(xù)通入95%O2和5%CO2混合氧，利用生物信號(hào)處理系統(tǒng)記錄胃竇環(huán)行平滑肌自發(fā)性收縮活動(dòng)。在1 g的前負(fù)荷下溫育。用37℃新鮮的Krebs液持續(xù)灌流，孵育60 min左右，當(dāng)穩(wěn)定的自發(fā)性收縮出現(xiàn)后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，每次加入0.05 ml實(shí)驗(yàn)用藥液，描記給藥前后各3 min胃竇環(huán)行平滑肌的收縮曲線(xiàn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)算給藥前后3 min胃竇平滑肌自發(fā)性活動(dòng)效應(yīng)，單位時(shí)間曲線(xiàn)下面積積分 (/min)=(選擇區(qū)曲線(xiàn)下面積積分/選擇區(qū)時(shí)間)×60。在選定時(shí)間內(nèi)肌條的收縮效應(yīng)值=(給藥時(shí)單位時(shí)間下面積積分－給藥前單位時(shí)間曲線(xiàn)下面積積分)/給藥前單位時(shí)間曲線(xiàn)下面積積分×100%。在選定時(shí)間內(nèi)肌條的舒張效應(yīng)值=(給藥前單位時(shí)間曲線(xiàn)下面積積分－給藥時(shí)單位時(shí)間下面積積分)/給藥前單位時(shí)間曲線(xiàn)下面積積分×100%。所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)用±s表示。數(shù)據(jù)比較采用同體對(duì)照t檢驗(yàn)，利用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS12.0分析。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度半夏瀉心湯對(duì)大鼠胃竇肌條節(jié)律性收縮的影響

1%半夏瀉心湯組對(duì)肌條收縮活動(dòng)無(wú)影響，10%、30%、50%、70%和100%半夏瀉心湯組都先明顯增強(qiáng)肌條收縮幅度和收縮頻率 (P＜0.01)，而后又明顯減弱肌條收縮幅度和頻率 (P＜0.01)，呈劑量依賴(lài)性。當(dāng)濃度達(dá)到100%時(shí)肌條先是不完全強(qiáng)直收縮，然后完全抑制，灌流沖洗藥物作用后自發(fā)性活動(dòng)恢復(fù)。見(jiàn)表1，圖1。

2.2 M型、N型膽堿能受體阻斷劑對(duì)半夏瀉心湯效應(yīng)的影響用濃度10－6mol/L的M型膽堿能受體阻斷劑阿托品與50%半夏瀉心湯同時(shí)孵育肌條，50%半夏瀉心湯對(duì)肌條的收縮活動(dòng)仍有明顯增強(qiáng)和抑制收縮效應(yīng)，與單獨(dú)50%半夏瀉心湯組的效應(yīng)相同。表明阿托品不影響半夏瀉心湯對(duì)肌條的雙向性作用。用濃度10－6mol/L的N型膽堿能受體阻斷劑六烴季胺與50%半夏瀉心湯同時(shí)孵育肌條，與單獨(dú)50%半夏瀉心湯組的效應(yīng)相同。表明六烴季胺不影響半夏瀉心湯對(duì)肌條的作用。見(jiàn)表2。

表1 不同濃度半夏瀉心湯對(duì)胃竇肌條自發(fā)性活動(dòng)的影響(n=8，±s)

表1 不同濃度半夏瀉心湯對(duì)胃竇肌條自發(fā)性活動(dòng)的影響(n=8，±s)

與1%濃度組比較:1)P＜0.01

組別 收縮效應(yīng) 舒張效應(yīng)1%濃度組3.53±2.75 2.32±2.37 10%濃度組 27.53±3.491) 16.32±2.551)30%濃度組 68.06±2.091) 38.32±3.761)50%濃度組 120.59±3.431) 68.32±2.811)70%濃度組 178.53±3.321) 87.32±2.901)100%濃度組 212.53±2.581) 98.32±3.121)

圖1 100%濃度組半夏瀉心湯對(duì)胃竇肌條自發(fā)性活動(dòng)的影響

2.3 氨茶堿對(duì)半夏瀉心湯效應(yīng)的影響 用濃度10－6mol/L氨茶堿與50%半夏瀉心湯同時(shí)孵育肌條，使肌條收縮效應(yīng)與單獨(dú)半夏瀉心湯組相比有顯著性差異 (P＜0.01)，但氨茶堿組的舒張效應(yīng)與單獨(dú)半夏瀉心湯組相比無(wú)顯著性差異。表明氨茶堿能抑制半夏瀉心湯增強(qiáng)胃竇肌條收縮的效應(yīng)，但對(duì)半夏瀉心湯的增強(qiáng)胃竇肌條收縮效應(yīng)之后對(duì)肌條的舒張效應(yīng)沒(méi)有顯著的影響。見(jiàn)表2，圖2。

表2 幾種阻斷劑對(duì)50%濃度組半夏瀉心湯效應(yīng)的影響(n=8，±s)

表2 幾種阻斷劑對(duì)50%濃度組半夏瀉心湯效應(yīng)的影響(n=8，±s)

與50%濃度組比較:1)P＜0.01

組別 收縮效應(yīng) 舒張效應(yīng)50%濃度組120.53±2.09 48.32±3.75 50%濃度+阿托品組 128.92±3.54 50.28±2.74 50%濃度+六烴季胺組 132.13±3.15 46.33±3.37 50%濃度+氨茶堿組 76.64±2.521)50.18±2.83

圖2 50%濃度+氨茶堿組對(duì)胃竇環(huán)行平滑肌自發(fā)性活動(dòng)的影響

3 討論

本結(jié)果表明半夏瀉心湯對(duì)大鼠胃竇環(huán)行平滑肌的自發(fā)性活動(dòng)的雙向性效應(yīng)可能與膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)受體水平無(wú)關(guān)，且氨茶堿能明顯抑制半夏瀉心湯的增強(qiáng)胃竇環(huán)行平滑肌收縮效應(yīng)，但對(duì)半夏瀉心湯的增強(qiáng)胃竇環(huán)行平滑肌收縮效應(yīng)之后對(duì)肌條的舒張效應(yīng)沒(méi)有顯著的影響。氨茶堿通過(guò)減少cAMP分解提高細(xì)胞內(nèi)cAMP水平，半夏瀉心湯對(duì)大鼠胃竇環(huán)行平滑肌自發(fā)性活動(dòng)的增強(qiáng)效應(yīng)可能與cAMP途徑有關(guān)。前期研究發(fā)現(xiàn)，半夏瀉心湯含藥血清能提高胃平滑肌膜電位，通過(guò)G蛋白水平增加毒蕈堿電流，進(jìn)而使平滑肌細(xì)胞收縮增強(qiáng)。因此，G蛋白與細(xì)胞內(nèi)cAMP都有可能參與半夏瀉心湯對(duì)胃竇環(huán)行平滑肌的自發(fā)性活動(dòng)增強(qiáng)效應(yīng)，但半夏瀉心湯增強(qiáng)胃竇肌條的自發(fā)性活動(dòng)的舒張效應(yīng)機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

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