汪 猜 范平云 劉福文 謝嘉生 陳登輝 皮燦輝

（1廣州和仕康生物技術(shù)有限公司，廣東省廣州市 510663；2江西省吉安市新干縣雪山種豬場(chǎng)，江西省吉安市 331300）

近幾年，令養(yǎng)豬人頭痛的是豬病日趨繁雜，新病不斷發(fā)生，舊病卷土重來，如豬圓環(huán)病毒病、豬藍(lán)耳病等免疫抑制性疾病，可謂是防不勝防。隨處可聽到 “養(yǎng)豬難、難養(yǎng)豬”的抱怨。樊福好博士的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，全國(guó)有近60%的豬處于不健康狀態(tài)。影響豬群健康的因素很多，其中藥物中毒、重金屬中毒、免疫抑制、病原微生物的感染是主要因素[1]。在飼料中大量添加抗生素類藥物，雖然在短期取得了明顯的效果，但是長(zhǎng)期使用，藥物嚴(yán)重?fù)p壞了豬的肝臟、腎臟以及免疫系統(tǒng)，使豬抵抗力下降，極容易感染疫??；同時(shí)對(duì)接種疫苗的特異性應(yīng)答能力降低，使豬群容易發(fā)生繼發(fā)感染或者混合感染。因此合理降低或取代抗生素的使用已成為畜牧行業(yè)研究的熱點(diǎn)[2]。

防御素是一類具有抗細(xì)菌、病毒、真菌等的陽離子免疫調(diào)節(jié)多肽[3]。天然的防御素分布在從植物、低等動(dòng)物到哺乳動(dòng)物等幾乎所有的生物類群中，是生物長(zhǎng)期與疾病斗爭(zhēng)進(jìn)化來的，也是其自身防御體系的重要組成部分[4]。防御素抗菌的作用機(jī)理與抗生素不一樣，防御素通過與帶負(fù)電荷的細(xì)胞膜結(jié)合而破壞細(xì)菌細(xì)胞膜，導(dǎo)致膜穿孔，使其內(nèi)容物外泄而死亡。防御素抗病毒的機(jī)理與此類似，正是由于防御素這種特殊的作用機(jī)理，因此到目前為止還未發(fā)現(xiàn)有因?yàn)槭褂梅烙囟a(chǎn)生耐藥的案例。

本公司在多年研究的基礎(chǔ)之上，有針對(duì)性的克隆了多種哺乳動(dòng)物的防御素基因，并通過基因工程技術(shù)轉(zhuǎn)化到酵母中進(jìn)行生產(chǎn)，得到基因工程防御素。本研究將基因工程豬防御素作為規(guī)模豬場(chǎng)飼料藥物添加劑的替代品，在母豬和仔豬飼料中添加使用，取得了良好效果，為將來防御素在畜牧行業(yè)大規(guī)模使用提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

防御素飼料添加劑由廣州和仕康生物技術(shù)有限公司提供，商品名為防御素H60（母豬用）、H01 （仔豬用）。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)方案

試驗(yàn)在江西雪山種豬場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)分兩個(gè)部分進(jìn)行。第一部分：選擇健康狀況良好，年齡、體況、胎次相近的妊娠母豬54頭，隨機(jī)分成兩組，其中試驗(yàn)組27頭，對(duì)照組27頭，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)9頭母豬。母豬為長(zhǎng)白與大白二元雜交豬，仔豬為上述母豬與杜洛克公豬雜交所產(chǎn)三元雜交豬，共產(chǎn)仔豬561頭。試驗(yàn)組按照一噸日糧添加2 kg基因工程防御素，從產(chǎn)前30天開始使用，試驗(yàn)期42天。試驗(yàn)期間所有母豬和仔豬用藥、免疫程序、管理按豬場(chǎng)原有方案實(shí)行。第二部分：選擇健康狀況良好，年齡、體況、相近的保育豬226頭，隨機(jī)分成兩組，其中試驗(yàn)組125頭，對(duì)照組101頭，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)33～42保育豬。其它飼養(yǎng)條件同第一階段，試驗(yàn)期為33天。

1.3 觀測(cè)指標(biāo)

第一部分試驗(yàn)觀察對(duì)照組與試驗(yàn)組的總產(chǎn)仔數(shù)、出生成活率、死胎率、弱仔率、發(fā)病率、死亡率。第二部分試驗(yàn)觀察保育豬發(fā)病率、成活率。

1.4 數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件，做單因素方差分析，以P＜0.05作為有顯著性差異標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果分析

2.1 防御素對(duì)母豬健康的影響

試驗(yàn)結(jié)果見表1，從結(jié)果可以看出，對(duì)照組出生成活率為92.81%，試驗(yàn)組出生成活率為95.05%，提高2.24%，差異顯著 （p＜0.05）；弱仔率降低1.46%，死胎率降低了1.83%，差異極顯著 （p＜0.01）；發(fā)病率降低 4.35%，差異極顯著 （p＜0.01），死亡率降低2.66%，差異極顯著 （p＜0.01）。由此可見，在母豬日糧中添加基因工程防御素，可以明顯提高母豬體質(zhì)，提高生產(chǎn)成績(jī)。

2.2 防御素對(duì)保育豬健康的影響

試驗(yàn)結(jié)果見表2，發(fā)病率降低8.64%，差異極顯著 （p＜0.01），死亡率降低 1.77%，差異顯著 （p＜0.05）。由此可見，在保育料中添加基因工程防御素，可以明顯提高仔豬體質(zhì)，降低發(fā)病率和死亡率。

3 討論

防御素普遍存在于生物體內(nèi)，對(duì)病原微生物具有廣譜的殺滅作用。有研究表明，在一些感染細(xì)菌或病毒的組織器官中防御素的表達(dá)上調(diào)，提示防御素在預(yù)防病原微生物感染方面具有重要作用[5]。防御素具備兩個(gè)特點(diǎn)：一是抗性譜廣，二是病原微生物難以對(duì)防御素產(chǎn)生抗性突變。這就是科學(xué)家們對(duì)其應(yīng)用前景看好的重要依據(jù)。

在本試驗(yàn)中，在母豬的日糧中按照2‰的比例添加，結(jié)果顯示仔豬出生成活率明顯提高，弱仔率、死胎率等明顯下降。因?yàn)橹卸?（抗生素類藥物、重金屬中毒等）、病原微生物感染 （藍(lán)耳病病毒、細(xì)小病毒、圓環(huán)病毒等感染）等是導(dǎo)致死胎、木乃伊胎、弱仔的主要原因[6]。由于防御素對(duì)病原微生物具有殺滅作用，能夠廣譜殺滅細(xì)菌、病毒，調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)活性，因此長(zhǎng)期使用能夠凈化母豬體內(nèi)病原，增強(qiáng)母豬體質(zhì)，減少木乃伊胎、死胎、弱仔的產(chǎn)生，從而降低養(yǎng)豬成本，提高經(jīng)濟(jì)效益。

由于剛出生的仔豬免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善，其免疫力主要依靠母乳中的母源抗體維持，因此，母源抗體水平的高低決定了仔豬的健康狀態(tài)。在試驗(yàn)中，飼喂了防御素的母豬產(chǎn)的仔豬健康水平明顯優(yōu)于對(duì)照組，仔豬的發(fā)病率和死亡率都明顯降低。

表1 防御素對(duì)母豬健康的影響

表2 防御素對(duì)仔豬健康的影響

由于斷奶仔豬沒有母源抗體的保護(hù)，而自身免疫系統(tǒng)還未發(fā)育完全，因此保育豬很容易發(fā)生疾病，嚴(yán)重的甚至導(dǎo)致死亡，嚴(yán)重降低了豬場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益。在試驗(yàn)中我們給斷奶仔豬飼喂添加了基因工程豬防御素的飼料，斷奶仔豬的發(fā)病率和死亡率明顯下降，表明防御素能夠提高仔豬體質(zhì)，增強(qiáng)其抗病力。

綜上所述，基因工程豬防御素能夠明顯提高母豬的生產(chǎn)性能以及仔豬的抗病力，對(duì)于提高豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益有重要作用。

[1]樊福好.我國(guó)豬群健康管理體系的構(gòu)建.養(yǎng)豬，2011（3）：57-60.

[2]佟建明.飼用抗生素的促生長(zhǎng)作用機(jī)制及其替代技術(shù)研究.新飼料，2006（2）：5-8.

[3]余興邦，郭鎖鏈，烏翠蘭，等.防御素研究進(jìn)展.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2006，27（8）：47-51.

[4]庹曉曄.β-防御素上皮組織天然的化學(xué)防御屏障.國(guó)外醫(yī)學(xué)：外科學(xué)分冊(cè)，2002（2）：9-12.

[5]安沙，韓菲菲，高彥華.β-防御素在金華豬和長(zhǎng)白豬腸道中表達(dá)規(guī)律的研究.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)，2011（10）：122-128.

[6]李堅(jiān)耀.豬細(xì)小病毒及腸道病毒引起的母豬不孕、死胎、木乃伊胎綜合征.畜牧與獸醫(yī)，1984（1）：38-39.