冰連清咽噴霧劑的主要藥效學(xué)研究

吳 玲* 熊藝花 袁 捷 李錦清 李 婧 羊 彪

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東 廣州 510006）

冰連清咽噴霧劑是由大黃、硼砂、冰片、青黛等10味藥物組成，用于治療肺胃實(shí)熱的急性咽炎，證見：咽喉紅腫疼痛，咽干灼熱，咽粘膜或懸雍垂紅腫，發(fā)熱，咳嗽咯痰，大便干或小便黃赤。為明確冰連清咽噴霧劑用于治療急性咽炎和慢性咽炎急性發(fā)作的藥效學(xué)基礎(chǔ)，保證其臨床使用安全性和有效性，參照中藥新藥研究指導(dǎo)原則，對(duì)其相關(guān)藥效學(xué)進(jìn)行了系統(tǒng)研究。采用多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型觀察冰連清咽噴霧劑的抗炎活性。

1 材料與方法

1.1 受試藥物

冰連清咽噴霧劑由重慶市北碚區(qū)中醫(yī)院提供，批號(hào)991019；含量：每毫升含原生藥0.759g，20%乙醇；配制方法：以蒸鎦水稀釋所需濃度；給藥途徑：灌服給藥。

1.2 動(dòng)物

一級(jí)日本大耳白種家兔（批號(hào) 醫(yī)動(dòng)字第24301030號(hào)）；上述動(dòng)物均由重慶市中藥研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究室提供。

表1 冰連清咽噴霧劑對(duì)甲醛所致小鼠皮膚炎癥的影響（±SD）

表1 冰連清咽噴霧劑對(duì)甲醛所致小鼠皮膚炎癥的影響（±SD）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001（下同）

組別 劑量（g/kg） 皮膚致炎程度（mg）1h 2h 4h對(duì)照組 － 87.10±17.90 126.42±29.29 99.40±20.96 20%乙醇 0.1ml 76.92±24.14 93.10±17.80** 86.20±19.23冰連清咽噴霧劑 4.0 62.32±18.80** 77.42±13.37*** 73.72±14.29**冰連清咽噴霧劑 2.0 71.43±16.71 78.64±21.43*** 98.84±16.80冰連清咽噴霧劑 1.0 79.40±14.81 84.36±14.42*** 99.32±19.91開喉劍噴霧劑 1ml 67.69±15.98* 80.24±14.73*** 92.84±21.53

1.3 實(shí)驗(yàn)環(huán)境

一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，設(shè)施合格證號(hào)2403013。

1.4 方法[1-4]

1.4.1 對(duì)甲醛所致小鼠皮膚炎癥的影響[4]

選用體質(zhì)量在（28±2）g小鼠180只，雌雄各半，隨機(jī)均分6組（n=30）。每鼠在劍突下0.5cm處注射1%甲醛水溶液0.05mL，治療組分別涂以冰連清咽噴霧劑（4.0、2.0、1.0g/kg），陽性對(duì)照組涂以開喉劍噴霧劑、賦型劑組涂以20%乙醇0.1mL/只；對(duì)照組涂以等體積蒸鎦水。涂藥后1h、2h、4h，取致炎處皮膚，打孔，稱重。結(jié)果見表1。

1.4.2 對(duì)巴豆油所致小鼠耳腫脹的影響

選用體質(zhì)量在（20±2）g小鼠105只，雌雄各半，隨機(jī)均分7組（n=15）。藥物組分別灌服冰連清咽噴霧劑4.0、2.0、1.0g/kg，陽性對(duì)照組灌服開喉劍噴霧劑20ml/kg或強(qiáng)的松25mg/kg，賦型劑組灌服20%乙醇0.2mL/kg，每天給藥1次，連續(xù)3d；對(duì)照組灌服等體積蒸鎦水。于末次給藥后1h，每鼠左耳涂以巴豆油合劑0.05mL。4h后處死動(dòng)物，沿耳廓線剪下兩耳，稱取兩耳重量，以重量差值作為腫脹程度。結(jié)果見表2。

1.4.3 對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響

選用體質(zhì)量在（20±2）g小鼠105只，雌雄各半，隨機(jī)均分7組（n=15）。藥物組分別灌服冰連清咽噴霧劑4.0、2.0、1.0g/kg。陽性對(duì)照組灌服開喉劍噴霧劑20mL/kg 或醋酸潑尼可松片25mg/kg，賦型劑組灌服20%乙醇0.2mL/kg，每天給藥一次，連續(xù)3d；對(duì)照組灌服等體積蒸鎦水。于末次給藥后1h，每鼠尾靜脈注射0.5%依文思蘭生理鹽水0.2mL/只，20min后處死小鼠，剪開腹腔，用5mL生理鹽水分?jǐn)?shù)次沖洗腹腔，合并洗液，再加適量生理鹽水使總量為6ml，3000轉(zhuǎn)/min離心15min，取上清液于590nm比色，讀取光密度。結(jié)果見表3。

1.4.4 對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響

選用體質(zhì)量150～180g大鼠70只，雌雄各半，隨機(jī)均分7組（n=10）。連續(xù)3d，于末次給藥后即在每鼠石跖皮下注射1%角叉菜膠混懸液0.1ml，用特制透明軟尺測(cè)量給藥后1、2、4、6h足跖腫脹程度，計(jì)算腫脹率和抑制率。結(jié)果見表4。

1.4.5 棉球肉芽的影響

選用體質(zhì)量在（150±20）g小鼠105只，雌雄各半，隨機(jī)均分7組（n=15）。在每鼠的左右蹊部用碘酒消毒，75%乙醇脫碘后，各切1cm長的小口，用鑷子將20mg（10+10）的高壓滅菌棉球（每個(gè)棉球滴上青霉素和鏈霉素混合液0.1mL）從切口處植入皮下，隨即縫合皮膚。術(shù)后第二天開始灌服給藥，每天給藥一次，連續(xù)5d；于末次給藥后1h，打開原切口，將棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出，去掉脂肪組織，置烘箱60℃烘干，稱重，將稱的重量減去原棉球重量，即得肉芽腫重量。結(jié)果見表5。

2 結(jié) 果

由表1可見，冰連清咽噴霧劑4.0g/kg在1h即表現(xiàn)出非常顯著的抑制作用（P＜0.01），并在4h時(shí)仍能保持這一作用（P＜0.01）；陽性藥開喉劍噴霧劑在1h時(shí)亦出現(xiàn)顯著的抑制作用（P＜0.05），但不能持續(xù)到4h（P＞0.05）；除對(duì)照組外，各組在2h時(shí)均對(duì)致炎皮膚有非常顯著的抑制作用（P＜0.01）。

表2 對(duì)巴豆油所致小鼠耳腫脹的影響（±SD）

表2 對(duì)巴豆油所致小鼠耳腫脹的影響（±SD）

組別 劑量（g/kg） 腫脹度（mg）對(duì)照組 － 48.01±15.18 20%乙醇 0.2ml 40.65±7.51冰連清咽噴霧劑 4.0 29.29±8.41***冰連清咽噴霧劑 2.0 34.92±7.48**冰連清咽噴霧劑 1.0 34.03±6.63**強(qiáng)的松 0.025 36.91±8.88*開喉劍噴霧劑 20ml 17.50±5.18***

由表2可見，冰連清咽噴霧劑4.0、2.0、1.0g/kg對(duì)巴豆油所致小鼠的耳腫脹有非常顯著的抑制作用（P＜0.01～0.001），賦型劑則無此作用（P＞0.05）。

表3 對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響（±SD）

表3 對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響（±SD）

組別 劑量（g/kg） 光密度（OD）對(duì)照組 － 0.380±0.113 20%乙醇 0.2ml 0.343±0.106冰連清咽噴霧劑 4.0 0.208±0.121**冰連清咽噴霧劑 2.0 0.258±0.117**冰連清咽噴霧劑 1.0 0.230±0.091**潑尼松 0.025 0.217±0.131**開喉劍噴霧劑 20ml 0.263±0.113*

由表3可見，冰連清咽噴霧劑4.0、2.0、1.0g/kg均對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性有極顯著的抑制作用（P＜0.001），賦型劑無抑制作用（P＞0.05）。

由表4可見，冰連清咽噴霧劑可以顯著地抑制角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹（P＜0.01～0.001），賦型劑無此作用（P＞0.05）。

由表5可見，冰連清咽噴霧劑可以顯著地抑制大鼠足跖腫脹（P＜0.01），賦型劑組無此作用（P＞0.05）。

3 討 論

咽炎是臨床的常見病，主要為咽部黏膜、黏膜下及淋巴組織和喉室黏膜與聲帶的彌漫性炎癥，多由于急性炎癥反復(fù)發(fā)作所致，也有煙酒過度等不良生活習(xí)慣或長期吸入有害氣體等因素所致。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為多因“陰虛火旺，虛火上擾，以至咽喉失養(yǎng)”而發(fā)病。

慢性咽炎是耳鼻喉科的門診常見病之一，多見于成年人，近年來青少年發(fā)病率也有增長的趨勢(shì)。冬季，慢性咽炎常會(huì)急性發(fā)作。慢性咽炎大多是因急性咽炎反復(fù)發(fā)作的結(jié)果。此外，各種鼻病及呼吸道慢性炎癥，長期張口呼吸及炎性分泌物反復(fù)刺激咽部；煙酒過度，辛辣刺激性食物、空氣污染、有害氣體刺激，過敏體質(zhì)或全身性慢性疾病使身體抵抗力下降等，都可引起發(fā)作。

表4 對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響（±SD）

表4 對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響（±SD）

腫脹率/抑制率（%）1h 2h 4h 6h對(duì)照組 － 20.84±4.57 34.46±4.47 45.07±4.73 49.28±3.70 20%乙醇 0.2ml 19.04±3.34（8.64） 33.52±3.93（2.73） 43.76±3.89（2.91） 49.26±4.34（0.04）冰連清咽噴霧劑 4.0 11.81±2.27***（43.33） 21.48±7.47***（37.67） 30.04±6.78***（33.35） 34.71±5.70***（29.57）冰連清咽噴霧劑 2.0 16.16±3.52*（22.46） 24.66±6.41***（28.44） 34.67±4.94***（23.08） 37.68±5.37***（23.54）冰連清咽噴霧劑 1.0 19.12±2.36（8.25） 23.30±5.58***（29.02） 37.45±7.29*（16.91） 42.00±6.96**（14.77）強(qiáng)的松 0.02 15.52±2.72**（25.53） 19.66±3.97***（42.95） 33.34±3.52***（25.80） 35.72±4.88***（27.52）強(qiáng)的松 0.01 15.23±3.22**（25.23） 22.85±5.03***（33.69） 33.49±6.68***（25.69） 38.66±7.93***（21.55）強(qiáng)的松 0.01 15.23±3.22**（25.23） 22.85±5.03***（33.69） 33.49±6.68***（25.69） 38.66±7.93***（21.55）組別（n=10） 劑量（g/kg）

表5 對(duì)棉球肉芽的影響（±SD）

表5 對(duì)棉球肉芽的影響（±SD）

組別 劑量（g/kg） 腫脹度（mg）對(duì)照組 － 35.58±7.16 20%乙醇 0.2ml 32.95±7.73冰連清咽噴霧劑 4.0 26.03±4.78**冰連清咽噴霧劑 2.0 29.06±3.28*冰連清咽噴霧劑 1.0 33.88±9.21*強(qiáng)的松 0.025 20.92±1.49***強(qiáng)的松 0.0125 25.60±7.00**

急性咽炎屬中醫(yī)學(xué)急喉痹范疇，常因氣候急劇變化，起居不慎，肺衛(wèi)失固，而為風(fēng)熱邪毒乘虛侵犯，從口鼻直襲咽喉，在內(nèi)肺胃有熱，內(nèi)外邪毒交結(jié)致咽喉腫痛而發(fā)病。冰連清咽噴霧劑該方集冰硼散、冰麝散、錫類散、珠黃散和如意金黃散諸名方為基礎(chǔ)化裁而成。方中以大黃清熱解毒，硼砂、冰片、薄荷腦、青黛清熱開竊止痛，芒硝、黃連、姜黃、金銀花切熱下行，活血止痛，綜觀全方，清熱、通泄、宣散、活血、消腫、止痛，為標(biāo)本兼顧，內(nèi)外合治之良方。經(jīng)臨床運(yùn)用證明，對(duì)急性咽炎和慢性咽炎急性發(fā)作具有良好的效果。我們采用了多種炎癥、疼痛和發(fā)熱模型，對(duì)其主要功能主治進(jìn)行了的藥效學(xué)研究。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明冰連清咽噴霧劑能顯著抑制甲醛、巴豆油和醋酸所致的毛細(xì)血管通透性的增高，對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖的腫脹和棉球肉芽腫的生成亦有顯著的抑制作用；上述試驗(yàn)結(jié)果為冰連清咽噴霧劑臨床治療急性咽炎和慢性咽炎急性發(fā)作提供了充實(shí)的生物學(xué)依據(jù)。

[1]徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,1993：506-545.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,1993：364-369.

[3]中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局.中藥新藥研究指南(藥學(xué)、藥理、毒理學(xué))[S].1994,210.

[4]孫海英.丁苯乙肟對(duì)甲醛皮膚致炎模型的抗炎作用研究[J].中國藥理學(xué)通報(bào),1998,4(3)：159.