何曉峰 章 引

我國(guó)是肝臟疾病大國(guó)，且肝硬化發(fā)病率日漸升高。腹水是肝硬化失代償期患者最為顯著的臨床表現(xiàn)（占75%以上），可能出現(xiàn)自發(fā)性腹膜炎（SBP）或癌變。臨床上通常采用手工法顯微鏡細(xì)胞學(xué)檢查進(jìn)行輔助診斷，但效率較低，結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性也較差。新型Sysmex全血自動(dòng)分析儀（XT4000i、XE5000）已配備體液模式和腫瘤細(xì)胞參數(shù)，具備強(qiáng)大的體液檢測(cè)功能，但主要面向大型綜合性醫(yī)院，在很多基層醫(yī)院未能購(gòu)買使用。經(jīng)典的Sysmex XS、XT系列全自動(dòng)血液分析儀采用的檢測(cè)原理在核心技術(shù)（半導(dǎo)體激光＋DNR、RNA染色＋流式細(xì)胞技術(shù)）上與新型的XT4000i等是相同的，因而也應(yīng)該具備腹水標(biāo)本檢測(cè)和異常細(xì)胞提示功能。本文以Sysmex中低端儀器的代表XT－1800i全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)246例晚期肝硬化腹水標(biāo)本的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類及異常細(xì)胞，并與傳統(tǒng)手工鏡檢對(duì)比，分析其相關(guān)性、一致性、靈敏度、特異性等，為臨床診斷提供更多依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 病例和標(biāo)本采集

我院2009年12月～2011年11月收治的246例晚期肝硬化腹水患者。男204例，女42例，年齡28～65歲，病程5～20年。診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《傳染病學(xué)》［1］。腹水標(biāo)本采集：由有經(jīng)驗(yàn)的臨床醫(yī)師于患者入院次日按漿膜腔積液常規(guī)抽取方法采集腹水標(biāo)本送檢，為防止標(biāo)本出現(xiàn)凝塊、細(xì)胞變性、細(xì)菌破壞自溶等，應(yīng)用EDTA－K2抗凝。每例患者取10ml等分成兩個(gè)5ml，0.5～1h內(nèi)分別完成手工法和儀器法檢測(cè)。

1.2 儀器及試劑

XT－1800i全自動(dòng)血液分析儀及配套試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品為日本Sysmex公司產(chǎn)品；Olympus顯微鏡（日本奧林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會(huì)社）；瑞氏染液（珠海貝索生物技術(shù)有限公司）。

1.3 檢測(cè)方法

儀器法按照Sysmex公司提供的標(biāo)準(zhǔn)操作流程，上機(jī)前確認(rèn)無(wú)凝塊，肉眼見濃稠度較高者進(jìn)行適當(dāng)稀釋，于儀器界面直接讀取白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類；異常細(xì)胞以儀器界面的科研參數(shù)為準(zhǔn)，報(bào)警即為陽(yáng)性。手工法操作參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［2］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用spearman相關(guān)檢驗(yàn)評(píng)價(jià)儀器法與手工法對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類的相關(guān)性；以手工法檢測(cè)腹水異常細(xì)胞的結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算儀器法的靈敏度、特異度、Youden指數(shù)、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值；應(yīng)用Kappa值（＞0.8為有良好一致性）進(jìn)行兩種方法的一致性評(píng)價(jià)。所有統(tǒng)計(jì)分析均采用SPSS13.0軟件包。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類

儀器法和手工法檢測(cè)結(jié)果顯示：兩種方法對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞和淋巴／單核細(xì)胞分類的最小值、最大值、均值均非常接近呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)均＞0.950（P＜0.05）。見表1。

2.2 兩種方法檢測(cè)腹水異常細(xì)胞的陽(yáng)性率比較

在所有標(biāo)本中，儀器法檢測(cè)出18例陽(yáng)性標(biāo)本，陽(yáng)性率7.32%，手工法進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)確認(rèn)10例為腫瘤細(xì)胞，陽(yáng)性率4.07%，儀器法有2例漏檢，占整體比例為0.81%，兩種方法的Kappa值＝0.9512＞0.8，有極好的一致性。以手工鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)，儀器法檢測(cè)異常細(xì)胞靈敏度為80.00%，特異度為99.12%，Youden指數(shù)為0.7912。本院晚期肝硬化癌變率為10%，計(jì)算其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為91.01%，陰性預(yù)測(cè)值為97.80%。

表1 兩種方法白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類結(jié)果的相關(guān)性分析（n＝246）

3 討 論

胸腹水的白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類對(duì)臨床相關(guān)疾病的診斷、治療有較重要的意義。張勇等［3］研究指出，全自動(dòng)血液分析儀完全適用于胸腹水細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類檢查，既可省去顯微鏡計(jì)數(shù)法的繁瑣手續(xù)，又可以達(dá)到準(zhǔn)確、快速的目的。本文結(jié)果顯示儀器法和手工法檢測(cè)肝硬化腹水患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類結(jié)果具有顯著正相關(guān)性，與相關(guān)研究結(jié)果［3～5］一致。另外，儀器法檢測(cè)結(jié)果對(duì)不同醫(yī)院間可能具有更好的可比性，尤其對(duì)病程較長(zhǎng)、需要轉(zhuǎn)診的肝硬化患者病情的動(dòng)態(tài)觀察更為有利。

對(duì)于全自動(dòng)血液分析儀異常報(bào)警情況，王靜等［6］報(bào)道全血檢測(cè)時(shí)Blast與鏡檢相比準(zhǔn)確率僅為33.3%，劉伯讓等［7］報(bào)道全血檢測(cè)時(shí)異常細(xì)胞假陽(yáng)性率為3%，其原因可能與采血操作不當(dāng)或臨床因素使血細(xì)胞的大小、形態(tài)及內(nèi)容物發(fā)生改變，致其產(chǎn)生的電阻抗、散射光及熒光信號(hào)不規(guī)則，儀器無(wú)法正確識(shí)別所造成。本文標(biāo)本為腹水，白細(xì)胞計(jì)數(shù)范圍為0.12～2.65×109／L，均值0.572×109／L，遠(yuǎn)低于血液中正常含量4.00～10.00×109／L，且成分相對(duì)單一，因此受影響較小，結(jié)果與鏡檢保持了良好的一致性。表明全自動(dòng)血液分析儀對(duì)異常細(xì)胞，包括腫瘤細(xì)胞具有較好的提示作用。

本文儀器法和手工法檢測(cè)的白細(xì)胞總數(shù)和分類數(shù)據(jù)均不符合正態(tài)性分布，因此均值以中位數(shù)表示。3個(gè)指標(biāo)檢測(cè)數(shù)據(jù)中均為手工法的低值低于儀器法，高值高于儀器法，表觀區(qū)域更寬，可能系手工法人工誤差較大，數(shù)據(jù)離散度更高所致。李瑩等［8］亦提示血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)胸腹水白細(xì)胞可能更加精確，更能排除操作人員視覺及操作的人為差異。

1 彭文偉 主編.傳染病學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：21～50.

2 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.南京：東南大學(xué)出版社，2006：132～135.

3 張 勇，伍淑嫻，余秀文.全自動(dòng)五分類血液分析儀在胸腹水檢測(cè)中的應(yīng)用［J］.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，10（31）：1 175～1 176.

4 謝 軍.胸腹水細(xì)胞計(jì)數(shù)自動(dòng)分析方法的探討［J］.中國(guó)實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2009，19（1）：7.

5 胡曉衛(wèi)，白 雯.自動(dòng)化分析儀在胸腹水細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類中的應(yīng)用［J］.陜西醫(yī)學(xué)雜志，2009，38（7）：928～929.

6 王 靜，莊培英，蔡 姝.Sysmex XT－1800i血液分析儀白細(xì)胞分類異常報(bào)警的臨床價(jià)值分析［J］.中國(guó)冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2008，25（2）：231～232.

7 劉伯讓，裴衛(wèi)國(guó)，薛彩霞，等.SF－3000血細(xì)胞分析儀649例假異常結(jié)果的調(diào)查分析［J］.中國(guó)醫(yī)院管理雜志，2009，7（6）：44.

8 李 瑩，孫玉鴻，王英敏.UF－100尿液分析儀及血細(xì)胞分析儀在胸腹水白細(xì)胞計(jì)數(shù)中的對(duì)比性研究［J］.黑龍江醫(yī)學(xué)科學(xué)，2010，33（1）：134～135.