余 蓉，邱少紅，李傳恒，管紅霞，潘 虹 (石首市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 石首 434400)

血液分析儀計(jì)數(shù)低值血小板的誤差分析

余 蓉，邱少紅，李傳恒，管紅霞，潘 虹 (石首市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 石首 434400)

目的：探討血液分析儀對(duì)低值血小板的計(jì)數(shù)誤差。方法：2011年11月至2012年2月間用CD-1800血液分析儀檢測(cè)的1670例新鮮血液常規(guī)標(biāo)本中，檢測(cè)出血小板數(shù)<100×109/L的血標(biāo)本91例，以及同期用Sysmex XE-2100D型血液分析儀測(cè)定的5980例新鮮血液常規(guī)標(biāo)本中，檢測(cè)出血小板數(shù)<100×109/L的血標(biāo)本397例，分別與手工血小板計(jì)數(shù)法比較檢測(cè)的一致性；用同時(shí)在兩機(jī)上進(jìn)行復(fù)查檢測(cè)的69例血小板數(shù)<100×109/L血標(biāo)本,采用Kappa統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析血液分析儀對(duì)低值血小板檢測(cè)的準(zhǔn)確性。結(jié)果：全自動(dòng)血液分析儀在血小板計(jì)數(shù)(0～99)×109/L時(shí)，總符合率>90%,Kappa值均>0.80。但在BPC(51～99)×109/L時(shí)XE-2100D與手工法計(jì)數(shù)血小板的符合率僅達(dá)84.6% ；CD-1800型血液分析儀在血小板計(jì)數(shù)<15×109/L時(shí)，與實(shí)際值符合率僅50%，Kappa值95%的可行限下限均<0.8。結(jié)論：全自動(dòng)血液分析儀對(duì)低值血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性較好，但隨著血小板數(shù)值的降低，其準(zhǔn)確性有所下降。當(dāng)血小板計(jì)數(shù)<15×109/L時(shí)，血液分析儀對(duì)血小板的計(jì)數(shù)有一定誤差，應(yīng)重視血涂片復(fù)審。有條件時(shí)建議用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)復(fù)核。

低值血小板； 血液分析儀； 手工血小板計(jì)數(shù)法

準(zhǔn)確計(jì)數(shù)低值血小板已成為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域一個(gè)亟待解決的問題。國(guó)際血液標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(ICSH)推薦的血小板計(jì)數(shù)國(guó)際參考方法[1-2](流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法)未在基層醫(yī)院普及，所以對(duì)低值血小板的復(fù)核多為手工計(jì)數(shù)法復(fù)核。目前國(guó)際上尚未可供溯源性計(jì)量的血小板標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)低值血小板的復(fù)核標(biāo)準(zhǔn)也各不相同。血小板減少有真性與假性減少之分，近年來對(duì)EDTA依賴性假性血小板減少屢見報(bào)道。本研究旨在探討本科室的復(fù)核標(biāo)準(zhǔn)，以期杜絕假性血小板減少對(duì)臨床的誤導(dǎo)，減少病人的痛苦。

1 材料與方法

1.1新鮮全血標(biāo)本

收集我院2011年11月20日至2012年2月1日病房和門診血常規(guī)檢測(cè)中血小板數(shù)<100×109/L的血標(biāo)本，其中CD-1800檢測(cè)出91例，XE-2100D檢測(cè)出397例。對(duì)血小板計(jì)數(shù)偏低的標(biāo)本除用兩儀器進(jìn)行相互比對(duì)外，均采取手工計(jì)數(shù)法復(fù)核。復(fù)核前，須涂片瑞氏染色鏡檢，觀察全片血小板分布情況，若有血小板聚集現(xiàn)象者，換用肝素抗凝管重新采集靜脈血標(biāo)本，用儀器和手工計(jì)數(shù)法[3]復(fù)核。患者年齡0～90歲，中位年齡46歲。男性 31例，女性 38例。采血后5h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2儀器和試劑

美國(guó)雅培CD-1800型血液分析儀，日本Sysmex XE-2100D型血液分析儀。儀器使用質(zhì)控品為天津美德太平洋全血質(zhì)控物，試劑為山東蘭橋稀釋液，溶血?jiǎng)?、鞘液為日本原裝進(jìn)口。使用前各儀器分別用原裝校準(zhǔn)品校準(zhǔn)，并需先檢測(cè)質(zhì)控品，在控后，再檢測(cè)新鮮全血標(biāo)本。

1.3方法

新鮮全血標(biāo)本經(jīng)充分顛倒混勻后再經(jīng)校準(zhǔn)的CD-1800和XE-2100D型血液分析儀上分別計(jì)數(shù)血小板，并觀察有無血小板報(bào)警信號(hào)出現(xiàn)及出現(xiàn)的類型。

1.4根據(jù)手工法計(jì)數(shù)的BPC計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行分組

第1組：血小板計(jì)數(shù)(51～99)×109/L；第2組：血小板計(jì)數(shù)(16～50)×109/L；第3組：血小板計(jì)數(shù)(0～15)×109/L。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用Kappa統(tǒng)計(jì)學(xué)方法[4]進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié) 果

各組用血液分析儀與手工計(jì)數(shù)血小板結(jié)果符合率和Kappa檢驗(yàn)結(jié)果見表1、表2、表3。

表1 CD-1800與手工計(jì)數(shù)血小板結(jié)果比較

注：Kappa=0.894 , s=0.184 ,95%可信限下限=0.584。

表2 XE-2100D與手工計(jì)數(shù)血小板結(jié)果比較 (單位：×109/L)

注：Kappa=0.969, s=0.267 ,95%可信限下限=0.446。

表3 CD-1800與XE-2100D血小板結(jié)果比較(單位：×109/L)

注：Kappa=0.901 , s=0.218 ,95%可信限下限=0.473。

表1～3顯示，無論CD-1800或XE-2100D，在BPC<100×109/L時(shí)，全自動(dòng)血液分析儀與手工法計(jì)數(shù)血小板結(jié)果總符合率>90%,Kappa值均>0.80。但在BPC<15×109/L時(shí)，CD-1800與手工法計(jì)數(shù)血小板的符合率僅達(dá)50%，95%Kappa可信限下限均<0.8；在BPC<(51～99)×109/L時(shí)XE-2100D與手工法計(jì)數(shù)血小板的符合率僅達(dá)84.6%。原因可能是CD-1800本身對(duì)低值血小板的計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性偏低，所以科室員工對(duì)此儀器檢測(cè)出的低值血小板的復(fù)核警覺性偏高；而XE-2100D符合率偏低，可能原因是對(duì)EDTA導(dǎo)致的假性血小板所致的血小板減少的篩查率偏低，偶然誤差使其準(zhǔn)確率偏低有關(guān)。

3 討 論

由以上研究可以初步制定我科低值血小板的復(fù)核標(biāo)準(zhǔn)：凡發(fā)現(xiàn)全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)BPC<100×109/L時(shí)，均須涂片瑞氏染色鏡檢，觀察全片血小板分布情況，若有血小板聚集現(xiàn)象者，均換用肝素抗凝管重新采集靜脈血標(biāo)本，用儀器和手工計(jì)數(shù)法復(fù)核。以排除因EDTA導(dǎo)致的血小板假性減少的誤報(bào)率，正確指導(dǎo)臨床診斷，避免誤診誤治釀成醫(yī)療糾紛。低值血小板是正確指導(dǎo)臨床，判斷患者是否需要輸注血小板的一個(gè)重要指標(biāo)，所以準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)血小板已成為一個(gè)迫切需要解決的問題。因手工復(fù)核尚存在很多技術(shù)上的問題[5-6]，2001年ICSH推薦了間接法血小板計(jì)數(shù)的新的國(guó)際參考方法(FCM)，以彌補(bǔ)手工法復(fù)核的不足。我們的研究與國(guó)內(nèi)許蕾等的文獻(xiàn)報(bào)道[7]在BPC<50×109/L時(shí)，血液分析儀與FCM法的總符合率>90%,Kappa值>0.8基本相符。本研究在BPC<15×109/L時(shí)，血液分析儀與手工法計(jì)數(shù)血小板的一致性有些不足，如要求更為準(zhǔn)確的結(jié)果而條件又具備時(shí)，則此類標(biāo)本可用FCM復(fù)核。

[1]ICSH.Cytometry panel platelet counting by RBC /platelet ratio method[J].AJCP,2001，115(3):460-464.

[2]Harrison P,Ault K A,Chapman S ,et al .AN interlaboratory study of a candidate reference method for platelet counting[J].AJCP，2001，115(3):448-449.

[3]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：136-137.

[4]顏虹，徐勇勇.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：214.

[5]朱忠勇.準(zhǔn)確計(jì)數(shù)血小板方法學(xué)研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué):臨床生化和檢驗(yàn)分冊(cè)，2002，23(30)：131-132.

[6]從玉隆，樂家新.現(xiàn)代血細(xì)胞分析技術(shù)與臨床[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2005：10-15.

[7]許蕾，宋穎，沈薇，等.血液分析儀計(jì)數(shù)低值血小板的誤差[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2010，28(2)：151-152.

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.08.024

R446.11

A

1673-1409(2012)08-R049-03

2012-05-23

余蓉(1969-)，女，湖北石首人，副主任檢驗(yàn)技師，碩士，主要從事臨床免疫學(xué)及質(zhì)量控制工作。

[編輯] 何 勇