CD133和CD44在前列腺癌中的表達及意義

冀 陽，胡新生，郭國營

（河南省新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院 泌尿外二科，河南 新鄉(xiāng) 453000）

前列腺癌（cancer of prostate）是西方國家發(fā)病率較高的惡性腫瘤之一[1]。近年來，隨著我國人民的生活習(xí)慣及環(huán)境的改變，前列腺癌在我國的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增加的趨勢，目前已位居泌尿系統(tǒng)腫瘤的第3位，僅次于膀胱癌和腎癌。因為前列腺癌早期的臨床癥狀較為隱匿，出現(xiàn)臨床癥狀時已有遠處轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致預(yù)后不良，是臨床治療的難點。因此，尋找與前列腺癌細胞增殖，轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為相關(guān)的靶基因，對于提高前列腺癌的早期和治療方法具有重要的臨床意義，為此本研究對存檔的前列癌標本進行CD133和CD44的檢測，以期為臨床研究結(jié)直腸癌的的發(fā)病及轉(zhuǎn)移提理論基礎(chǔ)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2000年10月～2011年10月在我院確診為膀胱癌并進行手術(shù)的患者作為觀察組，共72例。納入標準：①經(jīng)過病理確認為前列腺癌；②術(shù)前患者均未進行激素、化療和放療等治療；③并且所有患者臨床資料包括腫瘤大小、數(shù)目、病理分級和臨床分期等均齊全。排除標準：①合并其他器官惡性腫瘤的患者；②伴有消化系統(tǒng)其他疾病的患者。并且選取33例病理證實為正常前列腺組織作為對照組。

1.2 免疫組化染色方法

CD133和CD44試劑均購于武漢博士德生物工程有限公司，SP試劑盒、DAB顯色劑均購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，嚴格按照試劑盒染色操作程序進行，具體步驟：石蠟切片脫蠟至水后，在 30 mL的 3%H2O2去離子水孵育10min以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性；抗原修復(fù)后分別滴加一抗，4℃過夜，PBS沖洗3次；滴加生物素標記的二抗工作液，37℃孵育 30min，PBS沖洗3次；滴加辣根酶標記鏈霉卵白素，37℃孵育 30 min，PBS沖洗3次；DAB顯色；自來水充分沖洗、蘇木復(fù)染、脫水透明和常規(guī)封片。用PBS代替-抗做陰性對照，操作全過程由同一病理技師完成，以避免人為誤差。

1.3 判斷標準

CD133和CD44結(jié)果判斷按照免疫組化染色陽性腫瘤細胞比例和染色強度進行評分，無陽性細胞為0分，＜10%為1分，10%～50%為2分，≥50%為3分，無著色為0分，輕度著色為1分，中度著色為2分，重度著色為 3分，＜3分為陰性（-），≥3分為陽性（+）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均經(jīng)過專人校隊后輸入計算機，采用SPSS11.5建立數(shù)據(jù)庫，單因素檢驗采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者CD133和CD44表達情況比較

CD133和CD44的在觀察組中的表達表達陽性率均明顯高于對照組，差異均有顯著性（P＜0.01），詳見表1。

2.2 CD133在不同臨床病理指標中的表達的比較

表1 CD133和CD44在病例組與對照組中的表達 例（%）

表2 CD133在不同臨床病理指標中的表達 例（%）

表3 CD44在不同臨床病理指標中的表達

CD133表達與病理分級分期，T分期，遠處轉(zhuǎn)移等指標密切相關(guān)（P＜0.05），而與前列腺癌患者的年齡，腫瘤數(shù)目，組織分型無明顯的相關(guān)性（P＞0.05），詳見表2。

2.3 CD44在不同臨床病理指標中的表達的比較

CD44表達與病理分級，T分期，遠處轉(zhuǎn)移，等指標密切相關(guān)（P＜0.05），而與前類型癌患者的年齡，腫瘤數(shù)目，組織分型無明顯的相關(guān)性（P＞0.05），詳見表3。

3 討論

前列腺癌是老年男性常見的惡性腫瘤之一，因其起病隱匿，并且臨床表現(xiàn)與前列腺增并無明顯的區(qū)別，常常被誤診為前列腺增生，直到出現(xiàn)尿路癥狀和骨痛才去就診，這時患腫瘤已發(fā)生了浸潤或轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差。前列腺癌在西方國家癌發(fā)病率較高，2008年美國發(fā)病率和死亡率分別居男性惡性腫瘤的前兩位[2]。近年來由于我國人民生存環(huán)境、飲食結(jié)構(gòu)、生活方式的改變以及人口老齡化的加劇，前列腺癌患者的發(fā)病率和死亡率也呈明顯增高趨勢[3]。因此，研究前列腺癌的腫瘤學(xué)發(fā)生、發(fā)展及產(chǎn)生機制，對指導(dǎo)前列腺癌的治療有具有重要意義。

近年來的研究顯示：腫瘤干細胞在許多惡性腫瘤組織中存在，并且在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的中發(fā)揮著重要作用，其中CD133和CD44是最常見的腫瘤干細胞特征性的表面標志物之一[4-5]，研究顯示：兩種標志物在前列腺癌細胞中存在CD133和CD44的表達，其中CD133主要位于前列腺癌細胞漿和胞膜中，CD44主要表達于前列腺癌細胞膜上，其在前列腺癌組織中有較強的增殖能力、克隆形成能力、致瘤能力[6-7]，但CD133和CD44與前列腺癌病理分級，臨床分期，腫瘤轉(zhuǎn)移，組織分型等的相關(guān)性目前尚不清楚。為此本研究采用免疫組化的方法對72例前列腺癌患者組織中的CD133和CD44進行了分型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：CD133和CD44都在各級別的前列腺癌組織中均可以見CD133和CD44陽性細胞，并且隨著前列腺癌的分級越高，病理分期越晚，CD133和CD44陽性細胞比例越高，并且有遠處骨轉(zhuǎn)移及其他器官轉(zhuǎn)移的患者前列腺癌組織中兩種標記物陽性比例也明顯高于未發(fā)生轉(zhuǎn)移的前列腺癌患者，這說明CD133和CD44與前列腺癌病理分級，臨床分期，腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，以往對于前列腺癌的實驗室診斷主要依靠血清前列腺特異性抗原（PSA）是目前臨床診斷前列腺癌主要方法之一，但存在一定的假陽性，限制了其在前列腺癌的診斷中的應(yīng)用價值，而本研究顯示CD133和CD44在前列腺癌與良性前列腺組織中的表達差異顯著，并且與與前列腺癌的臨床分期，病理分級，癌細胞轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，使CD133和CD44可能成為診斷前列腺癌的腫瘤標記物。但是本研究也存在局限性，未對前列腺癌患者進行隨訪，無法明確CD133和CD44與前列腺癌的預(yù)后是否存在相關(guān)性。為此，本研究在以后的研究中將重點關(guān)注CD133和CD44與前列腺癌長期生存率的相關(guān)性。

綜上所述，前列腺癌患者中CD133和CD44異常表達，二者在前列腺癌的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，并且與前列腺癌的病理分級、臨床分期和癌轉(zhuǎn)移具有密切相關(guān)性。

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