1.項(xiàng)目選題的背景
　　背景：雌激素受體（Estrogen receptor，ER）是配體依賴的類固醇激素核受體超家族成員之一，分為α和β兩種亞型。ER-α位于6q25～1，長(zhǎng)140kb，編碼由595個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)。ER-α蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)從N端到C端共分為A～F六個(gè)功能區(qū)：A/B區(qū)為轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)，位于氨基末端，A/B區(qū)中有一個(gè)非配體依賴性轉(zhuǎn)錄激活功能區(qū)AF-1，它通過(guò)和基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄因、輔助激活因子和其他轉(zhuǎn)錄因子相互作用，介導(dǎo)信號(hào)向下游蛋白傳遞，從而激活靶基因，A/B能調(diào)節(jié)ER和DNA的相互作用，選擇正確的雌激素應(yīng)答元件及調(diào)控靶基因表達(dá)；C區(qū)為DNA結(jié)合區(qū)，是富含堿性氨基酸和半胱氨酸的高度保守區(qū)；D區(qū)為多變的鉸鏈區(qū)，允許受體彎曲、旋轉(zhuǎn)或構(gòu)象改變，形成受體二聚體，并與同向或反向重復(fù)反應(yīng)元件結(jié)合以發(fā)揮作用，D區(qū)還含有核定位信號(hào)，具有穩(wěn)定DBD的DNA結(jié)合作用；E/F區(qū)包括配基結(jié)合區(qū)，共調(diào)節(jié)因子結(jié)合表面、二聚化區(qū)和配基依賴性轉(zhuǎn)錄激活功能區(qū)AF-2。
　　2000年，F(xiàn)louriot等研究首次發(fā)現(xiàn)ER-α66（傳統(tǒng)觀念的ER-α）的同源異構(gòu)體。同先前的ER-α66相比，它剪切了A、B區(qū)，缺乏N末端173個(gè)氨基酸，分子量為46KD，故被命名為ER-α46。
　　2005年，王兆一等研究首次報(bào)告ER-α66的另一同源異構(gòu)體——ER-α36，它剪切了A、B區(qū)及F區(qū)，缺乏N末端173個(gè)氨基酸及CN末端138個(gè)氨基酸，分子量為36KD，故被命名為ER-α36，且初步證明了ER-α36表達(dá)不完全依賴ER-α66，其功能類似于生長(zhǎng)因子受體，很可能參與抑制ER-α66介導(dǎo)的經(jīng)典雌激素信號(hào)傳導(dǎo)通路并激活細(xì)胞膜介導(dǎo)促細(xì)胞分裂的雌激素信號(hào)傳導(dǎo)。
　　ER是經(jīng)典的核受體，是核受體超家族成員之一，是執(zhí)行生長(zhǎng)與分化、增殖與凋亡等重要細(xì)胞內(nèi)生理功能的分子元件。ER與雌激素結(jié)合后，激活基因轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮其生長(zhǎng)調(diào)控作用。
　　近年國(guó)內(nèi)外報(bào)道，許多不屬于激素靶器官的腫瘤，如肺癌和腦膜瘤等測(cè)出了激素。
　　Tokunaga等首次發(fā)現(xiàn)胃癌可表達(dá)ER及孕激素受體，并推斷其可能為雌激素依賴性腫瘤，以后國(guó)內(nèi)外學(xué)者不僅應(yīng)用不同的方法證實(shí)胃癌細(xì)胞ER表達(dá)的事實(shí)，而且開始給胃癌患者使用tamoxifen（TAM）。但至今TAM用于ER-α陽(yáng)性，即傳統(tǒng)的ER-α66陽(yáng)性的胃癌的輔助治療效果不佳，未被全球?qū)＜夜J(rèn)。因此，推測(cè)可能存在另外一種雌激素受體ER-α36途徑激活胃癌細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期。
　　本項(xiàng)目組前期研究從蛋白水平及mRNA水平證實(shí)胃癌培養(yǎng)細(xì)胞株SGC-7901、MKN45、MKN28、AGS中表達(dá)ERα36，且人體胃癌組織均表達(dá)ERα36，且證實(shí)ERα36參與胃癌雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。
　　筆者2009年在王兆一實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)，ER-α36在乳腺癌細(xì)胞株MCF7細(xì)胞周期不同時(shí)相差異性表達(dá)。
　　選題意義：本研究擬通過(guò)對(duì)雌激素受體ER-α36在胃癌細(xì)胞株SGC7901G0與G1期表達(dá)差異性研究，探討ER-α36在胃癌細(xì)胞周期中的作用，從而為胃癌的早期檢測(cè)及靶向治療提供理論依據(jù)。
　　2.項(xiàng)目成員的組成、特長(zhǎng)、分工及成員間相互協(xié)調(diào)配合的情況，導(dǎo)師指導(dǎo)情況
　　本項(xiàng)目組成員均為女生，細(xì)心、認(rèn)真、負(fù)責(zé)，成員組同學(xué)相互合作、配合好，基本操作均由學(xué)生完成。導(dǎo)師指導(dǎo)學(xué)生項(xiàng)目申報(bào)、教授HE染色技術(shù)及原理、教授免疫熒光染色技術(shù)及原理、協(xié)助學(xué)生完成ER36免疫熒光染色過(guò)程、指導(dǎo)學(xué)生免疫熒光及HE閱片。
　　3.項(xiàng)目的創(chuàng)新點(diǎn)與特色
　　將新發(fā)現(xiàn)的雌激素受體ER-α36運(yùn)用于胃癌細(xì)胞周期的研究，首次提出ER-α36影響胃癌細(xì)胞周期的觀念，具有一定的創(chuàng)新性，為胃癌的激素治療開辟了新思路。
　　4.項(xiàng)目實(shí)施的進(jìn)展情況及取得的創(chuàng)新成果
　　完成了①SGC7901細(xì)胞培養(yǎng)；②同步化處理SGC7901細(xì)胞（G0期采用血清饑餓法，M采用秋水仙堿阻滯法）并制作細(xì)胞爬片；③細(xì)胞爬片免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色觀察同步化處理G0及M細(xì)胞的ERα36表達(dá)差別。
　　5.項(xiàng)目實(shí)施過(guò)程中的收獲與體會(huì)
　　通過(guò)指導(dǎo)學(xué)生科研，我深刻體會(huì)到學(xué)生科研不僅培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)新思維能力，而且提高了學(xué)生獨(dú)立思考的能力，還培養(yǎng)了學(xué)生的動(dòng)手操作能力。
　　讓學(xué)生參與科研，不僅提高了學(xué)生的觀察能力、分析問(wèn)題的能力及動(dòng)手操作的能力，而且培養(yǎng)了學(xué)生的科研能力。在實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程中，學(xué)生從課題的文獻(xiàn)綜述、選題立項(xiàng)、實(shí)驗(yàn)操作到實(shí)驗(yàn)報(bào)告撰寫，模擬了研究生的研究過(guò)程，提供了學(xué)生一個(gè)科研思路。此外，調(diào)動(dòng)了學(xué)生的探究科學(xué)的積極性。
　　另外，通過(guò)學(xué)生科研的指導(dǎo)，提高教師的思想素質(zhì)和業(yè)務(wù)素質(zhì)。進(jìn)行科研思維能力培訓(xùn)及多項(xiàng)綜合性實(shí)驗(yàn)技能的培訓(xùn)是一種新型的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式。學(xué)生科研要求指導(dǎo)教師不僅具有扎實(shí)的基礎(chǔ)理論知識(shí)，熟練的操作技能，而且積極跟蹤學(xué)科發(fā)展趨勢(shì)，不斷充實(shí)自己，才能給學(xué)生更好的指導(dǎo)，同時(shí)更多地要求指導(dǎo)教師有創(chuàng)新思維及創(chuàng)新能力。這對(duì)指導(dǎo)教師的教學(xué)思維及教學(xué)模式提出了巨大的挑戰(zhàn)，從而對(duì)教師的思想素質(zhì)和業(yè)務(wù)素質(zhì)提出了更高的要求。
　　通過(guò)了兩輪的學(xué)生科研的指導(dǎo)，筆者認(rèn)為學(xué)生科研目前還存在一些問(wèn)題亟待解決。
　　在學(xué)生科研實(shí)踐過(guò)程中，筆者認(rèn)為存在的最大的問(wèn)題是創(chuàng)新力度不夠。創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)究竟什么是創(chuàng)新？創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)是思維的創(chuàng)新，還是動(dòng)手能力的創(chuàng)新，抑或是單純的實(shí)驗(yàn)方式的創(chuàng)新？我認(rèn)為創(chuàng)新在很大程度上局限于實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ降母镄隆?br/>　　我們往往把學(xué)生科研等同于科研，把學(xué)生科研教學(xué)等同等于研究生科研教學(xué)。學(xué)生科研應(yīng)當(dāng)在科研模式的教學(xué)上既簡(jiǎn)化又升華。因?yàn)榻虒W(xué)對(duì)象主要是大學(xué)一年級(jí)學(xué)生，他們的專業(yè)知識(shí)儲(chǔ)備量少。比如，科研項(xiàng)目的內(nèi)容對(duì)學(xué)生來(lái)說(shuō)要求的理論知識(shí)太強(qiáng)，學(xué)生不容易搞懂。如果學(xué)生一進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室就讓他們搞科研做課題，就會(huì)導(dǎo)致學(xué)生在創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)過(guò)程中看不懂，聽不懂，這勢(shì)必讓學(xué)生感到迷茫，從而挫傷學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。
　　我認(rèn)為，大學(xué)生學(xué)生科研應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)?、涉及多學(xué)科且應(yīng)用較廣的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，且該技術(shù)在學(xué)生未來(lái)的本科教學(xué)中將會(huì)涉及，然后以實(shí)驗(yàn)技術(shù)為中心展開實(shí)驗(yàn)過(guò)程。
　　比如，針對(duì)進(jìn)入病理學(xué)實(shí)驗(yàn)小組同學(xué)，我們可以采用以結(jié)合免疫學(xué)與病理形態(tài)學(xué)相圍繞結(jié)合的免疫熒光細(xì)胞染色技術(shù)為中心，將教師的科研課題深入到該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中去。先讓同學(xué)們圍繞該技術(shù)，進(jìn)行文獻(xiàn)的復(fù)習(xí)、綜述并進(jìn)行討論，然后讓同學(xué)們將該技術(shù)帶到科研，制作爬片并進(jìn)行熒光抗體染色。
　　教師在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中要把握實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新點(diǎn)，比如，技術(shù)操作的創(chuàng)新，應(yīng)用的創(chuàng)新，等等。然后圍繞創(chuàng)新點(diǎn)讓同學(xué)們展開思路進(jìn)行探討。
　　比如，爬片技術(shù)是一種冒似簡(jiǎn)單的技術(shù)，但仍然存在很多有待思考的問(wèn)題。比如，如何處理可以讓細(xì)胞在爬片上分布均勻？如何操作可以讓實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)潔？采取何種固定方法使得爬片適合某種實(shí)驗(yàn)的讓染色？如何處理可以減少熒光抗體染色的掉細(xì)胞現(xiàn)象？等等。在這個(gè)思考的過(guò)程中便可以將創(chuàng)新性思維貫徹到我們的教學(xué)中。這樣，在我們的教學(xué)中既教會(huì)了學(xué)生科研思路，同時(shí)又教會(huì)了學(xué)生實(shí)驗(yàn)技術(shù)，同時(shí)，更重要的是將科研思維貫徹到實(shí)驗(yàn)教學(xué)中。
　　此外，學(xué)生在創(chuàng)新思維教學(xué)中，自主活動(dòng)、主動(dòng)探索的精神沒(méi)有得到充分體現(xiàn)。學(xué)生更多的是習(xí)慣于老師講解、示范性操作，然后按實(shí)驗(yàn)流程來(lái)進(jìn)行操作，在實(shí)際操作和處理中沒(méi)有自己的想法與思路。這與我們多年傳統(tǒng)教育形成的思維模式是密切相關(guān)的。我們應(yīng)當(dāng)在科研教學(xué)中逐漸改善這種思維模式，將創(chuàng)新思維的教學(xué)滲透到教育體系當(dāng)中去。
　　總之，大學(xué)生創(chuàng)新教育不是一句口號(hào)，它需要我們?cè)诮逃龑?shí)踐中逐步落實(shí)與貫徹。我們不能急功近利，應(yīng)當(dāng)一步一個(gè)腳印，踏踏實(shí)實(shí)地在教學(xué)實(shí)踐中摸索，從而使我們的創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驗(yàn)閯?chuàng)新教育的推廣服務(wù)。
　　基金項(xiàng)目：2010及2011年度江漢大學(xué)學(xué)生科研教學(xué)項(xiàng)