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      磁性納米粒子在檢測(cè)中的應(yīng)用

      2013-01-23 17:31:59趙曉麗鄧叢良
      關(guān)鍵詞:磁珠磁性靈敏度

      趙曉麗 周 琦 張 凱 鄧叢良*

      (北京出入境檢驗(yàn)檢疫局 北京 101312)

      1 前言

      磁性納米粒子(Magnetic Nanoparticles,MNPs)是指含有磁性金屬或金屬氧化物的超細(xì)粉末且具有磁響應(yīng)性的納米級(jí)粒子,具有獨(dú)特的超順磁性能[1]。由于其比表面積大、表面活性中心多、表面反應(yīng)活性高、吸附能力強(qiáng)、催化能力高、毒性低且不易受體內(nèi)和細(xì)胞內(nèi)各種酶降解等特點(diǎn),在多個(gè)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。

      磁性納米粒子的種類(lèi)很多,較常用的有金屬合金、氧化鐵、鐵氧體、氧化鉻等,其中氧化鐵(γ-Fe203、Fe304)磁性材料應(yīng)用最多[2]。磁性納米粒子通過(guò)表面共聚和表面改性的方法,能與有機(jī)物或高分子聚合物或無(wú)機(jī)材料相結(jié)合形成核殼結(jié)構(gòu)的磁性復(fù)合粒子,既具有磁性,又具有表面活性基團(tuán),能進(jìn)一步和細(xì)胞、酶、蛋白質(zhì)、抗體及核酸等多種生物分子偶聯(lián)。在外加磁場(chǎng)的作用下,磁性粒子能夠很方便地和底液分離,具有操作簡(jiǎn)便和分離效率高的優(yōu)點(diǎn)。此外,磁性納米粒子具有大的比表面積,為修飾多種高密度分子探針提供了基礎(chǔ),在細(xì)胞分離、蛋白質(zhì)純化及DNA分離檢測(cè)等領(lǐng)域顯示出廣闊的應(yīng)用前景[3-6]。

      2 基于磁分離技術(shù)的檢測(cè)技術(shù)

      磁性分離技術(shù)(Magnetic Separation, MS)是依據(jù)物質(zhì)的磁性差異,在磁場(chǎng)作用力的驅(qū)動(dòng)下,把磁性組分從非磁性組分混合物中分離出來(lái)的一種分離技術(shù)。傳統(tǒng)的磁性分離理論方法已經(jīng)在許多工業(yè)過(guò)程中獲得了應(yīng)用,如冶金工業(yè)中的礦物磁選分離。由于生物體系中的絕大多數(shù)生物分子都無(wú)磁性,為了給欲分離的目標(biāo)生物分子賦予磁性,需要預(yù)先制備一種磁性載體顆粒作為運(yùn)載工具,借助于磁性分離裝置,對(duì)目標(biāo)生物分子進(jìn)行負(fù)載、運(yùn)載和卸載等分離操作,從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)生物分子的磁性分離過(guò)程。

      磁性分離技術(shù)因其具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏等特點(diǎn),近年已被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷、食品安全快速檢測(cè)、環(huán)境檢測(cè)和植物病毒檢測(cè)的研究中[7-8]。磁分離技術(shù)可以直接應(yīng)用于目標(biāo)物質(zhì)的檢測(cè),也可以和現(xiàn)有的其他生物技術(shù),如分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)、免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)、熒光檢測(cè)技術(shù)等相結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)更為有效簡(jiǎn)便的快速檢測(cè)[9]。

      免疫磁性分離技術(shù)(Immunomagnetic beadbased separation, IMS)是目前應(yīng)用最廣泛的磁分離技術(shù),它整合了免疫反應(yīng)的高度特異性和磁性分離快速、簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)。

      2.1 磁分離-PCR檢測(cè)技術(shù)

      傳統(tǒng)的PCR檢測(cè)技術(shù)雖然靈敏度高,但是因?yàn)槠渌褂玫臉颖就腔罹退谰幕旌象w,因此假陽(yáng)性反應(yīng)較高。利用磁分離技術(shù)先分離或富集目標(biāo)生物分子,然后再結(jié)合目標(biāo)物質(zhì)的指紋基因進(jìn)行檢測(cè),可以減少培養(yǎng)基質(zhì)的影響,提高檢測(cè)的速度和靈敏度。

      2.2 磁分離-ELISA檢測(cè)技術(shù)

      普通的ELISA技術(shù)采用的酶標(biāo)板是一個(gè)固相載體,具有固/液相反應(yīng)接觸面積小,聯(lián)接的抗體易脫落,反應(yīng)速度慢且不徹底等缺點(diǎn)。磁分離-ELISA技術(shù)(MS-ELISA)是一種以磁性納米材料代替?zhèn)鹘y(tǒng)ELISA中的酶標(biāo)板,將ELISA的顯色系統(tǒng)與磁分離技術(shù)相結(jié)合而形成的一種新型檢測(cè)方法。利用納米材料的高比表面積、易于形成膠體溶液等特性,MS-ELISA法中的抗原-抗體分子接觸面積變大,反應(yīng)較為徹底,此外磁分離使緩沖液的交換操作更為簡(jiǎn)便快速,靈敏度也得到了提高[10-12]。

      2.3 磁分離熒光分析檢測(cè)技術(shù)

      熒光分析法具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、用樣量少、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。磁分離熒光分析技術(shù)是一種將磁分離技術(shù)與熒光分析相結(jié)合的技術(shù),通常先以磁分離選擇目標(biāo)物質(zhì),再利用熒光物質(zhì)進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。

      3 磁分離技術(shù)在檢測(cè)中的應(yīng)用

      基于磁性納米粒子的磁分離技術(shù)在生物分子檢測(cè)中的應(yīng)用一直是生物分析化學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)問(wèn)題之一,利用磁性納米粒子特殊的表面效應(yīng)、體積效應(yīng)、量子效應(yīng)等可以在生物分子檢測(cè)中明顯地提高分析與檢測(cè)的靈敏度和選擇性,因此在多個(gè)領(lǐng)域有著非常廣闊的應(yīng)用前景。

      3.1 磁分離技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢測(cè)中的應(yīng)用

      在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,為了分析檢測(cè)或其他應(yīng)用,通常需要將被研究的生物實(shí)體與其所在的環(huán)境分離。應(yīng)用具有生物相容性的磁性納米粒子的磁分離技術(shù)是達(dá)到該要求的一種方法。

      癌癥是目前較難醫(yī)治的疾病之一,但大量臨床事實(shí)證明,癌變初期的治愈率相當(dāng)高,因此治療癌癥的關(guān)鍵在于有效地早期診治。目前確診癌癥最有效的手段是病理診斷,但準(zhǔn)確性往往受限于操作醫(yī)生的工作經(jīng)驗(yàn),早期病變?nèi)菀茁┰\、誤診。將納米分離技術(shù)與生化檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合,能夠?qū)Π┌Y進(jìn)行早期診斷[13,14],是及早預(yù)防和診治癌癥的重要方向,為臨床上癌癥的早期、準(zhǔn)確診斷提供了良好的方法和依據(jù)。

      納米免疫磁粒子在磁場(chǎng)作用下具有高的特異性、濃縮性和可分離性,可以對(duì)外周血中腫瘤細(xì)胞進(jìn)行富集、濃縮與分離,有助于癌細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)。Taubert等[15]已用白細(xì)胞分化抗原(CD)45單抗標(biāo)記免疫磁性微球?qū)⑼鈬械陌准?xì)胞去除,從而實(shí)現(xiàn)癌細(xì)胞的富集,隨后用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞。Nam等[16]用標(biāo)記有前列腺特異性抗原(PSA)單抗的磁性微球,通過(guò)夾心法與血清中的PSA形成復(fù)合物,在磁場(chǎng)下分離血清中的PSA,然后用PCR或基因芯片技術(shù)檢測(cè),其靈敏度比常規(guī)的臨床檢測(cè)方法高6個(gè)數(shù)量級(jí)。Nakamura等[17]應(yīng)用包被Ber-EP4的免疫磁粒子富集外周血中單核細(xì)胞,然后用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)食道癌細(xì)胞。目前,該技術(shù)還用于肺癌[18]、胃癌[19]、肝癌[20-21]和鼻咽癌[22]患者外周血中癌細(xì)胞的檢測(cè)。

      乙型肝炎是一種傳染性疾病,只有早期診斷才能盡早隔離,從而控制其傳播。張寶亮等[23]通過(guò)化學(xué)鍵連接的方法制備出表面偶聯(lián)乙肝抗體的磁性復(fù)合微球,采用類(lèi)“雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法”對(duì)乙肝抗體的活性及優(yōu)化效果進(jìn)行了檢測(cè)。通過(guò)性能檢測(cè)比較,磁分離技術(shù)法檢測(cè)靈敏度高于普通酶聯(lián)免疫法。李成德等[24]通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論:磁分離技術(shù)在HBV檢測(cè)中的應(yīng)用對(duì)乙型肝炎患者的臨床診斷和療效監(jiān)測(cè)將有十分重要的意義。

      另外,Van Helden等[25]將抗體連接的納米磁性微球與高效率、快速的化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)相結(jié)合的自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng),成功地用于血清中人免疫缺陷病毒1型和2型(HIV-1和HIV-2)抗體檢測(cè)。Constanine等[26]通過(guò)使用磁分離技術(shù)和免疫PCR技術(shù)檢測(cè)HIV病毒的P24蛋白,在每個(gè)反應(yīng)中可以檢測(cè)到10到100個(gè)P24蛋白分子,從而將檢測(cè)靈敏度提高到不到一個(gè)病毒的檢出能力,所有其他的現(xiàn)有方法中都無(wú)法達(dá)到。

      3.2 磁分離技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用

      隨著人們對(duì)食品安全的重視,致病微生物的檢測(cè)技術(shù)也朝著快速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保方向迅速發(fā)展[27]。E.Coli O157∶H7、單核細(xì)胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌和沙門(mén)氏菌是引起食物中毒的主要致病菌。目前,免疫磁分離技術(shù)已廣泛應(yīng)用于這4種致病菌的檢測(cè)。

      Hand ley等[28]使用磁分離技術(shù)與化學(xué)發(fā)光標(biāo)記ELISA復(fù)合的方式檢測(cè)大腸桿菌E.Coli O157∶H7,達(dá)到了7.6×103個(gè)活細(xì)胞的下限,更把原來(lái)1d甚至數(shù)d的檢測(cè)時(shí)間縮短到了75min。Notzon等[29]用IMS-熒光PCR技術(shù)相結(jié)合檢測(cè)肉類(lèi)中的沙門(mén)氏菌,12-13 h即可完成檢測(cè)過(guò)程,IMS-熒光PCR在檢測(cè)自然感染肉類(lèi)和人工感染肉類(lèi)上都具有較高的敏感性和特異性。Hudson 等[30]研究表明,將免疫磁分離技術(shù)與PCR結(jié)合,24 h內(nèi)即可檢出火腿中的單核細(xì)胞增生李斯特菌,檢出低限為11 cfu/g。Alefantis等[31]用特異性多抗包被磁性納米粒子,用熒光染料Alexa fluor 647結(jié)合特異的單抗來(lái)檢測(cè)金黃色葡萄球菌,整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需40-50 min,靈敏度很高(< 100 pg),而且采用此方法不需要二抗,適合于微量樣品的檢測(cè)。

      另外,免疫磁分離技術(shù)還用于檢測(cè)其他致病菌[32-35]及食品樣品中的病毒[36]。

      3.3 磁分離技術(shù)在環(huán)境檢測(cè)中的應(yīng)用

      目前已經(jīng)有報(bào)道將免疫磁分離技術(shù)引入環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,用于對(duì)環(huán)境中自然水體、生活污水、工業(yè)廢水、土壤環(huán)境中部分細(xì)菌、致病原蟲(chóng)、病毒和有毒有機(jī)物的檢測(cè)。

      Lee等[37]采用免疫磁粒子檢測(cè)環(huán)境中的大腸桿菌,靈敏度提高到了20 CFV/100 mL,檢測(cè)時(shí)間則由原來(lái)的超過(guò)24h縮短到1h。張凡飛等[38-39]采用PCR法、免疫磁分離法和神奈川現(xiàn)象培養(yǎng)基三者結(jié)合的方法成功的從環(huán)境中分離出了用一般細(xì)菌培養(yǎng)分離方法很難分離到的TDH陽(yáng)性副溶血性弧菌,極大地提高了環(huán)境樣品及食品中病原性副溶血性弧菌的檢出率,也為研究TDH陽(yáng)性副溶血性弧菌在環(huán)境中的分布及預(yù)防由其引起的食物中毒提供了依據(jù),該方法對(duì)于水和食品中致病微生物的快速分離和檢驗(yàn)也有著重要的應(yīng)用價(jià)值。Islam等[40]采用IMS和PCR檢測(cè)糞便中的志賀菌,該方法簡(jiǎn)單、快速,檢測(cè)所需時(shí)間為7h,在糞便樣品中的檢測(cè)限為10 cfu/g。李鳳儀等[41]用抗志賀氏菌抗體包被醛基磁性微球,濃集水中的志賀氏菌,然后用 PCR 進(jìn)行檢測(cè),取得了較好的結(jié)果。Hulten等[42]檢測(cè)了秘魯飲用水中幽門(mén)螺旋菌,該研究用抗幽門(mén)螺旋菌IgG包被的免疫磁粒子富集幽門(mén)螺旋菌,結(jié)合PCR擴(kuò)增,得出結(jié)果證明,秘魯某些飲用水中存在幽門(mén)螺旋菌,與先前流行病研究結(jié)果一致。

      1996年,美國(guó)環(huán)??偩珠_(kāi)始將免疫磁性分離機(jī)技術(shù)應(yīng)用于卵囊和孢囊的檢測(cè)過(guò)程,這是目前國(guó)際上最為常用的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法[43]。免疫磁性分離用于多種水域中隱孢子蟲(chóng)的檢測(cè),并提供了很高的檢測(cè)率。囊式過(guò)濾器用于免疫磁性分離后成為檢測(cè)環(huán)境樣中的隱孢子蟲(chóng)的最有效的方法[44]。Mahbubani[45]采用免疫磁粒子分離技術(shù)和PCR擴(kuò)增結(jié)合的方法,檢測(cè)環(huán)境水中污染賈第鞭毛蟲(chóng)包囊DNA,研究發(fā)現(xiàn),免疫磁粒子法分離環(huán)境水及飲用水中賈第鞭毛蟲(chóng),并結(jié)合PCR擴(kuò)增目的基因,可提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度。

      楊萬(wàn)等[46]建立了一種免疫磁珠分離技術(shù)聯(lián)合實(shí)時(shí)定量PCR快速定量檢測(cè)水中輪狀病毒的方法,通過(guò)制備能夠分離水中輪狀病毒的特異免疫磁珠,優(yōu)化分離條件,建立了免疫磁珠分離前處理方法,并與逆轉(zhuǎn)錄、實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)合,成功用于水中輪狀病毒的檢測(cè)。

      胡寅等[47]通過(guò)將通用抗體固化在自行制備的納米磁珠表面,建立了有機(jī)磷農(nóng)藥多殘留納米磁珠間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法。與傳統(tǒng)ELISA檢測(cè)相比,納米磁珠免疫檢測(cè)方法對(duì)多種有機(jī)磷農(nóng)藥具有顯著的識(shí)別作用,方法靈敏度大大提高。

      3.4 磁分離技術(shù)在植物病毒檢測(cè)中的應(yīng)用

      植物病毒病害是一類(lèi)重要植物病害,幾乎在各類(lèi)作物上都有發(fā)生,嚴(yán)重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。近年來(lái),病毒病在世界各國(guó)的危害日趨嚴(yán)重,發(fā)現(xiàn)和報(bào)道的種類(lèi)也日益增多。在重要植物檢疫性病毒檢測(cè)技術(shù)方面,我國(guó)出入境植物檢疫采用的手段主要包括口岸現(xiàn)場(chǎng)檢疫、生長(zhǎng)季隔離檢疫、實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢驗(yàn)鑒定、指示植物鑒定、血清學(xué)檢測(cè)和分子生物學(xué)檢測(cè)等。當(dāng)前已經(jīng)有不少關(guān)于采用非特異性磁性納米粒子和RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光RT-PCR相結(jié)合技術(shù)檢測(cè)植物病毒的研究。

      闞春月[48]等以黃瓜綠斑駁花葉病毒(CGM M V)作為研究對(duì)象,將磁性微珠與CGMMV抗血清混合后,制備成包被CGMMV抗體的免疫磁珠分離植物病毒,提取病毒核酸。鄧叢良等以CGMMV[49]、南芥菜花葉病毒(ArMV)[50]、南瓜花葉病毒(Sq M V)[51]、李痘病毒(PPV)[52]等為研究對(duì)象,將磁分離技術(shù)與PCR技術(shù)相結(jié)合,首先利用經(jīng)表面修飾特殊基團(tuán)且不包被抗體的非特異性磁性納米粒子隨機(jī)吸附植物樣品中的病毒粒子,然后用RT-PCR或者Realtime-RT-PCR方法檢測(cè)病毒粒子,整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需1-2h,檢測(cè)靈敏度比傳統(tǒng)Trizol方法提取病毒RNA提高了近10-100倍,減少了有毒有害物質(zhì)的使用和勞動(dòng)力的投入,有效去除了PCR反應(yīng)抑制劑;與免疫磁分離方法相比省去了抗體的使用,降低了成本,提高了檢測(cè)效率,非常適合口岸一線對(duì)植物病毒的檢測(cè)要求。

      4 總結(jié)與展望

      隨著生物技術(shù)的發(fā)展,多學(xué)科交叉的新型檢測(cè)技術(shù)也將越來(lái)越多。納米技術(shù)作為一門(mén)新興學(xué)科被應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域,必將推動(dòng)科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和發(fā)展。與現(xiàn)有技術(shù)相比,基于納米磁性粒子的各種檢測(cè)技術(shù)將極大提高檢測(cè)方法的特異性、靈敏度和速度等性能。到目前為止,基于納米磁性粒子的檢測(cè)技術(shù)已應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、食品安全、環(huán)境等多個(gè)檢測(cè)領(lǐng)域。但是此檢測(cè)技術(shù)還不完善,還有很多需要改進(jìn)和值得研究的地方,比如:檢測(cè)靈敏度的提高、定量檢測(cè)的實(shí)現(xiàn)、多元檢測(cè)等。相信隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展,通過(guò)磁性納米粒子建立的各種自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)平臺(tái)將在檢測(cè)領(lǐng)域發(fā)揮更大的作用。

      [1] 朱屯,王福明,王習(xí)東.國(guó)外納米材料技術(shù)進(jìn)展與應(yīng)用[M].化學(xué)工業(yè)出版社,2002,6:69-77.

      [2] 李蔭遠(yuǎn),李國(guó)棟.鐵氧體物理學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1978.

      [3]Hafeli U, Schutt W, Teller J, et al.Scientific and Clinical Applications of Magnetic carrier[M].Plenum:New York, 1997.

      [4]Weissleder R, Bogdanov A, Neuwelt E A, et al.Long-circulating iron oxides for MR imaging[J].Advanced Drug Delivery Reviews, 1995,16:321-334.

      [5]Jordan A, Scholz R, Wust P, et al.Endocytosis of dextran and effect of intracellular hyperthermia on human mammary carcinoma cells in Vitro[J].Journal of Magnetism and Magnetic Materials, 1999, 194:185-196.

      [6]Liu Z L, Ding Z H, Yao K L, et al.Preparation and characterization of polymer-coated core-shell structured magnetic microbeads[J].Journal of Magnetism and Magnetic Materials, 2003,265:98-105.

      [7] 馬秀玲,黃麗梅,鄭思寧,等.磁性微球的制備及研究進(jìn)展[J].廣州化學(xué),2003,28(3):58-63.

      [8]Ugelstad J, Berge A, Ellingsen T, et al.Preparation and application of new monosized polymer particles[J].Progress in Polymer Science,1992, 17:87-161.

      [9] 翁仕強(qiáng),潘迎捷,趙勇,等.納米技術(shù)在食品安全快速檢測(cè)中的應(yīng)用[J].漁業(yè)現(xiàn)代化,2009,36(3):56-59.

      [10]Gehring A G, Crawford C G, Mazenko R S, et al.Enzymelinked immunomagnetic electrochemical detection of Salmonella typhimurium[J].Journal of Immunological Methods, 1996, 195(1-2):15-25.

      [11]Yazdankhah S P.Development and evaluation of an immunomagnetic separation-ELISA for the detection of Staphylococcus aureus thermostable nuclease in composite milk[J].Veterinary Microbiology,1999,67(2):113-125.

      [12]Herrmann M,Veres T,Tabrizian M.Enzymatically-generated fluorescent detection in micro-channels with internal magnetic mixing for the development of parallel microfluidic ELISA[J].Lab on a Chip,2006,6(4):555-560.

      [13]Jordan A.Nanotechnology and consequences for surgicaloncology[J].Kongressbd Dtsch Ges hit Konger,2002,119:821-828.

      [14]Yi D K, Kim D Y.Polymer nanosphere lithography:fabrication of an ordered trigonal olymeric nanostructure[J].Chemical communications (Cambridge, England),2003:982-983.

      [15]Taubert H,Blumke K,Bilkenroth U,et al.Detection of disseminated tumor cells in peripheral blood of patients with breast cancer:correlation to nodal status and occurrence of metastases[J].Gynecologic Oncology,2004,92:256-261.

      [16]Nam J M,Thaxton C S,Mirkin C A.Nanoparticle-based biobar codes for the ultrasensitive detection of proteins[J].Science,2003,301:1884-1886.

      [17]Nakamura T,Yasumura T,Hayashi K,et al.Immunocytochemical detection of circulating esophageal carcinoma cells by immunomagnetic separation [J].Anticancer research, 2000,20(6):4739- 4744.

      [18]王曉光,胡紅,劉又寧.應(yīng)用納米免疫磁珠檢測(cè)早期肺癌循環(huán)血中腫瘤細(xì)胞[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2004,84(16):1393-1395.

      [19]Chen X M,Chen G Y,WANG Z R,et al.Detection of micrometastasis of gastric carcinoma in peripheral blood circulation[J].World Journal of Gastroenterology,2004,10(6):804-808.

      [20]Yao F,Guo J M,Xu C F,et al.Detecting AFP mRNA in peripheral blood of the patients with hepatocellular carcinoma,liver cirrhosis and hepatitis[J].Clinica Chimica Acta,2005,361(1-2):119- 127.

      [21]徐勇,李楠.納米技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用[J].材料導(dǎo)報(bào),2007,5(21):11-13.

      [22]Yan G H, Xing D, Tan S, et al.Rapid and sensitive immunomagneticelectrochemiluminescent detection of p53 antibodies in human serum[J].Journal of Immunological Methods,2004,288(1-2):47- 54.

      [23]張寶亮,張秋禹,張和鵬,等.負(fù)載高密度乙肝檢測(cè)探針磁珠的制備及性能[J].高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào),2011,32(5):1070-1076.

      [24]李成德,岑麗蓮,陳金強(qiáng),等,磁珠分離純化技術(shù)在實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HBV DNA中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,26(3):68-71.

      [25]van Helden J, Denoyel G, Freeman J, et al.Performance of a new HIV 1/o/2 assay on the Bayer ADVIA Centaur immunoassay system[J].Clinical Laboratory,2004,50:83-90.

      [26]Barletta J,Bartolome A,Constantine N.Immunomagnetic quantitative immuno-PCR for detection of less than one HIV-1 virion[J].Journal of Virological Methods,2009,157(2):122-132.

      [27]陳慶森,馮永強(qiáng),黃寶華,等.食品中致病菌的快速檢測(cè)技術(shù)的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展[J].食品科學(xué),2003,24(11):148-152.

      [28]Gehring A,Irwinp P,Reed S,et al.Enzyme-linked immunomagnetic chemiluminescent detection of Escherichia coli O157:H7[J].Journal of Immunological Methods,2004,293(1-2):97-106.

      [29]Notzon A,Helmuth R,Bauer J.Evaluation of an immunomagnetic separation-real-time PCR assay for the rapid detection of Salmonella inmeat[J].Journal of Food Protection,2006,69(12):2896-2901.

      [30]Hudson J A,Lakc R J,Savill M G,et al.Rapid detection of Listeria monocytogenes in hair samples using irnrnunornagnetic separation followed by polymerise chain reaction[J].Applied Microbiology,2001,90(4):614-621.

      [31]Alefantis T,Grewal P,Ashton J,et al.A rapid and sensitivemagnetic bead-based immunoassay for the detection of staphylococcal enterotoxin B for high-through put screening [J].Molecular and Cellular Probes,2004,18(6):379-382.

      [32]Metzger-Boddien C, Khaschabi D, Schonbauer M,et al.Automated high-throughput immunomagnetic separation-PCR for detection of Mycobacterium avium subspparatuberculosis in bovinemilk[J].International Journal of Food Microbiology,2006,110(3):201-208.

      [33]Liu G M,Han Y L,Li X,et al.Applicability of a rapid method based on immunomagnetic capture-fluorescent PCR assay for Campylobacterjejuni[J].Food Control,2006,17(7):527-532.

      [34]蘇惠玉,謝榮珍,牛建軍.免疫磁珠捕獲結(jié)合熒光PCR 技術(shù)檢測(cè)食品中黃曲霉菌的研究[J].食品科學(xué),2010,31(10):287-291.

      [35]Kapperud G,Vardunt T,Skjerev E,et al.Detection of pathogenic Yersinia enterocolitica in foods and water by immunomagnetic separation,nested poly-merase chain reactions,and colorimetric detection of amplified DNA[J].Applied and Environmental Microbiology,1993, 59:29-38.

      [36]Gilpatrick S G,Schwab K J,Estesm K,et al.Development of an immunomagnetic capture reverse transcription-PCR assay for the detection of Norwalk virus.Journal of Virological Methods,2000,90(1):69-78.

      [37]Lee J,Deininger R.Detection of E.coli in beach water within 1 hour using immunomagnetic separation and ATP bioluminescence[J].Luminescence,2004,19(1):31-36.

      [38]張凡非,杉山寬治,西尾智裕,等.環(huán)境樣品中病原性副溶血性弧菌高效檢出法[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2002,12(3):272-274.

      [39]張凡非,杉山寬治,西尾智裕,等.利用免疫磁珠法分離環(huán)境及食品中產(chǎn)生TDH副溶性弧菌的研究[J].中國(guó)衛(wèi)生監(jiān)督雜志,2004,11(1):7-9.

      [40]Islam D,Lindberg A A.Detect ion of Shigella dysenteriae type 1 and Shigella flexneri in feces by immunomagnetic isolation and polymerase chain reaction [J].Journal of Clinical Microbiology,1992,30(11):2801-2806.

      [41]李鳳儀,張符光,李君文,等.三種固相抗體特異濃集水中F2a志賀氏菌的實(shí)驗(yàn)觀察[J].工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病,1997,23(2):102-104.

      [42]Hulten K,Han S W, Enroth H,et a1.Helicobacter pylori in the drinking water in Peru[J].Gastroenterology,1996,110(4):1031-1035.

      [43]張彤,胡洪營(yíng),宗祖勝.免疫磁性分離法檢測(cè)水中孢子蟲(chóng)和加的鞭毛蟲(chóng)的影響因素[J].環(huán)境與健康雜志,2007,24(1):56-58.

      [44]李訓(xùn)德,BRASSEUR Philippe.水體中隱孢子蟲(chóng)卵囊得檢出極其活力分析[J].應(yīng)用與環(huán)境學(xué)報(bào),2003,9(1):32-35.

      [45]Mahbubani M H,Schaefer III F W,Jones D D,et a1.Detection of Giardia in Environmental Waters by Immuno-PCR Amplification Methods[J].Current Microbiology,1998,36(2):107-113.

      [46]楊萬(wàn),何苗,李丹,等.免疫磁珠分離與實(shí)時(shí)定量PCR 技術(shù)聯(lián)合檢測(cè)水中輪狀病毒的研究[J].環(huán)境科學(xué),2009,30(5):1368-1375.

      [47]胡寅,沈國(guó)清,朱鴻林,等.有機(jī)磷農(nóng)藥納米磁珠酶免分析方法研究[J].環(huán)境污染與防治,2010,32(9):41-45.

      [48]闞春月,衣杰榮,王守法,等.免疫磁珠結(jié)合RT-PCR檢測(cè)黃瓜綠班駁花葉病毒[J].上海農(nóng)學(xué)報(bào), 2010, 26(4):43-47.

      [49]鄧叢良,江明,汪萬(wàn)春,等.應(yīng)用MNP-RT-PCR方法檢測(cè)黃瓜綠斑駁花葉病毒[J].植物病理學(xué)報(bào),2008,38(4):436-440.

      [50]鄧叢良,江明,聶棱,等.應(yīng)用MNP-Realtime-RT-PCR技術(shù)檢測(cè)南芥菜花葉病毒[C].中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2008年學(xué)術(shù)年會(huì),2008-07-01.

      [51]孫寧,鄧叢良,么磊,等.應(yīng)用細(xì)菌磁顆粒實(shí)時(shí)熒光RTPCR檢測(cè)南瓜花葉病毒[J].植物病理學(xué)報(bào),2010,40(6):632-635.

      [52]陳定虎,鄧叢良,李明福,等.運(yùn)用納米磁珠技術(shù)結(jié)合RT-PCR方法檢測(cè)李痘病毒[J].植物檢疫,2010,24(3):17-19.

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