鄭 斌 尹志奎 許兵紅
(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室,河南新鄉(xiāng) 453003; 2. 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室,河南新鄉(xiāng) 453003)
剛地弓形蟲Toxoplasmagondii是一種世界性分布的寄生原蟲,多種動物和人都可以作為它的宿主,貓既可以作為弓形蟲的終末宿主,也可以作為其中間宿主。貓感染弓形蟲后不僅影響自身的成長、發(fā)育及繁衍,還可以作為傳染源,經(jīng)糞便排出弓形蟲卵囊,污染環(huán)境,威脅其他動物的健康。人與貓密切接觸后,可能導(dǎo)致人的弓形蟲感染或弓形蟲病。下面就近十年來歐美的貓弓形蟲感染情況及影響因素進(jìn)行綜述,以期對后續(xù)動物的安全飼養(yǎng)提供幫助。
弓形蟲感染的檢測方法有病原學(xué)、血清學(xué)和分子生物學(xué)等方法。病原學(xué)檢查法包括涂片染色法、動物接種分離法或細(xì)胞培養(yǎng)法,查到弓形蟲蟲體即可確診。該方法特異性較高,但操作復(fù)雜,費(fèi)時、費(fèi)力,且敏感性較低,易漏診。
血清學(xué)檢查是目前進(jìn)行弓形蟲感染調(diào)查、臨床弓形蟲病確診的常用方法。包括染色試驗(Sabin-Feldman dye test, SFDT)、直接凝集試驗(Direct agglutination test, DAT)、乳膠凝集試驗(Latex agglutination test, LAT)、改良凝集試驗(Modified agglutination test, MAT)、間接血凝試驗(Indirect haemagglutination test, IHA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和間接熒光抗體試驗(Indirect immunofluorescence antibody test, IFAT)等。SFDT特異性強(qiáng)、敏感性好,但試驗需要活蟲體,實際應(yīng)用時不宜操作;DAT、LAT、MAT和IHA操作簡便,敏感性和特異性較好,但I(xiàn)HA可以和血吸蟲病患者血清產(chǎn)生交叉反應(yīng),且有時吸附抗原后的紅細(xì)胞不穩(wěn)定,重復(fù)性受到影響;ELISA靈敏度高,特異性強(qiáng),與SFDT符合率高,但穩(wěn)定性不好。IFAT有較好的敏感性、特異性和重復(fù)性,但與類風(fēng)濕因子、抗核抗體陽性者可出現(xiàn)假陽性反應(yīng),試驗結(jié)果需用熒光顯微鏡觀察,結(jié)果判定需有經(jīng)驗的人員,有一定的主觀性。
分子生物學(xué)方法包括聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction, PCR)和核酸分子雜交技術(shù)等。PCR是一種敏感、高效的檢測方法,但由于涉及引物、聚合酶、擴(kuò)增條件和擴(kuò)增環(huán)境等多個因素,反應(yīng)結(jié)果存在一定的假陰性和假陽性。核酸分子雜交技術(shù)具有較高特異性和敏感性,但檢測需要特殊設(shè)備,且操作復(fù)雜、所需時間較長,成本高。
總之,病原學(xué)檢查操作復(fù)雜,但卻是弓形蟲檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。血清學(xué)檢測在區(qū)分現(xiàn)癥和既往感染方面有缺陷,但由于操作簡單,仍然是進(jìn)行弓形蟲檢測和流行病學(xué)調(diào)查的重要手段之一。分子生物學(xué)方法雖大大改善了弓形蟲感染和弓形蟲病的檢測,但由于對實驗條件要求較高且操作人員需經(jīng)過嚴(yán)格的訓(xùn)練,因而其在實際應(yīng)用時受到一定的限制。
愛爾蘭的貓弓形蟲抗體陽性率為33.7%(ELISA)(Juvetetal., 2010)。蘇格蘭的貓弓形蟲抗體陽性率為19.2%(ELISA)(Bennettetal., 2011)。比利時Ghent 市的貓弓形蟲血清陽性率為70.2%(DAT)(Dornyetal., 2002);2008年報道比利時的家貓弓形蟲抗體陽性率為25%(IFAT),且隨年齡增長而增高(de Craeyeetal., 2008)。荷蘭的家貓弓形蟲抗體陽性率為18.2%(ELISA),影響因素有狗的存在、流浪及吃未加工的食物等(Opsteeghetal., 2012)。
波蘭西南部的貓弓形蟲血清陽性率為52.5%(LAT),成貓(>5 y齡)陽性率高于幼貓(Smielewska-Loetal., 2002);波蘭Olsztyn 地區(qū)的貓弓形蟲血清陽性率為64.4%(DAT)(Michalskietal., 2010)。法國Lyon市流浪貓的弓形蟲血清陽性率為18.6%(MAT),隨年齡增加而增高(Afonsoetal., 2006);該國Kerguelen archipelago地區(qū)的野貓弓形蟲血清陽性率為51.09%(MAT),不同采樣點及食物、性別和年齡均影響貓的陽性率(Afonsoetal., 2007);法國鄉(xiāng)村的貓弓形蟲血清陽性率為52.7%(MAT),在多雨的年份,貓的發(fā)病率增高(Afonsoetal., 2010)。 Berger-Schoch等(2011)采用PCR檢測瑞士的貓糞弓形蟲卵囊陽性率為0.4%。
意大利Florence的貓弓形蟲血清陽性率為44%(MAT),糞標(biāo)本中弓形蟲卵囊陽性率為16%(PCR)(Manciantietal., 2010);該國Lombardy地區(qū)的流浪貓弓形蟲IgG陽性率為30.5%(IFAT)(Spadaetal., 2012)。匈牙利的貓弓形蟲抗體陽性率為47.6%(IFAT),雌貓陽性率(53.3%)高于雄貓(39.3%),陽性率隨年齡增長而增高(Hornoketal., 2008)。羅馬尼亞的家貓弓形蟲抗體陽性率為47%(ELISA),其中10月(m)齡和8 y齡的貓具有較高陽性率;成年、混合膳食、戶外活動、鄉(xiāng)村地區(qū)及羅馬尼亞中部、東北部地區(qū)的貓弓形蟲陽性率明顯高于其他(Gy?rkeetal., 2011)。葡萄牙北部的家貓弓形蟲血清陽性率為72.4%(MAT),成貓的陽性率高于幼貓,戶外貓的陽性率(45.4%)高于室內(nèi)貓(7.7%)(Lopesetal., 2008);該國Lisbon 地區(qū)流浪貓的弓形蟲血清陽性率2010年為24.2%(DAT)(Duarteetal., 2010),2012年為44.2%(DAT)(Waapetal., 2012)。西班牙Barcelona地區(qū)的貓弓形蟲血清陽性率為45%(MAT),成貓(>1 y齡)的陽性率(49.7%)高于幼貓(<1 y齡,34.3%),野貓的陽性率(51.9%)高于家貓(34.8%)(Gaussetal., 2003);2004年西班牙的貓弓形蟲抗體陽性率為32.3%(IFAT),成貓(>6 m齡)的陽性率(36.8%)高于幼貓(<6 m齡,13.9%),雄性流浪貓的陽性率(45.3%)高于雌性(32%)(Miróetal., 2004);該國的103個新鮮貓腦組織標(biāo)本弓形蟲DNA陽性率為45.5%(PCR)(Montoyaetal., 2008);該國Majorca地區(qū)的貓弓形蟲血清陽性率為84.7%(MAT),成貓的陽性率(94.6%)高于幼貓(40%)(Millnetal., 2009)。
加拿大Prince Edward Island地區(qū)的貓弓形蟲血清陽性率為29.8%(LAT)(Stojanovicetal., 2011)。美國Ohio州鄉(xiāng)村的貓弓形蟲血清陽性率為48%(MAT),戶外活動的貓陽性率較高(62%)(Dubeyetal., 2002);該國診所就診的貓弓形蟲抗體陽性率為31.6%(ELISA),陽性率隨年齡增長而增高,雄貓的陽性率高于雌貓(Vollaireetal., 2005);該國Hawaii島 Mauna Kea地區(qū)的野貓弓形蟲抗體陽性率為37.3%(ELISA)(Danneretal., 2007);該國中西部8所動物園的本地貓弓形蟲血清陽性率為29.4%(MAT)(de Campsetal., 2008);該國Pennsylvania州的家貓弓形蟲血清陽性率為19.5%(MAT),隨年齡增長而增高(Dubeyetal., 2009a);該國紐約的貓糞涂片檢查弓形蟲樣卵囊陽性率為0.8%(Lucio-Forsteretal., 2011)。墨西哥Colima地區(qū)的家貓弓形蟲抗體陽性率為28.8%(ELISA),南部及中部區(qū)域陽性率(33.8%)高于北部(6.6%)(García-Mrquezetal., 2007);該國Durango地區(qū)的家貓弓形蟲血清陽性率為21%(MAT),成貓(>1 y齡)的陽性率(41%)高于幼貓(<0.5 y齡,13.2%)(Alvarado-Esquiveletal., 2007);2009年報道Durango地區(qū)貓的弓形蟲血清陽性率為9.3%(MAT)(Dubeyetal., 2009d);該國墨西哥城的家貓弓形蟲抗體陽性率為21.9%(ELISA),雌貓的陽性率高于雄貓,陽性率隨年齡增長而增高,進(jìn)食粗加工食物的貓陽性率較高(Besné-Méridaetal., 2008)。西印度群島Grenada地區(qū)的家貓弓形蟲血清陽性率為35%(MAT)(Asthanaetal., 2006);2009年報道該地區(qū)家貓的弓形蟲血清陽性率為30.6%(MAT),野貓的陽性率為27.7%(MAT),陽性率隨年齡增長而增高(Dubeyetal., 2009b);該群島St. Kitts地區(qū)的家貓弓形蟲血清陽性率為84.9%(MAT)(Mouraetal., 2007),野貓的血清陽性率為73.9%(MAT)(Dubeyetal., 2009c)。波多黎各Mona 島的貓弓形蟲血清陽性率為84.2%(MAT)(Dubeyetal., 2007)。
厄瓜多爾Isabela Island的貓弓形蟲抗體陽性率為63%(ELISA)(Levyetal., 2008)。哥倫比亞的貓弓形蟲血清陽性率為45.2%(MAT)(Dubeyetal., 2006)。巴西Guarulhos州 和 S?o Paulo州的家貓弓形蟲血清陽性率皆為26.3%(MAT),流浪貓的陽性率分別為10%和26.7%(Silvaetal., 2002);該國Paran州Santa Isabel do Ivai地區(qū)的家貓弓形蟲血清陽性率為84.4%(MAT)(Dubeyetal., 2004);Paran州Curitiba地區(qū)的貓弓形蟲IgG陽性率為16.3%(IFAT)(Cruzetal., 2011);采用MAT和IFAT檢測巴西Rondnia州的家貓弓形蟲抗體陽性率皆為87.3%,高于同期檢測的豬的陽性率(37.5%)(Cavalcanteetal., 2006);巴西S?o Paulo州的流浪貓弓形蟲血清陽性率為40%(IHA)(Meirelesetal., 2004),家貓的血清陽性率為35.4%(MAT)(Penaetal., 2006);該州Ara?atuba地區(qū)家貓的弓形蟲抗體陽性率為25%(IFAT),隨年齡增加而增高(Brescianietal., 2007);該州Andradina地區(qū)的貓弓形蟲抗體陽性率為15.7%(IFAT),影響因素有上街活動、與老鼠共居、進(jìn)食自制食物及未加工的奶制品等(Coelhoetal., 2011)。巴西Rio de Janeiro市的流浪貓弓形蟲血清陽性率IHA檢測結(jié)果為92.1%(2002年)、63.8%(2003年)和60.6%(2004年)(Mendes-de-Almeidaetal., 2007)。巴西Lages 地區(qū)的貓弓形蟲抗體陽性率為14.33%(IFAT),0.5 y齡或以上、上街活動及鄉(xiāng)村的貓具有較高的陽性率(Dallaetal., 2010)。
不同國家、不同地區(qū)的貓弓形蟲感染情況各異。檢測方法多采用MAT、IHA、LAT、IFAT和ELISA等血清學(xué)方法,少部分的調(diào)查研究采用了病原學(xué)和分子生物學(xué)方法;血清陽性率從6.6%(García-Mrquezetal., 2007)到94.6%(Millnetal., 2009)不等;影響弓形蟲感染的因素從貓的年齡、性別、居住區(qū)域、活動特性、食物性質(zhì)到周邊環(huán)境及氣候等不同。因此,各地區(qū)應(yīng)結(jié)合本地實際情況,制定相應(yīng)的措施,預(yù)防貓的弓形蟲感染及傳播。