■許友卿 鄭一民 李偉峰 黃金華，2 丁兆坤

(1.廣西大學(xué)水產(chǎn)科學(xué)研究所，廣西南寧 530004；2.廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧 530007)

軍曹魚(yú)(Rachycentron canadum)是優(yōu)良海水養(yǎng)殖魚(yú)種，也是中國(guó)海水養(yǎng)殖和營(yíng)養(yǎng)飼料研究的主要良種之一。軍曹魚(yú)是肉食性魚(yú)類，廣泛分布在熱帶和亞熱帶海域，在23～29℃水中生長(zhǎng)迅速，一年即可長(zhǎng)至5～6 kg上市。由于軍曹魚(yú)生長(zhǎng)快，個(gè)體大，肉質(zhì)鮮美，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，是目前最熱門(mén)的研究對(duì)象和未來(lái)最被看好的潛力魚(yú)種之一。因此，軍曹魚(yú)研究和繁養(yǎng)發(fā)展迅速。然而，魚(yú)病是軍曹魚(yú)養(yǎng)殖的最大威脅之一。在高密度網(wǎng)箱養(yǎng)殖中，軍曹魚(yú)魚(yú)病頻發(fā)。三類潛在的病原體——細(xì)菌、病毒和寄生蟲(chóng)已經(jīng)導(dǎo)致軍曹魚(yú)病毒淋巴炎病、寄生孢蟲(chóng)黏病和細(xì)菌性疾病。其他病原體如Trichodina spp.,Neobenedenia spp.和Amylodinium spp.也能感染軍曹魚(yú)。因此，在軍曹魚(yú)養(yǎng)殖中，如何預(yù)防軍曹魚(yú)患病，患病后又如何根據(jù)其主要癥狀和病理變化分析病因，正確診斷和積極治療至關(guān)重要。

我們?cè)?010年軍曹魚(yú)養(yǎng)殖中，除了注意魚(yú)苗、水質(zhì)的管理外，通過(guò)分階段投喂優(yōu)質(zhì)飼料藥餌，中西醫(yī)結(jié)合治療魚(yú)病綜合癥，控制和治愈了由病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)和其他病原體感染的軍曹魚(yú)稚魚(yú)綜合癥，不但效果好，成本低，而且不復(fù)發(fā)。

1 材料與方法

1.1 軍曹魚(yú)及其飼養(yǎng)

2010年4月28日凌晨，我們雇用專用魚(yú)苗運(yùn)輸車(chē)，從廣東省湛江市流沙鎮(zhèn)軍曹魚(yú)魚(yú)苗場(chǎng)運(yùn)2 000尾48日齡、體重3～5 g/尾的健康軍曹魚(yú)稚魚(yú)，至廣西防城港廣西水產(chǎn)研究所海水養(yǎng)殖中試基地進(jìn)行室內(nèi)養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。運(yùn)輸前后均對(duì)魚(yú)苗進(jìn)行消毒、水質(zhì)和水溫適應(yīng)性試驗(yàn)，然后把魚(yú)苗放在經(jīng)過(guò)消毒的海水養(yǎng)殖池內(nèi)馴化養(yǎng)殖。所用海水鹽度約27‰～30‰,pH值7.8～8.5,水溫（26±2）℃。馴養(yǎng)中，按實(shí)驗(yàn)方案實(shí)行每天24 h充氣，換水80%，并清洗池底。2010年4月28日中午和晚上，投喂了從防城企沙鎮(zhèn)自由市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)的新鮮小雜魚(yú)魚(yú)糜。4月29日開(kāi)始每天死亡魚(yú)苗約100尾，至完全控制病情為止，總死亡率約80%。

1.2 病魚(yú)表觀及解剖特征

病魚(yú)外觀體色稍為變黑，食欲減退，離群獨(dú)游，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍，身體僵直或呈弧狀彎曲，靜止于池底，悄然死去。偶見(jiàn)魚(yú)體發(fā)黑者緩慢浮出水面，拼命作水平繞圈，繼而螺旋翻轉(zhuǎn)，疑似痛苦掙扎，數(shù)秒鐘后沉入水底，翻白死去。解剖病魚(yú)尸體發(fā)現(xiàn)，其肝腫大、肝腦充血、脾和腎或多或少分布著小米大小的膿包狀白點(diǎn)，嚴(yán)重者呈膿包壞死狀，少量病魚(yú)的肝也有結(jié)節(jié)小白點(diǎn)(見(jiàn)圖1～圖3）；嚴(yán)重者腎臟腫脹，呈貧血狀，脾臟腫脹且呈暗紅色；膽汁呈墨綠色，無(wú)病變特征；大多病魚(yú)胃腸內(nèi)無(wú)食糜，也有的病魚(yú)胃腸充滿褐色食糜。取其肝、腎、脾涂片進(jìn)行瑞氏染色后，于400x顯微鏡下觀察。圖4為肝結(jié)節(jié)白點(diǎn)涂片結(jié)果。

圖1 患病軍曹魚(yú)稚魚(yú)部分內(nèi)臟的癥狀(肝有結(jié)節(jié)白點(diǎn)，腎腫大，脾為暗紅色)

圖2 患病軍曹魚(yú)稚魚(yú)肝的結(jié)節(jié)白點(diǎn)

圖3 患病軍曹魚(yú)稚魚(yú)脾的結(jié)節(jié)白點(diǎn)

圖4 患病軍曹魚(yú)稚魚(yú)肝結(jié)節(jié)白點(diǎn)涂片的瑞氏染色400x顯微觀察

1.3 分析軍曹魚(yú)患病的主要病因

經(jīng)查實(shí)，原軍曹魚(yú)魚(yú)苗場(chǎng)和出售他處的軍曹魚(yú)稚魚(yú)沒(méi)有出現(xiàn)上述患病癥狀，我們選購(gòu)的軍曹魚(yú)稚魚(yú)于運(yùn)輸前和運(yùn)輸當(dāng)天也沒(méi)有發(fā)生異常死亡現(xiàn)象。只是在實(shí)驗(yàn)操作者臨時(shí)改變?cè)瓕?shí)驗(yàn)方案，給軍曹魚(yú)稚魚(yú)投喂了二次從防城企沙鎮(zhèn)自由市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)的新鮮海水小雜魚(yú)魚(yú)糜后，才發(fā)生持續(xù)大量死亡事故。因此，推測(cè)很可能是由當(dāng)?shù)刈杂墒袌?chǎng)買(mǎi)的海水小雜魚(yú)帶來(lái)的病菌感染所致。海水小雜魚(yú)帶來(lái)的病菌可以通過(guò)二條途徑感染軍曹魚(yú)稚魚(yú)：第一，軍曹魚(yú)稚魚(yú)直接吞食帶病菌小雜魚(yú)魚(yú)糜；第二，撒在馴化池水中的帶病菌小雜魚(yú)魚(yú)糜既能使水質(zhì)迅速富營(yíng)養(yǎng)化，又能使病菌迅猛繁殖蔓延，感染軍曹魚(yú)稚魚(yú)。這樣病菌由食物至體內(nèi)、由體外至體內(nèi)，雙途徑結(jié)合同時(shí)感染軍曹魚(yú)，使其稚魚(yú)爆發(fā)魚(yú)病，產(chǎn)生災(zāi)難性后果。

根據(jù)上述軍曹魚(yú)患病的主要癥狀判斷，可能是由神經(jīng)壞死病毒(Nervous necrosis virus,NNV)、諾卡氏菌（Nocardiaceae）和美人魚(yú)發(fā)光桿菌(Photobacterium damselae subsp.)等3種病原引起的綜合癥。其中神經(jīng)壞死病毒(red-spotted grouper NNV,RGNNV)是近年來(lái)嚴(yán)重危害海水魚(yú)苗生產(chǎn)、引起爆發(fā)性流行病的重大病原之一。研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)壞死病毒已經(jīng)感染40多種魚(yú)，在亞洲的一些國(guó)家，尤其是中國(guó)和日本，神經(jīng)壞死病毒對(duì)海水養(yǎng)殖的魚(yú)類危害十分嚴(yán)重。閆云峰等(2010)研究發(fā)現(xiàn)，軍曹魚(yú)也是神經(jīng)壞死病毒的易感種群之一，病毒能通過(guò)水平傳播感染軍曹魚(yú)。我國(guó)臺(tái)灣學(xué)者從發(fā)生大批死亡的軍曹魚(yú)中檢測(cè)到魚(yú)類神經(jīng)壞死病毒。病毒性神經(jīng)壞死病的主要病癥是，病魚(yú)表現(xiàn)出不同程度的神經(jīng)異常，不攝食，腹部朝上，在水面作水平旋轉(zhuǎn)或上下翻轉(zhuǎn)，呈痙攣狀。

諾卡氏菌病魚(yú)的主要癥狀是：體表和心、脾、腎等內(nèi)臟出現(xiàn)白色結(jié)節(jié)。目前認(rèn)為，諾卡氏菌使海水魚(yú)致病的途徑：一是攝食了帶病菌的海水小雜魚(yú)或魚(yú)粉；二是被存于養(yǎng)殖池的病菌所感染。在自然條件下，由于集約化程度高，養(yǎng)殖密度大，魚(yú)體容易損傷和體質(zhì)下降，給病原菌提供了致病機(jī)會(huì)。

美人魚(yú)發(fā)光桿菌導(dǎo)致魚(yú)結(jié)節(jié)病的主要癥狀是：嚴(yán)重感染的魚(yú)腎、脾出現(xiàn)大量結(jié)節(jié)，魚(yú)肝、腸系膜也會(huì)出現(xiàn)結(jié)節(jié)。此病的累積死亡率較高，可達(dá)50%～60%。美人魚(yú)發(fā)光桿菌殺魚(yú)亞種（P.damselae subsp.Piscicida）最早分離于野生美洲狼鱸(Morone americanus)和斑點(diǎn)叉尾鮰(Ictalurus punctatus)。此后嚴(yán)重影響日本五條鰤(Seriola quinqueradiata)、香魚(yú)(Plecoglossus altivelis)、海鱒(Salmo Trutta)、虹鱒（Oncorhynchus mykiss）、鲆(Bothidae)和鰈類(lefteye flounders)等，半數(shù)致死量約 103～106。美人魚(yú)發(fā)光桿菌是一種致病性很高的魚(yú)類病原菌，寄生感染宿主不具特異性，能感染多種養(yǎng)殖魚(yú)類。美人魚(yú)發(fā)光桿菌也可導(dǎo)致軍曹魚(yú)結(jié)節(jié)病，該病通常在18～20℃爆發(fā)，曾經(jīng)對(duì)臺(tái)灣軍曹魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)造成重大損失。人工將美人魚(yú)發(fā)光桿菌感染軍曹魚(yú)，2～4 d即出現(xiàn)死魚(yú)，其癥狀與本次軍曹魚(yú)發(fā)病癥狀基本一致。

由于患病軍曹魚(yú)只是皮膚顏色稍為變黑、攝食和活動(dòng)減少，沒(méi)有其他明顯外部癥狀，而且美人魚(yú)發(fā)光桿菌殺魚(yú)亞種主要通過(guò)胞外蛋白酶類、胞外溶血素和細(xì)胞溶素等因子使魚(yú)致病、死亡，因此在發(fā)病早期很難確診，導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率均很高。

1.4 中西醫(yī)結(jié)合治療軍曹魚(yú)綜合癥

根據(jù)上述分析，魚(yú)病可能是由神經(jīng)壞死病毒(Nervous necrosis virus,NNV)、諾卡氏菌（Nocardiaceae）和美人魚(yú)發(fā)光桿菌(Photobacterium damselae subsp.)等3種病原引起的綜合癥。我們因地制宜，采取了緊急處理方案，立即清除死魚(yú)，隔離病魚(yú)，消毒馴化池和全部稚魚(yú)，并轉(zhuǎn)移上桶分養(yǎng)，以便操作、處理和治療。首先立即停止投喂當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)買(mǎi)的海水小雜魚(yú)，改用根據(jù)原實(shí)驗(yàn)方案準(zhǔn)備的優(yōu)質(zhì)配合飼料。對(duì)全部稚魚(yú)實(shí)施體內(nèi)、外用藥，中西醫(yī)結(jié)合治療。隔天輪流用標(biāo)準(zhǔn)濃度聚維酮碘（PVP-I，廈門(mén)北大泰普動(dòng)物保健有限公司）或1 mg/l化學(xué)純高錳酸鉀溶液浸浴消毒魚(yú)體30 min，并定期清洗、消毒養(yǎng)魚(yú)桶，防止病菌繁殖蔓延。同時(shí)及時(shí)清除糞便和剩餌，防止養(yǎng)殖水體富營(yíng)養(yǎng)化，每天換用80%以上新鮮過(guò)濾的海水，并保持流水和充氣。每天上午按每千克魚(yú)體重添加聚維酮碘2 mg、自制穿心蓮粉12 g、自制板藍(lán)根粉9 g拌飼料投喂，主要治療細(xì)菌性疾??；下午按每千克魚(yú)體重添加研碎的病毒靈(鹽酸嗎啉胍片，錦州生化制藥有限公司)20 mg拌飼料投喂，主要治療病毒性疾?。刂拼瞬『?，停止使用病毒靈），連續(xù)投喂7 d，7 d后藥量減半，直至完全控制疾病，治愈病癥為止。

2 結(jié)果與討論

從2010年5月6日開(kāi)始我們利用中西綜合療法，一周后，死亡減半，由原來(lái)平均每天死魚(yú)約100尾降至約50尾，二周后即5月19日完全制止死魚(yú)，控制了疾?。ㄒ?jiàn)圖5）。所治愈的軍曹魚(yú)稚魚(yú)體色鮮亮，游動(dòng)活躍，食欲旺盛，搶食兇猛，未出現(xiàn)復(fù)發(fā)病癥。

圖5 用藥前后(4月28日～5月18日)軍曹魚(yú)稚魚(yú)死亡情況

進(jìn)行高密度養(yǎng)魚(yú)，選好魚(yú)苗、科學(xué)管理、提供優(yōu)質(zhì)水源和餌料是十分關(guān)鍵的。只有優(yōu)化“水、種、管、餌”，才能保證水產(chǎn)養(yǎng)殖健康發(fā)展。養(yǎng)魚(yú)應(yīng)以防病為主，一旦發(fā)現(xiàn)魚(yú)病，應(yīng)立即對(duì)病魚(yú)消毒、隔離、提供優(yōu)質(zhì)水源和治療等措施，防止魚(yú)病繼續(xù)蔓延惡化。

投喂無(wú)病菌的優(yōu)質(zhì)飼料是重要措施之一。生物餌料、飼料和添加劑等是水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要投入品，其質(zhì)量?jī)?yōu)劣與養(yǎng)殖水產(chǎn)品的健康和質(zhì)量密切相關(guān)，是保證養(yǎng)殖水產(chǎn)品質(zhì)量和安全的關(guān)鍵因素。因此，必須保證這些投入品的質(zhì)量符合有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)要求，施用方法符合養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范，保證養(yǎng)殖水產(chǎn)品的質(zhì)量安全，防止污染環(huán)境。如果把不消毒或者消毒不徹底的餌料魚(yú)或其他帶病菌的飼料投喂所養(yǎng)的魚(yú)，不僅導(dǎo)致所養(yǎng)的魚(yú)直接感染病菌，而且會(huì)使水質(zhì)富營(yíng)養(yǎng)化，病菌及其他有害微生物大量繁殖。

此次魚(yú)病爆發(fā)，很可能是由防城企沙鎮(zhèn)自由市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)的海水小雜魚(yú)帶來(lái)的病菌感染所致。因此我們首先立即停止投喂當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)購(gòu)買(mǎi)的海水小雜魚(yú)，改用根據(jù)原實(shí)驗(yàn)方案準(zhǔn)備的優(yōu)質(zhì)配合飼料。這樣一方面切斷外源病原體、防止魚(yú)病繼續(xù)擴(kuò)大、蔓延惡化；另一方面為治療魚(yú)病打下基礎(chǔ)，因?yàn)閮?yōu)質(zhì)配合飼料和科學(xué)投喂方法能增強(qiáng)魚(yú)類對(duì)疾病的抵抗能力。

軍曹魚(yú)稚魚(yú)爆發(fā)綜合癥是非常罕見(jiàn)的，目前還沒(méi)有特效藥。據(jù)報(bào)道，利用赤點(diǎn)石斑魚(yú)神經(jīng)壞死病毒衣殼蛋白基因重組蛋白制成疫苗，通過(guò)腹腔注射免疫魚(yú)有顯著的免疫保護(hù)效應(yīng)，可預(yù)防神經(jīng)壞死病毒感染。然而，對(duì)軍曹魚(yú)疫苗的研究是當(dāng)前研究的課題，有許多問(wèn)題尚待解決。

我們利用中西醫(yī)結(jié)合治療軍曹魚(yú)綜合癥所述用藥的主要根據(jù)：①聚維酮碘可通過(guò)逐漸分解出游離碘（其中80%～90%的結(jié)合碘可解聚成游離碘）而發(fā)揮殺菌作用，直接使病原體內(nèi)的蛋白質(zhì)變性、沉淀，以致病原體細(xì)胞死亡，從而達(dá)到高效消毒殺菌的目的。其特點(diǎn)是強(qiáng)力殺菌，毒性低，且為廣譜殺菌劑，能殺死病毒、細(xì)菌、芽孢、真菌及原蟲(chóng)；②高錳酸鉀具有強(qiáng)氧化性，可促使細(xì)菌或其它有機(jī)物立即放出新生態(tài)氧，通過(guò)氧化細(xì)菌體內(nèi)的活性基因而發(fā)揮殺滅細(xì)菌作用，對(duì)殺滅原蟲(chóng)類、單殖吸蟲(chóng)類和錨頭蚤等寄生蟲(chóng)有顯著效果，其毒性小、副作用小、用量??；③病毒靈（嗎啉啡雙胍，ABOB）對(duì)DNA病毒(腺病毒)和RNA病毒(?？刹《炯傲鞲屑仔筒《?均具有明顯抑制作用，能阻礙病毒脫氧核糖核酸的合成，從而抑制病毒的增殖，用于預(yù)防水產(chǎn)動(dòng)物病毒性疾病，對(duì)多種病毒都有效；④板藍(lán)根具有抗菌、抗病毒、抗鉤端螺旋體、解毒、提高免疫力、抗腫瘤和白血病等功能；⑤穿心蓮具有抗菌、抗病毒等作用，且無(wú)毒性和副作用。

根據(jù)藥物的特性，聚維酮碘不僅可用于養(yǎng)殖水體消毒，還可拌于飼料投喂，殺滅魚(yú)體內(nèi)、外的病菌；穿心蓮具有清熱解毒、消炎、殺菌、消腫止痛等作用；板藍(lán)根可提高魚(yú)細(xì)胞分泌干擾素、提高免疫細(xì)胞及肝臟網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬作用的功效，因而能有效地抑制病毒的復(fù)制。3者結(jié)合使用對(duì)病菌病毒的抑制、撲殺效果很好。用中草藥治療魚(yú)病，不僅綠色環(huán)保，對(duì)魚(yú)體的毒副作用小、殘留量低，還能全面調(diào)節(jié)魚(yú)體的生理功能，兼具營(yíng)養(yǎng)與藥物的雙重作用。因此，上述綜合療法能迅速控制并治愈爆發(fā)的軍曹魚(yú)稚魚(yú)綜合癥，取得非常理想的效果。

（參考文獻(xiàn)38篇，刊略，需者可函索）