唐聰海 原敏
【摘要】 目的:比較微柱玻璃珠法和微柱凝膠法直接抗人球蛋白(DAT)測定結(jié)果及在新生兒溶血?。℉DN)中的臨床意義。方法:采用微柱玻璃珠法和微柱凝膠法對392例臨床疑為HDN的高膽紅素血癥新生兒標(biāo)本進(jìn)行DAT檢測,并比較分析檢測結(jié)果。結(jié)果:392例標(biāo)本用微柱玻璃珠法DAT檢測陽性為168例,陽性率為42.95%(168/392),微柱凝膠法DAT檢測陽性為91例,陽性率為23.2%(91/392),兩種方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2 =75.1,P<0.01)。陽性樣本中,DAT結(jié)果在0.5+-2+水平上,微柱玻璃珠法檢測陽性的140例中,微柱凝膠法檢測陽性的只有63例;DAT結(jié)果(3+-4+)水平上,微柱玻璃珠法與微柱凝膠法檢測的陽性樣本及陽性水平無差異。結(jié)論:微柱玻璃珠法與微柱凝膠法相比較,敏感度更高,在HDN的診斷和治療中值得推廣。
【關(guān)鍵詞】 新生兒溶血??; 微柱玻璃珠法; 微柱凝膠法
新生兒溶血病機(jī)理是母體的IgG抗體通過胎盤屏障進(jìn)入胎兒血液中,對胎兒的相應(yīng)紅細(xì)胞進(jìn)行破壞,造成溶血,引起高膽紅素血癥[1]。因此,建立一種既簡單,快速,有特異敏感的試驗(yàn)室檢測方法尤為重要。本文通過微柱玻璃珠法與微柱凝膠法檢測DAT敏感性的比較,探討微柱玻璃珠法在HDN檢測中的臨床應(yīng)用。
1 資料與方法
1.1 一般資料 2010年1月-2011年4月本院新生兒溶血病臨床表現(xiàn)為高膽紅素血癥疑為HDN的新生兒標(biāo)本392例,年齡1~7 d。男216例,女176例。
1.2 試劑與儀器 試劑為西班牙Diana公司的DG Gel Coombs卡,美國強(qiáng)生公司的強(qiáng)生Coombs卡。 儀器為Diana公司Diana fuge離心機(jī),強(qiáng)生BioVue離心機(jī)。
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 微柱凝膠卡式法檢測 將微柱凝膠DG Gel Coombs卡第一孔為測定孔,加入1%新生兒紅細(xì)胞懸液,第二孔為陰性對照孔, 加入1%健康人紅細(xì)胞懸液,用Diana公司Diana fuge離心機(jī)1100 r/min離心10 min后觀察結(jié)果。結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)按文獻(xiàn)[2]。
1.3.2 微柱玻璃珠卡式法檢測 將強(qiáng)生公司的強(qiáng)生Coombs卡第一孔為測定孔,加入1%新生兒紅細(xì)胞懸液,第二孔為陰性對照孔, 加入1%健康人紅細(xì)胞懸液,用強(qiáng)生BioVue離心機(jī)1400 r/min離心5 min后觀察結(jié)果。結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)按文獻(xiàn) [2]。
2 結(jié)果
微柱玻璃珠法和微柱凝膠法平行檢測392例疑為HDN的高膽紅素血癥新生兒血液,見表1。結(jié)果顯示,微柱玻璃珠法檢出HDN陽性168例,陽性率為42.9%,微柱凝膠法檢出HDN陽性91例,陽性率為23.2%,兩者相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( 字2=75.1,P<0.01)。見表2。
3 討論
HDN主要是母嬰血型不合,母體產(chǎn)生IgG類抗體通過胎盤作用于胎兒紅細(xì)胞,使之產(chǎn)生不同程度的新生兒黃疸,貧血,水腫,肝脾腫大等溶血病癥狀[3]。HDN的早期診斷和早期治療對胎兒的存活和減低溶血產(chǎn)生的影響,具有重要的意義。微柱凝集試驗(yàn)作為一種免疫學(xué)檢測的新技術(shù),綜合了分子篩技術(shù),抗原抗體反應(yīng)技術(shù),離心技術(shù),與聚凝胺法和抗人球法相比,具有獨(dú)特優(yōu)勢[4-5]。微柱玻璃珠卡的介質(zhì)是細(xì)微玻璃珠,微柱凝膠卡的介質(zhì)是凝膠顆粒。兩種卡都具有操作簡便,細(xì)胞不用洗滌[6],敏感度高,特異性高,重復(fù)性好,結(jié)果易于判讀和保存等優(yōu)點(diǎn)。
受檢的392樣本中,微柱凝膠法檢測陽性的樣本,微柱玻璃珠法檢測同樣為陽性。微柱玻璃珠法檢出DAT陽性168例,微柱凝膠法檢出DAT陽性91例,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2=75.1,P<0.01)。顯示微柱玻璃珠法比微柱凝膠法敏感度更高。在HDN的早期診斷上,微柱玻璃珠法比微柱凝膠法具有更大的優(yōu)勢。將陽性的樣本分成DAT結(jié)果≤2+和DAT結(jié)果>2+ 兩個水平,結(jié)果見表2。DAT結(jié)果≤2+的樣本中,微柱玻璃珠法檢測DAT陽性為140例,微柱凝膠法檢測DAT陽性為63例(45%),陰性為77例(55%)。且同一份陽性的樣本,微柱玻璃珠法比微柱凝膠法檢測的陽性水平高0.5+~1+。DAT結(jié)果>2+的28例樣本中,微柱玻璃珠法與微柱凝膠法檢測的結(jié)果一致,水平相同。筆者認(rèn)為,DAT≤2+的樣本,細(xì)胞結(jié)合比較疏松,敏感度高的微柱玻璃珠法比微柱凝膠法檢測的陽性率及陽性水平高,而在DAT>2+的樣本,細(xì)胞結(jié)合比較致密,兩種方法檢測的陽性率及陽性水平無差異。
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(收稿日期:2012-09-11) (本文編輯:車艷)