隆維東，劉萬彬，李堅(jiān)

（重慶市巴南區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶401320）

·短篇報(bào)道·

血清不明抗體干擾TPPA試驗(yàn)一例

隆維東，劉萬彬，李堅(jiān)

（重慶市巴南區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶401320）

TPPA；干擾；不明抗體，明膠顆粒

梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種慢性全身性性傳播疾病。當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后，經(jīng)淋巴系統(tǒng)及血液循環(huán)播散到全身，幾乎可以侵犯全身所有臟器和組織，并產(chǎn)生各種各樣的癥狀和體征，嚴(yán)重者甚至危及生命[1-2]?；颊呋疾?～10周后，體內(nèi)即可產(chǎn)生一定數(shù)量抗體[3]。臨床實(shí)驗(yàn)室可以通過檢測血清標(biāo)本中的抗體來判斷是否感染梅毒螺旋體。本院收治1例血清不明抗體干擾梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集(TPPA)試驗(yàn)患者，介紹如下：

1 病例簡介

患者，女，38歲，孕1產(chǎn)1，因急性上消化道出血于2012年4月25日入院。入院后因?yàn)樾枰斪腋〖t細(xì)胞，故抽血送我科進(jìn)行輸血前常規(guī)免疫檢查。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)該患者TPPA試驗(yàn)陰性對照孔和實(shí)驗(yàn)孔均為弱陽性凝集(±)，故不能判斷患者是否感染梅毒。為進(jìn)一步明確實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們先將患者血清樣品進(jìn)行了吸收試驗(yàn)，然后再做梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)。

2 吸收試驗(yàn)

2.1 標(biāo)本及試劑該患者血清標(biāo)本3 ml，未加任何抗凝劑。梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試劑，日本富士瑞必歐株式會(huì)社提供，批號(hào)：VN11220。

2.2 操作步驟取已溶解好的未致敏粒子試劑950μl至小試管中，加入患者血清樣品50μl（即1：20稀釋），充分混勻后，室溫放置30 min，以充分吸收患者血清樣品中的不明抗體。再離心5 min，吸取上清液待用。在反應(yīng)板第1孔加入25μl上清液，作為陰性對照孔（即1：20稀釋）；在反應(yīng)板第2孔加入25 μl血清稀釋液，并加入上清液25 μl，充分混勻（即1：40稀釋），然后吸棄25 μl混合液，將第2孔作為患者血清樣品的實(shí)驗(yàn)孔。最后在第1孔加入未致敏粒子25 μl，第2孔加入致敏粒子25 μl，置平板混合器振蕩30 s，室溫靜置2 h。

2.3 結(jié)果第一孔（陰性對照孔）出現(xiàn)陰性反應(yīng)，第2孔（實(shí)驗(yàn)孔）出現(xiàn)陰性反應(yīng)，故最后判定該患者為抗梅毒螺旋體抗體陰性。

3 討論

梅毒血清學(xué)試驗(yàn)包括非特異性梅毒螺旋體試驗(yàn)和特異性梅毒螺旋體試驗(yàn)。非特異性梅毒螺旋體試驗(yàn)如梅毒血漿反應(yīng)素快速試驗(yàn)(RPR)，是將VDRL抗原吸附于活性碳顆粒表面，若待測血清中存在反應(yīng)素，即可發(fā)生凝集，該方法在基層醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室廣泛使用。但因其特異性較低，假陽性率較高，故只能作為梅毒感染的初篩實(shí)驗(yàn)[4]。特異性梅毒螺旋體試驗(yàn)如TPPA試驗(yàn)，其以明膠顆粒為載體，吸附梅毒螺旋體(Niohols)株菌抗原，檢測的是梅毒特異性抗體，同時(shí)可避免因血細(xì)胞自溶而引起的假陰性。故臨床實(shí)驗(yàn)室常以TPPA陽性作為確診梅毒的依據(jù)[5]。我們在TPPA試驗(yàn)中，出現(xiàn)陰性對照孔和實(shí)驗(yàn)孔均為弱陽性凝集(±)后，查詢了該患者病歷，發(fā)現(xiàn)患者10年前懷孕分娩時(shí)有輸血史，分別輸注4 U懸浮紅細(xì)胞和400 ml血漿；3年前做過顱腦手術(shù)，分別輸注5 U懸浮紅細(xì)胞和400 ml血漿，同時(shí)有大量臨床用藥史，具體不詳。陰性對照孔加入的試劑是未致敏粒子，若出現(xiàn)陽性反應(yīng)，一方面可能是未致敏粒子被致敏粒子污染，另一方面可能是血清中存在某種不明抗體，而該抗體恰好能夠匹配未致敏粒子的抗原決定簇，發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。因?yàn)樵摶颊咧坝写罅枯斞泛团R床用藥史，可能在之前的輸血或用藥過程中產(chǎn)生了不明抗體。而梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)中的未致敏粒子采用的是經(jīng)單寧酸處理調(diào)制濃度為1%的明膠粒子，所以針對這種血清不明抗體，我們主要考慮是抗明膠粒子抗體或抗單寧酸抗體。我們通過吸收試驗(yàn)，在血清樣品中加入大量未致敏粒子，為血清不明抗體提供了大量的不明抗體結(jié)合位點(diǎn)?？乖贵w充分反應(yīng)后，通過離心，極大程度降低或消除了血清中不明抗體含量，從而避免血清不明抗體結(jié)合到明膠粒子上，出現(xiàn)假陽性反性。

因此，我們在TPPA試驗(yàn)，若陰性對照孔出現(xiàn)陽性反應(yīng)，在排除了未致敏粒子被致敏粒子污染的情況后，則要考慮血清中是否存在不明抗體[6]。通過吸收試驗(yàn)清除不明抗體，從而使檢驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。

[1]梁雙吟,李小云,莊祥龍．三種梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的適用性分析[J].海南醫(yī)學(xué),2005,16(11):112．

[2]李廣兵,羅燕,許金萍．兩種梅毒檢測方法的比較分析[J].中國社區(qū)醫(yī)師·醫(yī)學(xué)專業(yè),2012,14(305):256．

[3]王珍,蔡志凌,彭華．梅毒孕產(chǎn)婦對妊娠梅毒危害性認(rèn)知情況調(diào)查分析[J].海南醫(yī)學(xué),2009,20(07):285-286．

[4]勾宗蓉,呂連華.兩種梅毒血清試驗(yàn)對梅毒診斷及療效的價(jià)值分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2012,10(1):49-50．

[5]孫慈惠,鄧紅櫻.梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)不確定結(jié)果相關(guān)因素分析[J].中國國境衛(wèi)生檢疫雜志,2007,30(1):18-19．

[6]胡偉華.梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)假陽性1例[J].沈陽部隊(duì)醫(yī)藥,2011,24(4):99.

R759.1

D

1003—6350(2013)01—0142—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.01.0064

2012-05-21）

通迅作者：李堅(jiān)。E-mai：lijian701029@126.com