楊麗霞, 郭瑞威, 石燕昆, 齊 峰, 徐安妨, 葉金善

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冠心病患者糖調(diào)節(jié)異常與兩種趨化因子的相關(guān)性

楊麗霞*, 郭瑞威, 石燕昆, 齊 峰, 徐安妨, 葉金善

（成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院心血管內(nèi)科, 昆明 650032）

研究冠心病患者血糖、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、活化T細(xì)胞趨化因子（RANTES）的變化，探討其在冠心病發(fā)病中的作用。納入冠心病患者300例，分為急性冠脈綜合征（ACS）組（＝180）以及穩(wěn)定型心絞痛（SAP）組（＝120），另納入正常受試者60例為對(duì)照組。全部行冠狀動(dòng)脈造影（CAG）檢查，冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度采用Genisin評(píng)分評(píng)估，酶聯(lián)免疫法測(cè)定RANTES、MCP-1濃度，冠心病組除確診糖尿病患者，行簡(jiǎn)易葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT），分析血糖與RANTES、MCP-1和冠狀動(dòng)脈病變的相關(guān)性。（1）冠心病患者中糖代謝異常者70.7%，糖尿病組的 RANTES、MCP-1濃度顯著高于糖調(diào)節(jié)受損及正常血糖組（組間比較均為＜0.05）。（2）RANTES、MCP-1與血糖的相關(guān)性分析表明RANTE、MCP-1與血糖呈顯著正相關(guān)。（3）ACS組的RANTES、MCP-1濃度顯著高于SAP組及正常對(duì)照組（組間比較均為＜0.05）。（4）多元逐步回歸分析表明冠狀動(dòng)脈狹窄程度與RANTES、MCP-1、血糖、低密度脂蛋白膽固醇呈正相關(guān)，與高密度脂蛋白膽固醇呈負(fù)相關(guān)。糖調(diào)節(jié)異常與RANTES、MCP-1呈正相關(guān)，共同參與冠心病的發(fā)生發(fā)展。

活化T細(xì)胞趨化因子; 單核細(xì)胞趨化蛋白-1; 血糖異常; 冠心病; 急性冠脈綜合征

糖尿病是冠心病的等危癥，NAVIGATOR研究顯示[1]，診斷為冠心病的病例經(jīng)簡(jiǎn)易葡萄糖耐量試驗(yàn)（oral glucose tolerance test，OGTT）檢測(cè)約有62.5%人群存在糖尿病或糖調(diào)節(jié)受損，國(guó)內(nèi)研究結(jié)果這一比例更是高達(dá)80%。冠心病的病理基礎(chǔ)是動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS），目前一致認(rèn)為炎癥機(jī)制是AS的主要特征[2]。單核細(xì)胞趨化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）、活化T細(xì)胞趨化因子（regulated upon activation normal T cell expressed and secreted，RANTES）不僅是AS主要靶細(xì)胞——單核/巨噬細(xì)胞的特異性趨化因子，也參與易損斑塊形成中炎癥反應(yīng)的上游啟動(dòng)和進(jìn)展。國(guó)外研究顯示它們?cè)谔悄虿〖安l(fā)癥中也發(fā)揮重要作用，可為判斷2型糖尿病及其并發(fā)癥的進(jìn)展程度提供重要信息，通過干預(yù)還可以減緩病情進(jìn)展[3]。但糖尿病或糖調(diào)節(jié)受損患者高血糖及其代謝終產(chǎn)物能否通過MCP-1、RANTES趨化因子啟動(dòng)并加速AS及急性冠狀動(dòng)脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）易損斑塊的炎癥反應(yīng)，引起斑塊破裂導(dǎo)致急性冠狀動(dòng)脈事件目前并不清楚。因此，本研究對(duì)高血糖及MCP-1、RANTES趨化因子與冠狀動(dòng)脈病變相互間的相關(guān)性進(jìn)行研究，探討糖代謝異常與MCP-1、RANTES趨化因子在冠狀動(dòng)脈病變中的作用。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2009年1月至10月成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院心血管內(nèi)科住院行冠狀動(dòng)脈造影（coronary angiography，CAG）的患者360例，分為ACS組（＝180例）、穩(wěn)定型心絞痛（stable angina pectoris，SAP）組（＝120例），另納入對(duì)照組（＝60例）。ACS組又包括急性ST段抬高型心肌梗死60例、非ST段抬高型心肌梗死60例和不穩(wěn)定型心絞痛60例。對(duì)照組為CAG結(jié)果正常者。ACS診斷均符合AHA/ACC診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)CAG檢查至少有一只血管病變狹窄程度≥50%。不穩(wěn)定型心絞痛組病例同時(shí)行CT冠狀動(dòng)脈血管成像檢查提示病變?yōu)檐洶邏K（CT值小于50Hu）。排除合并急性腦卒中、急性周圍血管疾病或者血管栓塞性疾病、嚴(yán)重肝腎功能不全、感染、自身免疫疾病、哮喘及腫瘤患者。

1.2 方法

1.2.1標(biāo)本采集患者于清晨空腹12h，抗凝管取肘靜脈血3ml，3000r/min離心10min，分離血清于-80℃冰箱凍存待測(cè)。同時(shí)空腹采肘靜脈血用全自動(dòng)生化儀測(cè)定血糖、總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）及甘油三酯（triglyceride，TG）等生化指標(biāo)。

1.2.2 冠狀動(dòng)脈造影 采用Judkins法。冠狀動(dòng)脈狹窄程度的計(jì)算采用Gensini評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：狹窄≤25%為1分，25%～50%為2分，50%～75%為4分，75%～90%為8分，90%～99%為16分，100%（閉塞）為32分；不同節(jié)段冠狀動(dòng)脈評(píng)分系數(shù)左主干×5，左前降支近段×2.5，中段×1.5，遠(yuǎn)段×1，第一對(duì)角支×1，第二對(duì)角支×0.5，左回旋支近段×2.5，遠(yuǎn)段和后降支、鈍緣支均×1，后側(cè)支×0.5；右冠近、中、遠(yuǎn)段和后降支均×1，最終評(píng)分為各分支積分之和。

1.2.3 血糖測(cè)定 入選300例冠心病患者，除明確診斷糖尿病患者外，次日行OGTT（ACS病例住院5日病情穩(wěn)定后進(jìn)行），按照空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）及OGTT試驗(yàn)2h血糖水平，根據(jù)1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，將所有病例分為糖尿病組（包括既往已明確診斷糖尿病、FBG≥7.0mmol/L，OGTT試驗(yàn)2h血糖≥11.1mmol/L）、糖調(diào)節(jié)受損組（包括FBG≥6.1mmol/L但＜7.0mmol/L或OGTT試驗(yàn)2h血糖≥7.8mmol/L但＜11.1mmol/L，滿足兩項(xiàng)中的任一項(xiàng)或兩項(xiàng)均滿足）和血糖水平正常組。

1.2.4 RANTES、MCP-1趨化因子測(cè)定 采用ELISA法測(cè)定RANTES、MCP-1趨化因子，試劑盒購(gòu)自大連泛邦生物工程有限公司，操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 糖尿病檢出情況

300例確診冠心病患者經(jīng)OGTT試驗(yàn)，檢測(cè)出糖尿病患者185例，糖調(diào)節(jié)異常者27例，糖代謝異常例數(shù)占冠心病患者總比例為70.7%。

2.2 血糖情況與RANTES、MCP-1濃度的關(guān)系

糖尿病組、糖調(diào)節(jié)受損組的RANTES、MCP-1濃度均顯著高于正常血糖組（＜0.05），且糖尿病組較糖調(diào)節(jié)受損組增高更顯著（＜0.05；表1）。相關(guān)性分析顯示，RANTE與血糖呈正相關(guān)（＝0.69，＜0.01）；MCP-1也與血糖呈正相關(guān)（＝0.61，＜0.01）。

表1 糖代謝異常與正常血糖組間RANTES和MCP-1濃度

注: MCP-1: 單核細(xì)胞趨化蛋白-1; RANTES: 活化T細(xì)胞趨化因子。與正常組比較,*＜0.05; 與糖調(diào)節(jié)受損組比較,#＜0.05

2.3 冠心病情況與RANTES、MCP-1濃度和其他代謝指標(biāo)的關(guān)系

ACS組RANTES和MCP-1濃度顯著高于SAP組及正常對(duì)照組（＜0.05），ACS組FBG、LDL-C濃度顯著高于SAP組及正常對(duì)照組，ACS組的HDL-C濃度則顯著低于SAP組及正常對(duì)照組（表2）。

以冠狀動(dòng)脈病變Gensini評(píng)分為應(yīng)變量，以各危險(xiǎn)因素為自變量進(jìn)行多元逐步回歸分析，有RANTE、MCP-1、FBG、LDL-C、HDL-C五個(gè)因素進(jìn)入回歸方程，結(jié)果顯示MCP-1、RANTE、FBG、LDL-C與冠狀動(dòng)脈狹窄程度呈正相關(guān)，HDL-C與冠狀動(dòng)脈狹窄程度呈負(fù)相關(guān)（表3）。

3 討 論

冠心病與糖尿病密切相關(guān)，一方面糖尿病是冠心病的等危癥，另一方面在冠心病患者中普遍存在糖尿病或糖調(diào)節(jié)受損。我們對(duì)300例經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影明確診斷的冠心病患者行簡(jiǎn)易OGTT試驗(yàn)，糖代謝異常例數(shù)占冠心病患者總比例的70.7%，顯示高血糖對(duì)冠心病的發(fā)病有重要影響。RANTES和MCP-1趨化因子在糖尿病的發(fā)病中發(fā)揮重要作用，對(duì)糖代謝異常組間趨化因子濃度的分析表明，RANTES和MCP-1在糖尿病組、糖調(diào)節(jié)受損組較正常血糖組的濃度逐漸增高，進(jìn)一步對(duì)血糖與RANTES、血糖與MCP-1的相關(guān)性分析表明，RANTES和MCP-1與血糖也呈正相關(guān)，提示兩種趨化因子與糖尿病發(fā)病密切相關(guān)。

分析RANTES和MCP-1兩種趨化因子在冠心病各組及對(duì)照組間的變化，結(jié)果顯示ACS組較SAP組升高，SAP組較正常對(duì)照組升高，血糖、RANTES、MCP-1與冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度均呈正相關(guān)。提示RANTES和MCP-1兩種趨化因子在冠心病及ACS的發(fā)病中有重要作用，國(guó)外研究也提示RANTES和MCP-1濃度的變化與AS進(jìn)展和臨床事件增加相關(guān)[4]。此外，F(xiàn)uchs等[5]發(fā)現(xiàn)缺血性心肌病患者血漿中MCP-1水平與冠狀動(dòng)脈斑塊負(fù)荷及斑塊成分顯著相關(guān)。在ACS的發(fā)病過程中，易損斑塊的穩(wěn)定性取決于基質(zhì)的合成與降解，基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrix metallopeptidase 9，MMP-9）/組織抑制因子（tissue inhibitors of metalloproteinases，TIMPs）水平被認(rèn)為是一種反映基質(zhì)降解和沉積達(dá)到平衡的標(biāo)志，MMP-9水平的升高將引起纖維斑塊的破裂導(dǎo)致ACS的發(fā)生。目前的研究已證實(shí)升高的血糖及其糖基化終產(chǎn)物會(huì)過度激活NF-κB的表達(dá)[6]，Mezzano等[7]通過免疫組織化學(xué)及原位雜交發(fā)現(xiàn)，NF-κB的激活可使RANTES的表達(dá)增加，且NF-κB活性的增加和RANTES的表達(dá)成正比。Liu等[8]對(duì)MMP-9/TIMP的作用及抗-RANTES抗體的干預(yù)作用的研究證實(shí)，RANTES與MMP-9呈正相關(guān)，經(jīng)拮抗RANTES抗體干預(yù)后MMP-9表達(dá)水平顯著減弱，炎癥反應(yīng)活動(dòng)得到明顯控制。因此，RANTES可能通過浸潤(rùn)的單核/巨噬細(xì)胞上調(diào)MMP-9的分泌和增強(qiáng)其活性，冠心病尤其是ACS的發(fā)病中血糖可能通過NF-κB/RANTES/MMP-9信號(hào)途徑發(fā)揮重要作用。

MCP-1是冠心病AS炎癥反應(yīng)特異性細(xì)胞單核/巨噬細(xì)胞的特異性趨化因子，Li等[9]發(fā)現(xiàn)冠心病伴2型糖尿病患者血漿中MCP-1水平明顯升高，且提示MCP-1可能引起糖尿病患者血管損傷的發(fā)生發(fā)展。Sun等[10]發(fā)現(xiàn)MCP-1可能促進(jìn)外周血樹突狀細(xì)胞遷移至AS斑塊并調(diào)節(jié)局部免疫及炎癥反應(yīng)，從而加重冠心病患者斑塊不穩(wěn)定性。魏倩平等[11]的研究證實(shí)高血糖及其糖基化終產(chǎn)物可以引起細(xì)胞內(nèi)絲裂原激活蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）家族成員的激活，而MAPK是細(xì)胞內(nèi)反式作用因子刺激蛋白1（stimulatory protein 1，SP1）上游信號(hào)分子[12]，SP1是一種強(qiáng)有效的核轉(zhuǎn)錄激活因子[13,14]。在MCP-1啟動(dòng)子近端調(diào)控區(qū)上有SP1特異結(jié)合的GC盒，SP1通過與MCP-1基因轉(zhuǎn)錄近端調(diào)控區(qū)的GC盒結(jié)合，激活MCP-1基因的轉(zhuǎn)錄活性。異常升高的MCP-1通過與其特異受體CCR2結(jié)合介導(dǎo)MMP-9等多種因子活化[15]。因此，MCP-1趨化因子可能通過高血糖/MAPK/MCP-1/MMP-9路徑參與冠心病尤其是ACS的發(fā)病。

表2 冠心病各組間RANTES、MCP-1濃度及部分生化指標(biāo)比較

注: SAP: 穩(wěn)定型心絞痛; ACS: 急性冠脈綜合征; MCP-1: 單核細(xì)胞趨化蛋白-1; RANTES: 活化T細(xì)胞趨化因子; FBG: 空腹血糖; LDL-C: 低密度脂蛋白膽固醇; HDL-C: 高密度脂蛋白膽固醇。與正常組比較,*＜0.05; 與SAP比較,#＜0.05

表3 各因素與冠脈病變GS評(píng)分的關(guān)系

注: MCP-1: 單核細(xì)胞趨化蛋白-1; RANTES: 活化T細(xì)胞趨化因子; FBG:空腹血糖; LDL-C: 低密度脂蛋白膽固醇; HDL-C: 高密度脂蛋白膽固醇

總之，糖代謝異常對(duì)冠心病的發(fā)病有重要影響。我們的研究顯示糖調(diào)節(jié)異常與RANTES、MCP-1血濃度密切關(guān)系，二者相互影響、共同參與冠心病尤其是ACS的發(fā)生、發(fā)展。

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（編輯: 胡曉暉）

Correlation of impaired glycoregulation and serum level of RANTES and MCP-1 in patients with coronary heart disease

YANG Lixia*, GUO Ruiwei, SHI Yankun, QI Feng, XU Anfang, YE Jinshan

(Department of Cardiology, Kunming General Hospital, Chengdu Military Command, Kunming 650032, China)

To investigate the changes of blood glucose, regulated upon activation normal T cell expressed and secreted (RANTES), and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in patients with coronary heart disease, and their roles in the incidence of the diseases.A total of 300 patients with coronary heart disease who underwent coronary angiography (CAG) in our department from January to October 2009 were divided into 2 groups, acute coronary syndrome (ACS) group (＝180), and stable angina pectoris (SAP) group (＝120). And other 60 healthy individuals who received CAG during the same period served as control. The severity of coronary lesions was analyzed by CAG and evaluated with Gensini coronary score system. Serum levels of RANTES and MCP-1 were detected with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Oral glucose tolerance test (OGTT) was used to measure the blood glucose except for those with identified diabetes. The correlation of the 3 indexes with coronary lesions was analyzed.There were 70.7% coronary heart disease patients identified with diabetes mellitus or pre-diabetes. Those with identified diabetes had significantly higher levels of RANTES and MCP-1 than those with impaired glycoregulation and normal blood glucose (＜0.05). The correlation analysis showed that blood glucose was positively correlated with serum levels of RANTES and MCP-1(＝0.69,＜0.05;＝0.61,＜0.05). And also their levels were higher in ACS group than in SAP and control groups (＜0.05). Multiple stepwise regression analysis indicated that the stenosis of coronary artery had a positive correlation with RANTES, MCP-1, blood glucose, and low-density liprotein cholesterol respectively, and a negative correlation with high-density liprotein cholesterol.Impaired glycoregulation is positively correlated with RANTES and MCP-1, and they are involved jointly in the incidence and development of coronary heart disease.

RANTES; MCP-1; impaired glycoregulation; coronary heart disease, acute coronary syndrome

R543.3

A

10.3724/SP.J.1264.2013.00052

2012-12-10;

2012-12-10

楊麗霞, Tel: 0871-4774571, E-mail: doctorylixia@yahoo.com.cn