銀杏胞質(zhì)抗壞血酸過氧化物酶基因（APX）克隆及表達特性分析

程華 李琳玲等

摘 要： 【目的】分離和克隆銀杏細胞質(zhì)抗壞血酸過氧化物酶基因GbAPX1 （GenBank 登錄號為 FJ555021），了解其在銀杏正常組織發(fā)育以及響應環(huán)境脅迫和逆境相關(guān)激素誘導的表達情況?！痉椒ā坷猛纯寺〖癛ACE技術(shù)從銀杏葉片細胞質(zhì)中分離得到GbAPX1全長cDNA序列，用生物信息學方法對獲得的cDNA序列及推測的氨基酸序列進行分析，并用實時定量PCR方法研究GbAPX1在不同組織、不同激素和脅迫處理下的表達模式?！窘Y(jié)果】克隆GbAPX1基因全長cDNA序列為965 bp，包含一個759 bp的最大讀碼框，編碼252個氨基酸；預測該基因編碼蛋白質(zhì)分子量為27.6 kDa，其等電點為5.81。系統(tǒng)進化樹分析表明， GbAPX1和其他裸子植物同源性較高并聚為一類。qRT-PCR分析結(jié)果顯示，GbAPX1表達具有組織和發(fā)育時期差異性，在成熟葉片和雄蕊中具有最高表達水平，在莖和嫩葉中表達水平較低。誘導表達分析表明，GbAPX1受到激素和環(huán)境壓力誘導。其中，脫落酸、水楊酸、茉莉酸甲酯和紫外輻射均能誘導其轉(zhuǎn)錄上升，而乙烯利和傷害處理對GbAPX1轉(zhuǎn)錄水平無顯著影響?！窘Y(jié)論】確認獲得序列為GbAPX1基因cDNA序列；GbAPX1不僅參與了銀杏正常的組織生長發(fā)育，還與一些環(huán)境脅迫和逆境相關(guān)激素誘導表達有關(guān)。

關(guān)鍵詞： 銀杏； 胞質(zhì)APX1； 脅迫和激素； 調(diào)控

中圖分類號：S664.3 文獻標志碼：A 文章編號：1009-9980