劉明然 （山東省臨沂市畜牧局動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 276004）

雞大腸桿菌體外耐藥性試驗(yàn)

劉明然 （山東省臨沂市畜牧局動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 276004）

本文就臨沂地區(qū)雞大腸桿菌體外耐藥性情況進(jìn)行了試驗(yàn)，通過(guò)15種常用抗生素的藥敏試驗(yàn)，以質(zhì)控菌ATCC25922為質(zhì)量控制，篩選出臨沂地區(qū)雞大腸桿菌病敏感度較高的藥物是頭孢菌素類(lèi)、阿米卡星、氟苯尼考等，為臨沂地區(qū)雞大腸桿菌病的防治提供了依據(jù)。

大腸桿菌病 耐藥 藥敏試驗(yàn)

隨著臨沂地區(qū)養(yǎng)雞業(yè)的持續(xù)發(fā)展，特別是集約化程度的加深和雞群新品種的增多，雞大腸桿菌病的流行日趨嚴(yán)重，給養(yǎng)殖戶(hù)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1]。實(shí)際生產(chǎn)中對(duì)該病的防治多采用藥物，為了給臨床篩選有效的抗生素提供科學(xué)依據(jù)，避免盲目用藥，本試驗(yàn)對(duì)分離自臨沂地區(qū)的45株雞源致病性大腸桿菌做了體外耐藥性測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 從臨沂地區(qū)疑似大腸桿菌病的病死雞體內(nèi)分離純化，并經(jīng)生化鑒定和病源性測(cè)定的致病性大腸桿菌，篩選出45株進(jìn)行體外耐藥性測(cè)定，編號(hào)為L(zhǎng)Y1-LY45。

1.1.2 儀器和設(shè)備 生化培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、顯微鏡、超凈工作臺(tái)、冰箱、常用玻璃器材等，由臨沂市檢測(cè)中心提供。營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂、SS瓊脂培養(yǎng)基、等培養(yǎng)基，葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖等細(xì)菌微量生化反應(yīng)管，均購(gòu)自上海市醫(yī)學(xué)化驗(yàn)所試劑廠(chǎng)及杭州天和微生物試劑有限公司。藥敏質(zhì)控菌株ATCC25922購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.1.3 藥敏試紙 氨芐青霉素(AMP，氨)、阿莫西林(AMX，阿)、諾氟沙星(NOR，諾)、氧氟沙星(OFL，氧)、環(huán)丙沙星(CIP，環(huán))、阿米卡星(AMK，阿)、慶大霉素(GM，慶)、卡那霉素(KM，卡)、鏈霉素(SM，鏈)、新霉素(NM，新)、氟苯尼考(FLO，氟)、氯霉素(CMP，氯)、頭孢拉啶(CED，拉啶)、頭孢唑啉(CFZ，唑啉)、頭孢噻肟(FTX，噻肟)均購(gòu)于杭州天和微生物試劑有限公司。

1.2 方法

無(wú)菌條件下，將大腸桿菌分別劃線(xiàn)接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，37℃培養(yǎng)18h后，挑取單菌于0.85%生理鹽水中，震蕩混勻后與麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)比濁管比濁，使接種菌液濃度為1×109個(gè)/ml。用滅菌的涂布器蘸取菌液后涂布整個(gè)培養(yǎng)基表面，反復(fù)數(shù)次，每次將平板旋轉(zhuǎn)60度，最后沿平皿周邊繞兩圈，保證涂布均勻。待平板上的水分被瓊脂完全吸收后開(kāi)始貼紙片。用尖嘴鑷子將藥敏紙片平放于平板上，并輕壓使其緊貼在平板表面，藥敏紙片一經(jīng)放置不要移動(dòng)，兩紙片中心相距不少于24mm，紙片與平皿邊緣不少于15mm[2]。藥敏試驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。

表1 每片含藥量判定標(biāo)準(zhǔn)-抑菌圈直徑 (mm)

2 結(jié)果

具體結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 45株雞大腸桿菌對(duì)15種藥敏試驗(yàn)結(jié)果

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從表中可以看出，臨沂地區(qū)雞大腸桿菌敏感度較高的藥物是頭孢噻肟、頭孢唑啉、頭孢拉啶、氟苯尼考和阿米卡星，中度敏感的有慶大霉素、氧氟沙星、卡那霉素和諾氟沙星，而氨芐青霉素、阿莫西林、氯霉素、環(huán)丙沙星、鏈霉素、新霉素、敏感度較低。

3 討論

通過(guò)15種常用抗生素的藥敏試驗(yàn)，以質(zhì)控菌ATCC25922為質(zhì)量控制，篩選出臨沂地區(qū)大腸桿菌病敏感度較高的藥物是頭孢菌素類(lèi)、阿米卡星、氟苯尼考等，其中以頭孢類(lèi)藥物敏感度最高。阿米卡星與氟苯尼考敏感度較相關(guān)報(bào)道有明顯下降[3-7]，尤其是氟苯尼考，作為一種氯霉素類(lèi)的獸用廣譜抗菌藥，抗菌活性高于氯霉素及甲颯霉素，尤其對(duì)一些耐氯霉素及甲諷霉素的細(xì)菌仍然表現(xiàn)出較高的抗菌活性，因此，在動(dòng)物的疾病防治上尤其是食品動(dòng)物，具有廣闊的應(yīng)用前景[8]。但在此次藥敏試驗(yàn)中，氟苯尼考敏感率僅為64.4%，遠(yuǎn)低于頭孢類(lèi)藥物，臨沂地區(qū)的雞養(yǎng)殖場(chǎng)戶(hù)在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)高度重視，盡量降低對(duì)氟苯尼考的使用，避免因藥物耐藥而失去最佳治療時(shí)間，造成經(jīng)濟(jì)損失。

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2013–03–22）