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      培養(yǎng)基加溫溶解次數(shù)對(duì)醫(yī)院制劑微生物檢測(cè)結(jié)果的影響分析

      2013-07-01 19:54:38
      中國(guó)醫(yī)藥指南 2013年11期
      關(guān)鍵詞:念珠菌中成藥金黃色

      王 琦

      (南陽(yáng)市第一人民醫(yī)院,河南 南陽(yáng)473000)

      培養(yǎng)基加溫溶解次數(shù)對(duì)醫(yī)院制劑微生物檢測(cè)結(jié)果的影響分析

      王 琦

      (南陽(yáng)市第一人民醫(yī)院,河南 南陽(yáng)473000)

      目的探討培養(yǎng)基加溫溶解次數(shù)對(duì)醫(yī)院制劑微生物檢測(cè)結(jié)果的影響。方法選擇玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、青枯菌半選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行金黃色葡萄球菌和白色念珠菌培養(yǎng),培養(yǎng)基分別溶解3次。結(jié)果隨著溶解次數(shù)的增加,培養(yǎng)基上的金黃色葡萄球菌與白色念珠菌數(shù)都呈下降趨勢(shì),不過(guò)對(duì)比差異不明顯。隨著溶解次數(shù)的增加,培養(yǎng)基上的pH值呈現(xiàn)明顯下降趨勢(shì),對(duì)比差異明顯(P<0.05)。結(jié)論培養(yǎng)基加溫溶解次數(shù)能影響醫(yī)院中成藥制劑的微生物檢測(cè)數(shù)與pH值,要盡量減少溶解次數(shù),保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

      培養(yǎng)基;加溫溶解次數(shù);藥劑;微生物

      在當(dāng)前醫(yī)療環(huán)境下,醫(yī)藥中成藥制劑質(zhì)量直接關(guān)系到用藥者的安全和療效[1]。而微生物限度檢查在中成藥制劑質(zhì)量控制方面起著重要的質(zhì)量評(píng)估作用,其準(zhǔn)確與否直接關(guān)系到患者用藥的安全性和有效性[2]。但是在檢測(cè)過(guò)程中,很多含瓊脂類培養(yǎng)基的多次加溫溶解,造成培養(yǎng)基內(nèi)的成分被破壞和丟失,導(dǎo)致微生物檢測(cè)的不準(zhǔn)確[3,4]。本文為此具體探討了培養(yǎng)基加溫溶解次數(shù)對(duì)醫(yī)院中成藥制劑微生物檢測(cè)結(jié)果的影響,現(xiàn)報(bào)道如下。

      1 材料與方法

      1.1 儀器與試藥

      玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、青枯菌半選擇性培養(yǎng)基、金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、白色念珠菌[CMCC(B)44102]均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。無(wú)菌磷酸鹽緩沖液(pH 7.2)購(gòu)自北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司。培養(yǎng)皿、吸管均按2005年版《中國(guó)藥典》要求合理清洗、消毒與高壓滅菌。

      1.2 方法

      1.2.1 菌檢率分析

      將金黃色葡萄球菌、白色念珠菌分別按2005年版《中國(guó)藥典》要求配制成100個(gè)/mL的供試菌液。另將已配制好的玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基和青枯菌半選擇性培養(yǎng)基溶解,冷至約45℃后各取25mL分別對(duì)應(yīng)傾注在2個(gè)培養(yǎng)皿中,35℃培養(yǎng)48h和25℃培養(yǎng)72h后行計(jì)數(shù)。從培養(yǎng)基冷卻到加溫溶解循環(huán)3次,并記錄每次菌落數(shù)的變化。

      1.2.2 pH值考察

      取10%葡萄糖溶液300mL于三角燒瓶中,置水浴上加溫,沸后冷卻至室溫,測(cè)定其pH值。并將從葡萄糖冷卻到加溫至沸循3次,記錄各次的pH值變化。

      1.3 統(tǒng)計(jì)分析

      使用SPSS19.0數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行分析,菌數(shù)與pH值數(shù)對(duì)比采用卡方對(duì)比檢驗(yàn),P<0.05代表有顯著性差異。

      2 結(jié) 果

      2.1 細(xì)菌生長(zhǎng)數(shù)的變化

      經(jīng)過(guò)觀察,隨著溶解次數(shù)的增加,培養(yǎng)基上的金黃色葡萄球菌與白色念珠菌數(shù)都呈下降趨勢(shì),不過(guò)對(duì)比差異不明顯。見(jiàn)表1。

      表1 不同加溫溶解次數(shù)對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)數(shù)的影響結(jié)果

      2.2 pH值的變化

      經(jīng)過(guò)觀察,隨著溶解次數(shù)的增加,培養(yǎng)基上的pH值呈現(xiàn)明顯下降趨勢(shì),對(duì)比差異明顯(P<0.05)。見(jiàn)表2。

      表2 不同加溫溶解次數(shù)對(duì)pH值的影響結(jié)果

      3 討 論

      當(dāng)前中成藥確切的臨床療效和較低廉的價(jià)格越來(lái)越得到認(rèn)可,使用的人群越來(lái)越多,但伴隨而來(lái)中成藥的安全性比以往則更需要引起重視[5]。中成藥安全性問(wèn)題究其來(lái)源是多方面的,主要與中成藥本身特性和藥品受細(xì)菌污染程度等相關(guān)。中成藥細(xì)菌數(shù)測(cè)定是微生物的定量檢查,是用來(lái)判斷藥品被細(xì)菌污染程度和衛(wèi)生質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo),也是檢測(cè)中藥藥品質(zhì)量的指標(biāo)之一。在檢測(cè)方法中,培養(yǎng)基稀釋法是利用擴(kuò)大培養(yǎng)基的使用量或增加樣品的稀釋倍數(shù),減少單位體積供試品的量,以達(dá)到降低供試品抑菌作用的目的。培養(yǎng)基稀釋法操作也較簡(jiǎn)便,所需時(shí)間短,尤其適用于中成藥的微生物種類[6]。

      但是在培養(yǎng)基檢測(cè)方法中,其加溫溶解次數(shù)過(guò)多將造成檢測(cè)的誤差。有調(diào)查顯示,10%葡萄糖溶液經(jīng)過(guò)1~6次加溫,溶液逐漸濃縮,pH值會(huì)明顯下降。而微生物也是一個(gè)生命體,在反復(fù)多次的加溫中,大量的礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)和水分都被破壞和丟失,在這樣一個(gè)沒(méi)有充足營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基中微生物不能生長(zhǎng)繁殖[1]。經(jīng)過(guò)觀察,隨著溶解次數(shù)的增加,培養(yǎng)基上的金黃色葡萄球菌與白色念珠菌數(shù)都呈下降趨勢(shì),不過(guò)對(duì)比差異不明顯。為此培養(yǎng)基的溶解數(shù)次不得>3次,否則微生物限度檢查雖進(jìn)行了培養(yǎng),但很難檢查出樣品中的菌量數(shù)。pH值是微生物檢測(cè)的重要影響因素,不同的檢測(cè)樣品具有不同的pH值,如果忽略pH值對(duì)反應(yīng)的影響,必然會(huì)使檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生偏差。本文經(jīng)過(guò)觀察,隨著溶解次數(shù)的增加,培養(yǎng)基上的pH值呈現(xiàn)明顯下降趨勢(shì),對(duì)比差異明顯(P<0.05)。在預(yù)防中,首先要嚴(yán)格熱水定容原則,溶解后都要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行熱水定容,預(yù)防營(yíng)養(yǎng)成分濃度不均。其次要檢測(cè)pH值的變化,確保pH值的穩(wěn)定性。

      總之,培養(yǎng)基加溫溶解次數(shù)能影響醫(yī)院中成藥制劑的微生物檢測(cè)數(shù)與pH值,要盡量減少溶解次數(shù),保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

      [1] 王琳琳,丁安偉,耿徑軍.藥品微生物學(xué)檢查方法學(xué)驗(yàn)證執(zhí)行現(xiàn)狀[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007,26(5):569-571.

      [2] Malekazadeh HE,Hsasnifar M,Shahamat,Antibacterial activity of black mymbalan(Terminalia chebula Retz)against Helicobacter pylori[J].Int J Antimicr Agents,2010,8(10):85-88.

      [3] 馬文漪,楊柳燕.環(huán)境微生物工程.南京:南京大學(xué)出版社,2008: 45-47.

      [4] 舒柏華,趙志耀,徐順清,等.利用生物發(fā)光分析技術(shù)快速檢測(cè)微生物的方法學(xué)研究[J].發(fā)光學(xué)報(bào),2009,20(1):77-80.

      [5] 中國(guó)藥品生物制品檢定所.中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2005:45-47.

      [6] 張崇生,申遂揚(yáng).加味藿香正氣丸的微生物限度的檢查[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007,26(1):76-77.

      R37

      B

      1671-8194(2013)11-0071-02

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