趙璐　張培培　杜康

摘 要：文章使用超臨界CO₂萃取技術(shù)對蜂膠進行提取，將得到的蜂膠提取物加入護膚霜中制成蜂膠護膚霜，該護膚霜有較好的美容功效。

關(guān)鍵詞：超臨界CO₂萃取；蜂膠；護膚霜

中圖書分類號：S896.6 文獻標識碼：A 文章編號：1006-8937（2012）32-0175-02

蜂膠是蜜蜂從植物樹皮、枝條和嫩芽上采集的樹脂狀分泌物，混入其上顎腺分泌物和蜂蠟等加工咀嚼而成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物。享有“黃酮寶庫”和“紫色黃金”的美譽。蜂膠呈棕黃色、棕褐色，有時略帶青綠色，少數(shù)黑褐色，有光澤。常溫下呈不透明團塊或碎片狀，20℃以下有脆性，30℃逐漸變軟，有粘性。蜂膠不溶于水，易溶于乙醚、丙酮、氯仿、乙醇等。

蜂膠的化學(xué)成分極為復(fù)雜，大約有三百多種天然成份。其中包括三十多種人體必需的微量元素，二十種氨基酸，數(shù)十種芳香族化合物，大量的黃酮類物質(zhì)，維生素、木脂體、酶類、多糖等具有生物活性的天然成份。近年來的研究表明，蜂膠的生物學(xué)、藥理學(xué)及醫(yī)療功效主要與蜂膠中所含黃酮的種類和數(shù)量有關(guān)。蜂膠中已分離鑒定的黃酮類物質(zhì)，其數(shù)量之多是目前我們研究的任何一種中草藥所不及的。隨著生活水平的提高，消費觀念不斷更新，人們對含有天然活性成分的蜂膠越來越重視。蜂膠已成為當前國內(nèi)外日化品以及美容保健食品開發(fā)研究的一個熱點。我國是世界第一蜂膠生產(chǎn)大國，目前由國家食品藥品監(jiān)督管理局批準的蜂膠保健食品已經(jīng)有50多個。此外，蜂膠在國內(nèi)外已被開發(fā)成系列產(chǎn)品，醫(yī)藥產(chǎn)品如潤喉片、口服液、片劑、酊劑、止咳劑、潔口劑，生活日用產(chǎn)品如蜂膠牙膏、蜂膠護發(fā)香波、蜂膠沐浴露、蜂膠洗面奶、蜂膠洗手液、蜂膠香皂、防曬膏等等。

目前市場上的蜂膠產(chǎn)品，能見到的幾乎全是黑色或赤褐色的液體或膠囊，這是由于蜂膠原膠在使用乙醇為提取劑時生成了一種多酚咖啡酸聚合物。同時乙醇的殘留，使得消費者在使用蜂膠產(chǎn)品時增加了過敏的可能性。普通蜂膠提取方法存在生產(chǎn)周期長等缺陷，為了尋找更科學(xué)更先進的蜂膠提取工藝，提高蜂膠有效成分的提取率，超臨界CO₂萃取技術(shù)越來越受到人們的關(guān)注。本文使用超臨界CO₂萃取技術(shù)對蜂膠進行提取，并進行后續(xù)實驗制成蜂膠護膚霜。

1 材料與儀器

1.1 材 料

蜂膠（揚大實驗蜂場）、蘆丁標準品（北京化學(xué)試劑公司）、95%乙醇、硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、十六醇、白油、鯨蠟醇、硬脂醇、丙二醇、三乙醇胺、甘油、橄欖油、甘油硬脂酸單脂、氫氧化鈉、氫氧化鉀、香精（玫瑰、檸檬），以上試劑均為分析純；防腐劑（尼泊金丙酯，自制）、蒸餾水、精密pH試紙。

1.2 儀 器

SFE 500 超臨界流體萃取系統(tǒng)（Thar Technologies公司）；高速萬能粉碎機（北京中西遠大科技有限公司）；紫外可見分光光度計、電動攪拌器、溫度計、電子天平、電爐、水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。

2 實驗方法

2.1 蜂膠提純

從蜂箱里采集的粗蜂膠中往往混雜著樹脂和膠狀物質(zhì)、蜂蠟和花粉夾雜物等多種物質(zhì)。而蜂蠟會微溶于乙醇，影響蜂膠中黃酮類化合物的提取和質(zhì)量控制，并且不被人體吸收，故應(yīng)先去除蜂蠟。

將粗蜂膠冷凍，粉碎，稱取10 g放入盛有水的燒杯中（水大約250 ml左右），70℃水浴加熱，不斷攪拌，使蜂蠟析出。當沒有雜質(zhì)再從燒杯底部浮上水面時，停止加熱。用濾紙濾去上層液，再加入70 ml乙醇，放置攪拌。當膠狀物全部溶解時，停止攪拌。減壓抽濾，將濾液進行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將剩余溶液（除蠟蜂膠）低溫冷凍過夜，得棕褐色固體。再次粉碎，晾干，備用。

2.2 超臨界CO₂萃取蜂膠

超臨界流體萃取是近十幾年來迅速發(fā)展起來的一項新技術(shù)。超臨界流體，是介于氣液之間的一種既非氣態(tài)又非液態(tài)的物態(tài)，這種物質(zhì)只能在其溫度和壓力超過臨界點時才能存在。超臨界流體的密度較大，與液體相仿，而它的粘度又較接近于氣體。因此超臨界流體是一種十分理想的萃取劑。CO₂氣體的臨界溫度和臨界壓力低（31.06℃，7.39 MPa），而且無色、無味、無毒、價格便宜、易提純，因而成為應(yīng)用最為廣泛的超臨界流體。傳統(tǒng)的蜂膠萃取技術(shù)，需高溫將提取液中乙醇蒸發(fā)，濃縮過程中萜烯類等揮發(fā)油損失很大，活性成分遭到破壞；將超臨界流體萃取技術(shù)用于蜂膠萃取，則避免了這些情況。

將所得除蠟蜂膠用紗布包好，放入萃取釜中。開啟超臨界CO₂萃取裝置，將CO₂加壓、加溫。設(shè)定試驗條件：萃取溫度恒定為60℃，選取萃取壓力為25 MPa，乙醇濃度95%，固液比6：1，萃取時間為4 h，流體流速35 kg/h。萃取結(jié)束后收集蜂膠提取液。

2.3 黃酮含量的測定（蘆丁法）

參照文獻方法，根據(jù)吸光度值、稀釋度和標準曲線得出樣品中黃酮的含量。

2.4 護膚霜的制備

護膚霜是白色膏狀乳劑類化妝品。乳劑是指一種液體以極細小的液滴分散于另一種互不相溶的液體中所形成的多相分散體系。護膚霜通常是以硬脂酸皂為乳化劑的水包油型乳化體系。水相中含有多元醇等水溶性物質(zhì)，油相中含有脂肪酸、長鏈脂肪酸、多元酸等非水溶性物質(zhì)。當護膚霜被涂于皮膚上，水分揮發(fā)后，吸水性的多元醇與油性組分共同形成一個控制表皮水分過快蒸發(fā)的保護膜，它隔離了皮膚與空氣的接觸，避免皮膚在干燥環(huán)境中由于表皮水分過快蒸發(fā)導(dǎo)致的皮膚干裂。也可以在配方中加入一些可被皮膚吸收的營養(yǎng)物質(zhì)。

蜂膠無毒、安全、緩穩(wěn)、長效，可長期每天使用，能收到養(yǎng)顏護肽的最佳效果。我們在護膚霜中加入由超臨界CO₂萃取所得到的蜂膠提取物，以提高護膚霜的美容功效。

2.4.1 配方的確定

所得到的蜂膠護膚霜配方成分及加入量如表1所示。

2.4.2 配 制

按配方一中的量分別稱量硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、白油、十六醇和丙二醇，將稱量好的原料加入250 ml燒杯中，水和堿稱量后加入另一250 ml燒杯中。分別加熱至90℃，使物料熔化、溶解均勻。再緩慢加入蜂膠提取物，調(diào)節(jié)電動攪拌器攪拌均勻。裝水的燒杯在90℃下保持20 min滅菌。然后在攪拌下將水慢慢加入到油相中，繼續(xù)攪拌，當溫度降至50℃時，加入自制防腐劑尼泊金丙酯。降溫至40℃后，加入香精，攪拌均勻。靜置、冷卻至室溫。調(diào)整膏體的pH，使其在要求的范圍內(nèi)。

將配制好的蜂膠護膚霜靜置72 h，沒有分層和變色情況發(fā)生。

3 結(jié) 語

我國輕工業(yè)部護膚霜的標準要求理化指標要求包括：膏體耐熱穩(wěn)定性，微堿性pH≤8.5，微酸性pH4.0～7.0；感官要求包括：色澤、香氣和膏體結(jié)構(gòu)（細膩，擦在皮膚上應(yīng)潤滑、無面條狀、無刺激）。按照表1中配方配制的護膚霜經(jīng)試用后完全符合行業(yè)要求，配方中添加了超臨界CO₂萃取法所得到的蜂膠提取液以提高美容功效。我們以蘆丁為對照品，采用分光光度計法測定了該蜂膠提取物中的總黃酮含量，經(jīng)計算得到總黃酮提取率為17.2%。黃酮類物質(zhì)具有很好的抗氧化作用，能穩(wěn)定和清除自由基，減少脂質(zhì)過氧化物和脂褐素的產(chǎn)生與沉積，保護細胞膜，增強細胞活力。這類成分有很好的抗衰防老、降血脂、預(yù)防動脈粥樣硬化、治療慢性前列腺炎、抗癌抗腫瘤、增強免疫力等效果，醫(yī)療保健和美容功效顯著。我國蜂膠資源豐富、價格相對較低，隨著蜂產(chǎn)品深加工技術(shù)的開發(fā)利用，蜂膠的研究、開發(fā)和應(yīng)用必將會有更廣闊的前景。

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