抗核糖體P蛋白抗體與系統(tǒng)性紅斑狼瘡狼瘡性腎炎的臨床研究

王關(guān)允，李寶全，鞏 路

（天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院感染免疫科，天津300052）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種表現(xiàn)有多系統(tǒng)損害的慢性系統(tǒng)性自身免疫病，其血清抗體具有以抗核抗體為代表的多種自身抗體。由于本病具有緩解和急性發(fā)作相交替的特點，系統(tǒng)性損害明顯，腎臟損害多見，達(dá)75%以上，也是SLE患者死亡的重要原因之一。因此，研究血清抗體與狼瘡性腎炎（lupus nephritis，LN）的關(guān)系對于判斷是否有SLE腎臟損害具有重要意義。已經(jīng)有研究報道抗核糖體P蛋白抗體與LN有一定的聯(lián)系，但也有研究報道二者無關(guān)，關(guān)于抗核糖體P蛋白抗體與LN的關(guān)系目前尚存在爭議。本文對抗核糖體P蛋白抗體與LN、抗核糖體P蛋白抗體與SLE腎炎病理分型進(jìn)行了臨床研究。

1 資料和方法

1.1 一般資料 收集2011年7月-2012年4月在我院住院并進(jìn)行腎活檢的60例SLE患者及相關(guān)的臨床資料，其中女性54例，男性6例；年齡16～60歲，平均（34±12）歲。所有病人均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會1982年修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)。LN病理分型采用2003年國際腎臟病協(xié)會及腎臟病理學(xué)會工作組關(guān)于狼瘡病理分型標(biāo)準(zhǔn)。活動性腎炎的標(biāo)準(zhǔn)（至少滿足下列條件中的其中1個）：持續(xù)性蛋白尿≥0.5g/24 h；存在細(xì)胞管型；血肌酐>140 μmol/L；尿相差鏡檢紅細(xì)胞>10個/hpf，白細(xì)胞>5個/hpf（排除感染和腎結(jié)石等其它因素）。

1.2 抗體的檢測方法

1.2.1 抗核糖體P蛋白抗體檢測 采用免疫沉淀的原理進(jìn)行檢測：分離患者血清，以小牛胸腺提取物作為抗核糖體P蛋白抗體的抗原，用Ouchterlony雙向擴(kuò)散法定量檢測后，再用抗核糖體P蛋白抗體的單克隆抗體進(jìn)行驗證。對于不能沉淀的抗核糖體P蛋白抗體則用ELISA進(jìn)行定量檢測。

1.2.2 抗DsDNA抗體的檢測 ELISA定性檢測，試劑盒購自美國Trinity Biotech有限公司,酶標(biāo)儀(型號 ELX-800，Bio-tek Instruments有限公司產(chǎn)品)，試驗嚴(yán)格按操作說明書進(jìn)行。

1.2.3 抗SM抗體的檢測 采用德國歐蒙斑點法測定血清抗SM抗體,操作方法按試劑盒（德國歐蒙醫(yī)學(xué)實驗診斷有限公司）說明書進(jìn)行。

1.2.4 抗體的檢測工作由天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院檢驗科完成。

1.3 分組 將患者分為抗核糖體P蛋白抗體陽性組與陰性組，分析其與狼瘡性腎炎臨床指標(biāo)及病理分型之間的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 率的比較采用χ2檢驗。采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，所有結(jié)果P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清學(xué)抗體與LN的關(guān)系 抗Ds-DNA抗體和抗核糖體P蛋白抗體均分別與LN相關(guān)，抗SM抗體與LN無關(guān)（P>0.05）。見表1?？购颂求wP蛋白抗體與抗DsDNA抗體協(xié)同時與LN相關(guān)（P<0.05）。見表2。

表1 血清學(xué)抗體與LN的關(guān)系Tab 1 The associations between antibodies in sero and LN

表2 抗DsDNA抗體和抗核糖體P蛋白抗體與LN的關(guān)系Tab 2 The associations of anti-DsDNA antibodies and antiribosomal P proteins antibodies and LN

2.2 抗核糖體P蛋白抗體與LN病理分型的關(guān)系 抗核糖體P蛋白抗體陽性組與抗核糖體P蛋白抗體陰性組相比較，Ⅴ型LN在抗核糖體P蛋白抗體陽性組有更高的發(fā)生頻率（分別為75.0%和32.5%），差別具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

表3 LN病理分型與抗核糖體P蛋白抗體的關(guān)系[n(%)]Tab 3 The associations of pathology of LN and anti-ribosomal P proteins antibodies[n(%)]

3 討論

3.1 抗核糖體P蛋白抗體是抗核抗體的一種，主要由38 ku、16.5 ku、15 ku 3條蛋白多肽鏈組成，它的水平可反映SLE活動情況。曾經(jīng)有研究報道抗核糖體P蛋白抗體陽性組SLE患者比抗核糖體蛋白抗體陰性組SLE患者腎炎的發(fā)生率更高[1]，且一個前瞻性研究報道抗核糖體P蛋白抗體與LN活動相關(guān)[2]。然而，有研究發(fā)現(xiàn)抗核糖體P蛋白抗體和LN之間無聯(lián)系[3-6]，其中有研究報道：單獨的抗核糖體P蛋白抗體和LN無關(guān)，但抗核糖體P蛋白抗體和抗DsDNA抗體協(xié)同后則與LN相關(guān)[5]。我們的研究發(fā)現(xiàn)抗核糖體P蛋白抗體和抗DsDNA抗體均分別與LN的活動相關(guān)（表1），抗SM抗體與LN活動無關(guān)，并且當(dāng)抗核糖體P蛋白抗體與抗DsDNA抗體協(xié)同后，也與LN的活動相關(guān)，即在抗DsDNA抗體陽性時，抗核糖體P蛋白抗體陽性組與陰性組之間LN的發(fā)生率存在差異，具有統(tǒng)計學(xué)意義（表3），這與先前的報道一致[1,5]，抗核糖體P蛋白抗體和抗DsDNA抗體均陽性時發(fā)生腎炎的可能性較大，這對臨床醫(yī)生判斷SLE患者是否發(fā)生腎性損害有重要的臨床意義。另有研究報道血清BLYS抗U1RNP[7]抗體等亦與SLE活動性和腎損害相關(guān)，將來的研究可聯(lián)合多種抗體來評價是否有SLE活動及腎損害。

3.2 最近有研究報道，抗核糖體P蛋白抗體和Ⅴ型LN，尤其與膜性腎病相關(guān)[8]；但另有文章報道，抗核糖體P蛋白抗體與LN無關(guān)[9]。筆者的結(jié)果是：在抗核糖體P蛋白抗體陽性組病人中，Ⅴ型腎炎所占的比例達(dá)到75%，而在抗核糖體P蛋白抗體陰性組病人中，Ⅴ型腎炎所占比例僅為32.5%，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），前者，抗核糖體P蛋白抗體與LN相關(guān)，也支持抗核糖體P蛋白抗體與LN病理分型之間的關(guān)系，這對臨床工作中不宜行腎臟活檢或拒絕行腎臟活檢的病人具有重要的意義?？笵sDNA抗體與LN活動亦有一定的關(guān)系，但抗DsDNA抗體在SLE的致病機(jī)制不清楚，所以抗DsDNA抗體是否與LN的病理分型有關(guān)不能確定，因此抗DsDNA抗體的混雜作用不能排除，并且有研究報道抗核糖體P蛋白抗體與抗DsDNA抗體及抗心磷脂抗體等許多抗體存在交叉反應(yīng)[10]。

綜上所述，抗核糖體P蛋白抗體和活動性LN存在一定的聯(lián)系，抗核糖體P蛋白抗體與Ⅴ型LN存在一定關(guān)系，這對臨床醫(yī)生判讀是否有腎炎活動及可能的病理類型具有一定的指導(dǎo)意義，但本文為回顧性研究，病例數(shù)相對較少，仍需進(jìn)一步探討。

［1］Chindalore V,Neas B,Reichlin M.The association between antiribosomal P antibodies and active nephritis in systemic lupus erythematosus[J].Clin Immunol Immunopathol,1998,87（3）:292

［2］Martin A L,Reichlin M.Fluctuations of antibody to ribosomal P proteins correlate with appearance and remission of nephritis in SLE[J].Lupus,1996,5（1）:22

［3］Massardo L,Burgos P,Martínez M E,et al.Antiribosomal P protein antibodies in Chilean SLE patients:no association with renal disease[J].Lupus,2002,11（6）:379

［4］Chandran V,Upadhyaya S K,Haroon N,et al.Lack of clinical association with antibodies to ribosomal P proteins in Indian patients with systemic lupus erythematosus[J].J Rheumatol,2006,33（10）:1987

［5］Quintana G,Coral-Alvarado P,Aroca G,et al.Single anti-P ribosomal antibodies are not associated with lupus nephritis in patients suffering from active systemic lupus erythematosus[J].Autoimmun Rev,2010,9（11）:750

［6］楊念生，崔淑杰，陳雄輝，等.抗核糖體P蛋白抗體與LN的臨床表現(xiàn)和血清學(xué)的關(guān)系[J].新醫(yī)學(xué)，1998，29（10）:512

［7］常曉萍，陳宏.抗U1RNP抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病中的臨床意義[J].天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2008，14（4）:481

［8］do Nascimento A P,Viana Vdos S,Testagrossa Lde A,et al.Antibodies to ribosomal P proteins:a potential serologic marker for lupus membranous glomerulonephritis[J].Arthritis Rheum,2006,54（5）:1568

［9］Bertolaccini M L,Murru V,Alba P,et al.Lack of association of antibodies to ribosomal P proteins with lupus membranous glomerulonephritis:comment on the article by Do Nascimento et al[J].Arthritis Rheum,2006,54（12）:4025

［10］Caponi L,Anzilotti C,Longombardo G,et al.Antibodies directed against ribosomal P proteins cross-react with phospholipids[J].Clin Exp Immunol,2007,150（1）:140