腹瀉康片抗炎鎮(zhèn)痛作用研究＊

唐 帆 南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院（衡陽(yáng)421001）

腹瀉康片處方由秦皮、木香等四味藥材組成，源自臨床應(yīng)用多年的方劑，對(duì)感染性腹瀉有很好的治療效果，具有清熱燥濕，行氣止痛，澀腸止瀉之功效。主要用于感染性腹瀉，癥見瀉下急迫或?yàn)a下不爽，大便色黃穢臭，肛門灼熱。我們對(duì)腹瀉康片藥效學(xué)進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，現(xiàn)將腹瀉康片對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果報(bào)道如下。

1材 料 1.1 藥品與試劑 腹瀉康片干膏粉（自制）；腸康片（張家界元爾藥業(yè)有限公司，20100802）；冰醋酸（湖南匯虹試劑有限公司，20100831）；新鮮雞蛋清。

1.2 動(dòng)物 昆明小鼠（體重20～22g），雌雄不限；SD 大鼠（體重200～240g），雌雄各半；由中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供，動(dòng)物許可證號(hào)：scxk（湘）2006－0002。

1.3 儀器 RB－200 智能熱板儀（成都泰盟科技有限公司）；PV－200足趾容積測(cè)定儀（成都泰盟科技有限公司）。

2 方 法 2.1 醋酸致扭體實(shí)驗(yàn)［1］取SPF級(jí)昆明種小鼠50只先按性別分層，隨機(jī)分成5組：模型對(duì)照組、腸康片組（0.62g成藥／kg）、腹瀉康片低（2.16g生藥／kg）、中（4.32g生藥／kg）、高劑量（8.64g生藥／kg）組，每組小鼠10只。實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水24h，各治療組分別灌胃給相應(yīng)藥物，模型組對(duì)照組灌胃同體積蒸餾水，每天1次，連續(xù)3d，末次給藥后1h，各組分別腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml／只，觀察記錄小鼠注射冰醋酸溶液后20min內(nèi)扭體反應(yīng)（腹部收縮內(nèi)凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行）的次數(shù)和時(shí)間。

鎮(zhèn)痛率＝（模型對(duì)照組平均扭體次數(shù)－給藥組平均扭體次數(shù)）／模型對(duì)照組平均扭體次數(shù)×100%

2.2 板法致痛實(shí)驗(yàn)［4］取SPF級(jí)昆明種小鼠50只先按性別分層，隨機(jī)分成5組：模型對(duì)照組、腸康片組（0.62g成藥／kg）、腹瀉康片低（2.16g生藥／kg）、中（4.32g生藥／kg）、高劑量（8.64g生藥／kg）組，每組小鼠10只。實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水12h，給藥前先測(cè)定各鼠的正常痛反應(yīng)（放入55±0.5℃熱板至小鼠舔后足時(shí)間，若在5～30s內(nèi)不舔后爪者棄置不用）。各治療組分別灌胃相應(yīng)藥物，空白對(duì)照組灌胃同體積蒸餾水，給藥2次，間隔4h，第2次給藥后30min、60min分別測(cè)小鼠痛閾值。

2.3 雞蛋清誘導(dǎo)的大鼠足趾腫脹的影響 取SPF 級(jí)SD大鼠50只先按性別分層，隨機(jī)分成5組：模型對(duì)照組、腸康片組（0.27g成藥／kg）、腹瀉康片低（0.94g 生藥／kg）、中（1.88g生藥／kg）、高劑量（3.76g生藥／kg）組，每組大鼠10只。實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食不禁水16h，各治療組分別給予相應(yīng)濃度藥物灌胃3d，每天1次，空白對(duì)照組灌胃同體積蒸餾水，第3次給藥后每鼠左后腳爪正面踝關(guān)節(jié)上端腿毛盡處用油性記號(hào)筆做一清晰的橫線，測(cè)定足趾體積，給藥1h后每鼠左后爪趾皮下注射0.1mL雞蛋清，然后于0.5h、1h、2h、3h、4h、5h各測(cè)量足趾體積1次，計(jì)算足趾腫脹率。

腫脹率＝（致炎后足趾體積－致炎前足趾體積）／致炎前足趾體積×100%

3 結(jié) 果 3.1 腹瀉康片對(duì)醋酸致扭體實(shí)驗(yàn)的影響 腹瀉康片低劑量組、中劑量組、高劑量組和腸康片組與模型組比較，疼痛潛伏時(shí)間明顯延長(zhǎng)，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；扭體次數(shù)明顯減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；腹瀉康片高劑量組與腸康片組比較，疼痛潛伏時(shí)間明顯延長(zhǎng)，扭體次數(shù)明顯減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。腹瀉康片中劑量組與腸康片組比較，扭體次數(shù)明顯減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。腹瀉康片中劑量組、高劑量組鎮(zhèn)痛率均大于50%，提示均具有鎮(zhèn)痛作用，見表1。

3.2 腹瀉康片對(duì)小鼠熱板致痛的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，給藥后，腹瀉康片低、中、高劑量組與給藥前比較，痛閾值明顯增加，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。給藥30min后腹瀉康片高劑組痛閾值明顯高于空白組和腸康片組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。給藥60min后，腹瀉康片高劑組痛閾值明顯高于空白組和腸康片組，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見表2。

3.3 腹瀉康片對(duì)雞蛋清誘導(dǎo)的大鼠足趾腫脹的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，腹瀉康片低、中、高劑量組在4h內(nèi)與模型組比較，腫脹率明顯降低，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；腹瀉康片高劑量組腫脹率在0.5h、1h、2h明顯低于腸康片組，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），3h差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；腹瀉康片中劑量組腫脹率在0.5h、1h、2h、3h低于腸康片組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），腹瀉康片低劑量組腫脹率在0.5h、1h低于腸康片組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。腹瀉康中、高劑量組在5h仍具有抗炎作用（P＜0.05；P＜0.01），見表3。

表1 腹瀉康片對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體疼痛的影響（±s）

表1 腹瀉康片對(duì)冰醋酸所致小鼠扭體疼痛的影響（±s）

注：與模型對(duì)照組比較△P＜0.01；與腸康片組比較▲P＜0.01

組 別疼痛潛伏時(shí)間（min）扭體次數(shù)（次）鎮(zhèn)痛率（%）模型組3.05±0.74 51.0±6.2—腸康片組6.40±0.64△31.5±3.4△38.24腹瀉康低劑量組 6.00±1.23△30.9±2.5△39.41腹瀉康中劑量組 7.11±0.80△ 21.3±2.1△▲ 58.24腹瀉康高劑量組 7.78±1.06△▲ 20.7±2.9△▲59.41

表2 腹瀉康片對(duì)小鼠熱板法痛閾值的影響（±s，n＝10）

表2 腹瀉康片對(duì)小鼠熱板法痛閾值的影響（±s，n＝10）

注：與給藥前比較△P＜0.01；與空白組比較▲P＜0.05，◇P＜0.01；與腸康片組比較◆P＜0.05，○P＜0.01

組 別給藥前痛閾值 給藥后不同時(shí)間痛閾值30min 60min空白組14.9±4.2 16.8±6.4 16.4±6.4腸康片組14.8±2.4 17.6±7.2 17.1±4.6腹瀉康低劑量組14.1±3.3 20.8±4.3△ 20.2±6.2△腹瀉康中劑量組 14.0±4.2 20.6±4.6△ 20.7±4.4△腹瀉康高劑量組 15.3±3.7 24.3±8.1△▲◆ 25.4±7.4△◇○

表3 腹瀉康片對(duì)蛋清致大鼠足趾腫脹率的影響（±s，n＝10）

表3 腹瀉康片對(duì)蛋清致大鼠足趾腫脹率的影響（±s，n＝10）

注：與模型組比較△P＜0.05，▲P＜0.01；與腸康片組比較◇P＜0.05，◆P＜0.01。

致炎后不同時(shí)間腫脹率（%）組 別 0.5h1h2h3h4h5h模型組 81.5±13.9 75.4±20.8 67.4±22.0 56.3±11.9 43.7±12.0 34.7±15.9腸康片組 64.5±17.6▲59.3±19.7△52.2±14.4△41.2±17.0▲33.7±16.6 23.0±9.5△腹瀉康低劑量組 52.2±11.5▲◇44.9±11.3▲◇40.7±9.2▲33.6±6.5▲28.8±6.4▲25.1±7.7腹瀉康中劑量組 45.9±8.8▲◇41.1±5.0▲◇38.2±5.5▲◇30.4±8.1▲◇26.2±7.7▲21.0±8.6▲腹瀉康高劑量組 41.1±14.1▲◇37.2±14.8▲◇34.1±15.2▲◇27.6±13.0▲◇24.4±12.0▲22.2±11.7△

4 討 論 感染性腹瀉是由多種病原微生物及其產(chǎn)物引起的以腹瀉為主要表現(xiàn)的腸道疾病，為當(dāng)今全球重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一［3，4］。本方源自臨床用于治療感染性腹瀉的經(jīng)驗(yàn)方，方中君藥為秦皮，文獻(xiàn)報(bào)道秦皮煎劑對(duì)痢疾桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球桿菌均有抑制作用［5］。同時(shí)文獻(xiàn)報(bào)道秦皮皮中的秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素均具有明顯的鎮(zhèn)痛抗炎作用［6］，方中木香也有文獻(xiàn)報(bào)道具有鎮(zhèn)痛作用。

［1］ 陳 奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)［M］.貴陽(yáng)：貴州人民出版社，1988：119.

［2］ 李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991：353.

［3］ Santosham M，Chandran A，F(xiàn)itzwater S，et al.Progress and barriers for the control of diarrhoeal disease［J］.Lancet，2010，376（9734）：63－67.

［4］ 聶青和.感染性腹瀉的研究現(xiàn)狀［J］.傳染病信息，2007，20（4）：193－196.

［5］ 姚麗芳，楊逢春.秦皮類中草藥抗菌作用的研究［J］.中華醫(yī)學(xué)叢刊，2003，（6）：56－57.

［6］ 方蓮花，呂 揚(yáng)，杜冠華.秦皮的藥理作用研究進(jìn)展［J］.中國(guó)中藥雜志，2008，33（23）：2732－2736.