馮亞杰,王二耀,吳 姣,施巧婷,辛?xí)粤?,楚秋霞,徐照學(xué)
(1.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)院,河南 鄭州 450002;2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué),河南 鄭州 450002)
獲得大量、優(yōu)質(zhì)的卵母細(xì)胞,是開(kāi)展胚胎工程各項(xiàng)研究的前提條件。目前在超數(shù)排卵技術(shù)日臻成熟的情況下,如何提高個(gè)體的排卵率非常重要。促排卵3號(hào)作為促黃體素釋放激素的類似物,在動(dòng)物繁殖中應(yīng)用廣泛。它作用于腦垂體,刺激促黃體生成素和促卵泡刺激素的分泌,提高受胎率和產(chǎn)仔數(shù)。為了驗(yàn)證其不同劑量在小尾寒羊超排中對(duì)排卵率的影響,我們進(jìn)行了促排卵3號(hào)應(yīng)用效果試驗(yàn)。
1~3歲的小尾寒羊,膘情中等,體格健康,繁殖機(jī)能正常,圈舍飼養(yǎng)。試驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源于河南省焦作市。
陰道埋植栓(新西蘭生產(chǎn));國(guó)產(chǎn)卵泡刺激素(中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所生產(chǎn),規(guī)格10 mg/瓶);前列腺素D-PG(上海計(jì)劃生育研究所生產(chǎn),規(guī)格0.15 mg/支);促排3號(hào)(寧波激素廠,規(guī)格25 μg/支);速眠新合劑(長(zhǎng)春軍需大學(xué)獸醫(yī)研究所,規(guī)格1.5 mL/支)。
埋置陰道栓的當(dāng)天記為0 d,第10天遞減注射促卵泡素共6次(總劑量6 mg),第5次注射促卵泡素的同時(shí),撤出陰道栓并注射前列腺素0.15 mg。第1組發(fā)情開(kāi)始時(shí)肌注促排3 號(hào)25 μg,第2 組注射促排3 號(hào)50 μg,對(duì)照組不注射促排3號(hào)。在發(fā)情后27~32 h進(jìn)行輸卵管采卵手術(shù)。供體手術(shù)前停食停水24 h。手術(shù)部位選在腹中線旁切口,在一側(cè)乳房基部稍前方于腹白線旁2 cm處,由后向前切開(kāi)6 cm左右的切口。在切開(kāi)腹膜前,要徹底止血以防血液進(jìn)入腹腔,引起腹內(nèi)臟器尤其是子宮的粘連。用食指和中指尋找及顯露子宮、輸卵管及卵巢,記錄卵巢狀況及排卵點(diǎn)情況,采用輸卵管上行沖洗法收集卵母細(xì)胞。觀察記錄所得卵子的形態(tài)。沖卵結(jié)束后按常規(guī)外科手術(shù)方法處理傷口。
第1組共獲得紅體56個(gè),獲得卵33個(gè),排卵率為58.92%。第2組共獲得紅體52個(gè),獲得卵48個(gè),排卵率為92.3%。對(duì)照組共獲得紅體48個(gè),獲得卵18個(gè),排卵率為37.5%。第2組的排卵率比第1組提高了33.38%,比對(duì)照組提高了54.8%。
LH可促使孕激素分泌增多,后者促使卵巢合成多種酶使卵泡壁溶解破裂,引起排卵。因此,排卵機(jī)制和LH密切相關(guān)。當(dāng)優(yōu)勢(shì)卵泡成熟時(shí)會(huì)刺激垂體釋放LH,使其破裂排卵,因此排卵前LH峰值和排卵率有密切的關(guān)系。Krishe[1]報(bào)道,對(duì)山羊注射促性腺激素釋放激素后的排卵數(shù)明顯高于未注射的,而且卵泡數(shù)比未注射的少。仲躋峰[2]報(bào)道,對(duì)超排的蒙古羊在發(fā)情后注射促性腺激素釋放激素后的未排卵泡數(shù)明顯減少,同時(shí)總獲卵數(shù)也有升高。本次試驗(yàn)中也得到相似的結(jié)果。但有資料報(bào)道,綿羊垂體LH的含量較高,供體發(fā)情后內(nèi)源性LH足以誘導(dǎo)大多數(shù)卵泡排出[3]。而本次試驗(yàn)在小尾寒羊發(fā)情后注射50 μg促排卵3號(hào),排卵率達(dá)到92.3%,遠(yuǎn)高于對(duì)照組37.5%的排卵率。分析其原因,一方面可能是由于超排后卵巢上具備排卵能力的卵泡數(shù)量較多,內(nèi)源性促性腺激素引發(fā)排卵的能力不足,而促排卵3號(hào)所誘導(dǎo)的LH則能彌補(bǔ)其不足,促使具備排卵能力的卵泡成熟排卵,從而提高排卵率[4,5]。一方面可能是個(gè)體差異造成的,對(duì)于某些自身LH分泌量不足和LH峰值與排卵時(shí)間相對(duì)異常的個(gè)體,促排卵3號(hào)所誘導(dǎo)的LH則能有效彌補(bǔ)其不足。因此,只要注射促排卵3號(hào)的時(shí)間、劑量得當(dāng),對(duì)提高小尾寒羊超排后排卵率是有益的。
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