文/洪 霓

一、病毒種類

我國梨樹病毒研究始于20世紀90年代初期，通過指示植物接種與血清學鑒定技術(shù)結(jié)合，明確了我國北方種植梨樹的病毒種類主要有3種，根據(jù)在指示植物上的癥狀表現(xiàn)，確定為梨脈黃病毒（Pear vein yellowing virus，PVYV）、梨環(huán)紋花葉病毒（Pear ring mosaic virus，PRMV）和蘋果莖溝病毒（Apple stem grooving virus,ASGV）。并經(jīng)在蘋果病毒指示植物上交互接種，證實梨脈黃病毒和梨環(huán)紋花葉病毒分別與蘋果樹上發(fā)生的蘋果莖痘病毒 （Apple stem pitting virus,ASPV）和褪綠葉斑病毒（Apple chlototic leaf spot virus,ACLSV）為同種病毒。對蘋果銹果類病毒（Apple scar skin viroid,ASSVd）的為害特點和傳播途徑進行了系統(tǒng)的研究，明確引起蘋果花臉和銹果的病原均為蘋果銹果類病毒；我國早在20世紀50年代即發(fā)現(xiàn)梨樹與蘋果混栽地區(qū)的蘋果銹果病有明顯加重趨勢，經(jīng)生物學接種和雙向電泳分析發(fā)現(xiàn)，梨樹為蘋果銹果類病毒的潛在寄主，雖然未能證明梨樹是否受蘋果銹果病的影響，但該類病毒的機械傳播特點表明其具有從梨樹傳播至蘋果樹的風險，該結(jié)果為指導梨樹銹果病的防控提供了重要參考依據(jù)。本世紀初開始，華中農(nóng)業(yè)大學對我國各地種植的梨樹病毒侵染狀況進行了系統(tǒng)調(diào)查，結(jié)果顯示蘋果莖溝病毒、蘋果莖痘病毒和褪綠葉斑病毒在梨樹上的侵染率均高達80%以上。

二、病毒病

近些年的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，局部地區(qū)栽培梨樹的病毒病為害有加重趨勢，推測與頻繁高接、品種替換及樹體老化而抗性降低有關(guān)。這些病害在田間梨樹上的癥狀輕重因品種和栽培條件不同而有一定差異。常見病害有以下幾種：

（1）梨脈黃?。罕憩F(xiàn)為梨葉片沿葉脈出現(xiàn)褪綠，嚴重時葉脈黃化。這類病害通常與蘋果莖痘病毒侵染有關(guān)。

（2）梨環(huán)紋花葉?。翰≈昃植咳~片出現(xiàn)環(huán)狀褪綠、褪綠斑塊或斑點。這類病害通常與蘋果褪綠葉斑病毒侵染有關(guān)。

（3）石痘病：少數(shù)品種果實出現(xiàn)畸形，果面不規(guī)則凹陷，切開果實可見果肉中不均勻分布的石化細胞，堅硬且很易褐化。這類病害通常與蘋果莖痘病毒侵染有關(guān)。

梨脈黃病和梨環(huán)紋花葉病通常在田間植株上混合發(fā)生，導致病害加重，這些病害癥狀一般在春末最為明顯。此外，在多次高接的梨樹上病毒病發(fā)生較重，產(chǎn)生類似衰退癥狀，植株生長及果品產(chǎn)量和品質(zhì)均受到嚴重影響。

蘋果莖痘病毒引起梨葉片葉脈黃化

病毒誘導梨果實產(chǎn)生褐色環(huán)斑

蘋果褪綠葉斑病毒誘導梨葉片產(chǎn)生褪綠環(huán)斑

三、防治方法

梨樹為多年生植物，通常采用無性繁殖材料嫁接的方式繁殖，病毒在梨植株中通過輸導組織進行擴散，因此，采用病株接穗作為高接和繁殖材料很易導致病毒的傳播和病毒病的擴展蔓延，目前尚未發(fā)現(xiàn)這些病毒通過媒體昆蟲傳播，這些病毒也不通過種子或嫁接工具傳播。在當今技術(shù)條件下，尚無對果樹病毒病有效的防治藥劑，因此，可通過栽培無病毒苗木防止梨樹病毒病害的發(fā)生。世界發(fā)達國家均對果樹種質(zhì)資源提出了嚴格的要求，建立了較完善的無病毒種質(zhì)培育、保存及監(jiān)控的技術(shù)及管理體系。無病毒苗木根系發(fā)達，抗逆性強，適合山坡瘠薄地栽培，有助于解決糧、果爭地矛盾，而且減少化肥用量，減少環(huán)境污染，符合生態(tài)農(nóng)業(yè)要求。

早期用于梨樹病毒脫毒技術(shù)的主要是盆栽植株熱處理與微芽嫁接相結(jié)合和莖尖培養(yǎng)，其脫毒效率相對較低，為30%左右，熱處理后切取合適大小的莖尖是提高脫除病毒效果的關(guān)鍵。為提高梨樹病毒脫除效果，華中農(nóng)業(yè)大學采用梨離體植株熱處理和熱處理與化學處理相結(jié)合的方法，使脫除病毒效率得到明顯提高。研究結(jié)果顯示，在34/42℃（16/8小時）處理50天后取0.5 mm莖尖培養(yǎng)可完全脫除以上3種梨樹病毒，采用病毒醚25μg/mL結(jié)合35℃處理40天后切取的0.5～1.0 mm莖尖，所獲再生植株的病毒脫除率可達100%。目前，利用建立的脫毒技術(shù)，獲得一批無毒沙梨種質(zhì)，為梨無病毒化栽培奠定了良好基礎(chǔ)。

四、病毒檢測

在果樹種質(zhì)資源的交換和引進過程中，很易導致病毒隨繁殖材料傳入和擴散。建立高效、靈敏和快速的病毒檢測技術(shù)對加強繁殖材料的病毒監(jiān)測是十分重要的。近些年，我國在深入了解梨樹病毒種類及梨樹病毒生物學和分子特性基礎(chǔ)上，相繼開展了針對梨病毒的血清學檢測試劑研制和分子生物學檢測技術(shù)的研究，制備了抗ASGV、ASPV和ACLSV的多克隆抗體，并應(yīng)用于梨植株攜帶病毒的檢測；通過引物設(shè)計和核酸提取方法、擴增條件及反應(yīng)體系優(yōu)化，使梨病毒的分子檢測效果得到明顯提高，為梨無病毒種質(zhì)的培育和種苗調(diào)運的檢疫提供了重要的技術(shù)支撐。隨著梨脫病毒種質(zhì)培育的加強和大量脫病毒種苗的繁育和種植，建立適合大量樣本檢測的高通量和高靈敏檢測技術(shù)是目前的研究重點。