顧 歡 施壽榮 童海兵 鄒劍敏 王志躍*

(1.揚州大學動物科學與技術(shù)學院，揚州 225009;2.中國農(nóng)業(yè)科學院家禽研究所，揚州 225125)

大豆黃酮(daidzein，DA)屬異黃酮類植物雌激素，廣泛存在于豆類、牧草、谷物等天然植物中。其化學結(jié)構(gòu)與17β－雌二醇類似，生物測定它的雌激素活性為 17β － 雌二醇的 10－2～10－3［1］。近年來大豆黃酮在人醫(yī)臨床及保健方面越來越受到重視［2－3］，研究發(fā)現(xiàn)，它具有抗氧化、抗癌、降低膽固醇、提高機體免疫力等生物學功能［4－6］，且安全無毒副作用［7］。因為蛋雞在產(chǎn)蛋后期體內(nèi)雌激素水平下降，所以研究大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能的影響具有重要意義。結(jié)果表明，大豆黃酮對家禽的生產(chǎn)性能有很好的調(diào)節(jié)作用，能提高蛋雞、蛋鴨、鵪鶉的產(chǎn)蛋率，降低料蛋比，增加平均蛋重等［8－10］。但這些報道大多是從單一添加量來研究的，對于不同劑量大豆黃酮對蛋雞生產(chǎn)性能影響的報道很少，且有關(guān)大豆黃酮對蛋雞血液常規(guī)指標的影響及其帶來的經(jīng)濟效益鮮有報道。為此，本試驗旨在探討飼糧中添加不同劑量大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能、血液指標和經(jīng)濟效益的影響，為飼料生產(chǎn)企業(yè)和養(yǎng)殖場(戶)科學使用大豆黃酮提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與動物

試驗材料為大豆黃酮(4，7－二羥基異黃酮＞97.5%)，白色粉末，四川廣漢生化制品有限公司提供。試驗動物為56周齡海蘭褐蛋雞。

1.2 試驗設(shè)計與飼糧

選取體重、產(chǎn)蛋率相近的56周齡海蘭褐蛋雞640只，隨機分為4組，即對照組、試驗1組、試驗2組、試驗3組，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)20只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1)，試驗組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中分別添加10、50、100 mg/kg大豆黃酮的試驗飼糧。試驗期12周， 從59周齡到70周齡。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basaldiet(air-dry basis)

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗雞采用3層階梯式籠養(yǎng)，每天定時飼喂2次(08:00、15:00)，自由采食、飲水。日常管理按本雞場常規(guī)管理進行。

1.4 樣品的采集與處理

每天15:00準時收蛋，以重復(fù)為單位每天記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重，每周統(tǒng)計耗料量，計算全期平均產(chǎn)蛋率、蛋重、采食量、料蛋比。試驗結(jié)束時，每個重復(fù)選取1只雞，翅靜脈采血5 mL，其中2 mL血液加抗凝劑用于血液常規(guī)指標測定，3 mL血液靜置后，3 500 r/min離心10 min，分離后的血清用于血清生化指標測定。血樣送至江蘇省揚州市疾病控制中心測定。

用全自動血液分析儀(Sysmtx XE－2100)測定血液常規(guī)指標;用UniCel DxC 800 Synchron全自動生化分析系統(tǒng)(Beckman coulter，美國)測定血清生化指標。采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中雌二醇(E2)和孕酮含量，用BIO RAD Model680酶標儀進行分析，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

經(jīng)濟效益計算公式:經(jīng)濟效益=(總產(chǎn)蛋重×雞蛋價格)－(總耗料量×飼料價格)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2003整理后，用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行分析，單因子方差分析(one-way ANOVA)檢驗組間差異顯著性，再進行LSD多重比較。P＜0.05表示差異顯著;P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能的影響

大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能的影響見表2。由表可知，飼糧添加大豆黃酮對12周的平均采食量無顯著影響(P＞0.05)。與對照組相比，添加10 mg/kg大豆黃酮極顯著提高了蛋重(P＜0.01)，但對產(chǎn)蛋率無顯著影響(P ＞0.05);添加50 mg/kg大豆黃酮極顯著提高了產(chǎn)蛋率、降低了料蛋比(P＜0.01)，但對蛋重無顯著影響(P＞0.05);添加100 mg/kg大豆黃酮時，生產(chǎn)性能各指標與對照組均差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞血液常規(guī)指標、血清生化指標及激素水平的影響

大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞血液常規(guī)指標的影響見表3。由表可知，添加大豆黃酮對蛋雞各項血液常規(guī)指標均無顯著影響(P＞0.05)。

表2 大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects ofdaidzein on performance of laying hensduring the late laying period

表3 大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞血液常規(guī)指標的影響Table 3 Effects ofdaidzein on blood routine parameters in laying hensduring the late laying period

大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞血清生化指標的影響見表4。由表可知，大豆黃酮對蛋雞血清總蛋白、磷、鈣、總膽固醇含量有顯著影響(P＜0.05)，對白蛋白含量、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性、甘油三酯含量、葡萄糖含量、堿性磷酸酶活性影響不顯著(P＞0.05)。

大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞血清激素水平的影響見表5。由表可知，大豆黃酮對蛋雞血清雌二醇、孕酮水平影響不顯著(P＞0.05)。

2.3 大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞經(jīng)濟效益的影響

大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞經(jīng)濟效益的影響見表6。飼料成本見表1(其中玉米、大豆粕、雞蛋價格參考中國農(nóng)業(yè)信息網(wǎng)公布的《2011年12月全國畜產(chǎn)品和飼料價格情況》)，以基礎(chǔ)飼糧成本2.53元/kg，大 豆 黃 酮 1 000 元/kg，雞 蛋 價 格9.88元/kg計算。從表6可以看出，飼糧添加大豆黃酮12周后，在經(jīng)濟效益上，10 mg/kg組比對照組提高了6.46%;50 mg/kg組比對照組提高了11.66%;100 mg/kg組比對照組提高了2.37%。

3 討論

3.1 大豆黃酮對生產(chǎn)性能的影響

大豆黃酮作為一種植物雌激素，對蛋雞、蛋鴨、鵪鶉的產(chǎn)蛋性能均具有良好的促進作用［8－10］，特別在產(chǎn)蛋后期由于此時體內(nèi)內(nèi)源雌激素水平下降，添加后效果明顯。周玉傳等［11］給415日齡紹興鴨飼喂添加5 mg/kg大豆黃酮的飼糧，試驗9周后發(fā)現(xiàn)其極顯著提高了試驗鴨產(chǎn)蛋率。趙鳳岐等［12］給 44周 齡 海 蘭 褐 蛋 雞 飼 喂 添 加 10、15 mg/kg大豆黃酮的飼糧，試驗12周后發(fā)現(xiàn)其顯著提高了蛋雞產(chǎn)蛋率。本研究結(jié)果與以上報道有差異，本研究顯示，在56周齡海蘭褐蛋雞基礎(chǔ)飼糧添加10、100 mg/kg大豆黃酮12周，對其產(chǎn)蛋率無顯著影響，添加50 mg/kg大豆黃酮能極顯著提高其產(chǎn)蛋率。10 mg/kg大豆黃酮對產(chǎn)蛋率無顯著影響的結(jié)論與弓琴等［13］的報道一致。50 mg/kg大豆黃酮能提高產(chǎn)蛋率，目前認為是因為大豆黃酮作為雌激素受體激動劑，增加了雌激素的作用，上調(diào)了促性腺激素受體基因mRNA的表達量，從而促進了產(chǎn)蛋后期蛋雞卵泡的發(fā)育［14－15］。而飼糧添加100 mg/kg大豆黃酮的蛋雞產(chǎn)蛋率下降，可能是由于此時雌激素水平過高，大豆黃酮起抗雌激素的作用［16］，此時高劑量大豆黃酮可能會對卵巢或輸卵管的發(fā)育起一定抑制作用，具體原因有待進一步研究。

表4 大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞血清生化指標的影響Table 4 Effects ofdaidzein on serum biochemical parameters in laying hensduring the late laying period

表5 大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞血清激素水平的影響Table 5 Effects ofdaidzein on serum hormone levels in laying hensduring the late laying period ng/mL

表6 大豆黃酮對產(chǎn)蛋后期蛋雞經(jīng)濟效益的影響Table 6 Effects ofdaidzein on economic benefits in laying hensduring the late laying period

馬學會［17］給50周齡海蘭褐蛋雞飼喂添加10～30 mg/kg大豆黃酮的飼糧7周后發(fā)現(xiàn)，10 mg/kg組對蛋重提高效果最好，達極顯著水平，本試驗驗證了這一觀點。本試驗結(jié)果表明，飼糧添加10 mg/kg大豆黃酮極顯著提高了蛋雞蛋重，而添加50、100 mg/kg大豆黃酮對蛋重無顯著影響。趙鳳岐等［12］認為添加大豆黃酮不影響蛋雞采食量，本試驗結(jié)果亦表明添加大豆黃酮對采食量無顯著影響。由于飼糧添加50 mg/kg大豆黃酮的蛋雞產(chǎn)蛋率最高，而本試驗中大豆黃酮又不影響采食量，因此50 mg/kg組料蛋比最低。

3.2 大豆黃酮對血液常規(guī)指標、血清生化指標及激素水平的影響

目前尚無大豆黃酮對蛋雞血液常規(guī)指標影響的報道。本試驗結(jié)果表明，添加大豆黃酮對蛋雞血液常規(guī)指標無顯著影響。孟婷等［8］給174日齡迪卡蛋雞飼喂添加3～6 mg/kg大豆黃酮的飼糧3周，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其血清總鈣水平和堿性磷酸酶活性有所提高，但均未達到顯著水平。本試驗結(jié)果亦表明，添加大豆黃酮后蛋雞血清鈣、磷含量提高，提示添加大豆黃酮后產(chǎn)蛋率提高和料蛋比降低可能是由于機體吸收能力增強，維持了體內(nèi)鈣磷代謝的平衡，對產(chǎn)蛋后期蛋雞產(chǎn)蛋疲勞綜合征起到了一定的預(yù)防作用［8］。許合金等［18］給39周齡海蘭褐蛋雞飼喂添加6 mg/kg大豆黃酮的飼糧8周后發(fā)現(xiàn)，其顯著降低了蛋雞血清中膽固醇和甘油三酯含量。趙鳳岐等［12］給44周齡海蘭褐蛋雞飼喂添加5、10、15 mg/kg大豆黃酮的飼糧12周后發(fā)現(xiàn)，隨著飼糧大豆黃酮添加量的增加，蛋雞血清總膽固醇、甘油三酯含量呈遞減趨勢。本試驗結(jié)果與以上結(jié)論不一致，本試驗結(jié)果表明添加大豆黃酮后顯著提高了蛋雞血清中總膽固醇含量，但對甘油三酯含量無顯著影響，說明添加大豆黃酮并非一定具有降低血清總膽固醇含量的作用。這證實了尹靖東等［19］的觀點，即大豆黃酮對血漿總膽固醇的影響沒有規(guī)律性。

雌激素在生殖軸調(diào)節(jié)中扮演重要角色，主要作為性腺對腦中樞的反饋調(diào)節(jié)分子，調(diào)控促性腺激素釋放激素(GnRH)、促黃體素(LH)等激素的合成與分泌的脈沖模式，孕酮可刺激腺垂體釋放促卵泡素(FSH)和 LH，加速卵泡成熟和排卵［20－21］。弓琴等［13］給 50 周齡農(nóng)大 3 號矮小型蛋雞飼喂添加10 mg/kg大豆黃酮的飼糧，8周后發(fā)現(xiàn)，其血清雌二醇水平顯著提高。唐現(xiàn)文等［22］給44周齡番鴨飼喂添加3、6 mg/kg大豆黃酮的飼糧，4周后發(fā)現(xiàn)，其血清雌激素水平無顯著變化，但孕酮含量顯著提高。本試驗結(jié)果表明，大豆黃酮對蛋雞血清雌二醇、孕酮水平影響不顯著，但與對照組相比，飼糧添加50、100 mg/kg大豆黃酮后蛋雞血清雌激素、孕酮水平有升高趨勢。因此，飼糧添加50 mg/kg大豆黃酮可提高產(chǎn)蛋率很可能是因為大豆黃酮發(fā)揮了雌激素樣作用，從而促進了卵泡發(fā)育，增加卵泡數(shù)，導(dǎo)致產(chǎn)蛋率提高，而飼糧添加100 mg/kg大豆黃酮使產(chǎn)蛋率下降可能是由于此時血清雌激素水平過高，大豆黃酮起抗雌激素的作用，高劑量大豆黃酮可能會對卵巢或輸卵管的發(fā)育起一定抑制作用，具體調(diào)控機理有待進一步研究。

3.3 大豆黃酮對經(jīng)濟效益的影響

本試驗中經(jīng)濟效益的計算未考慮人員工資、水、電、雜支等成本，僅考慮飼料成本。飼糧添加大豆黃酮10 mg/kg所獲經(jīng)濟效益比對照組提高了6.46%;添加 50 mg/kg 提高了 11.66%;而添加100 mg/kg時，由于飼料成本提高，而生產(chǎn)性能未顯著提高，故效益僅提高了2.37%。從經(jīng)濟效益上看，飼料中添加50 mg/kg大豆黃酮所獲效益最高。

4 結(jié)論

①在蛋雞產(chǎn)蛋后期飼糧中添加50 mg/kg大豆黃酮可以改善蛋雞的生產(chǎn)性能，并能獲得最佳經(jīng)濟效益;過量添加會使生產(chǎn)性能和經(jīng)濟效益有降低的趨勢。

②在蛋雞產(chǎn)蛋后期飼糧中添加大豆黃酮對蛋雞血液常規(guī)指標無顯著影響，對血清中磷、鈣、總膽固醇含量有顯著影響。

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