化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在跟蹤兒童乙型肝炎疫苗免疫效果中的動(dòng)態(tài)觀察

李華榮

化學(xué)發(fā)光免疫分析法(CLIA)是把免疫反應(yīng)與發(fā)光反應(yīng)結(jié)合起來(lái)的一種定量分析技術(shù)。既具有發(fā)光檢測(cè)的高度靈敏性，又具有免疫分析法的高度特異性。該技術(shù)其靈敏度高于包括放射免疫(RIA)、酶聯(lián)免疫(EIA)在內(nèi)的傳統(tǒng)檢測(cè)方法。在以往評(píng)定乙型肝炎(乙肝)疫苗免疫效果，檢測(cè)人群中乙肝表面抗體(抗-HBs)陽(yáng)性率及濃度值沒(méi)有理想的定量檢測(cè)手段，只能采取定性或半定量方法，使之在制訂乙肝免疫規(guī)劃時(shí)受到制約。吉林省白城市疾控中心2011年8月首次應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫分析新技術(shù)，跟蹤兒童乙肝疫苗免疫效果的動(dòng)態(tài)指標(biāo)。使吉林省白城市3～11歲兒童抗-HBs的陽(yáng)性率及抗體濃度雙項(xiàng)指標(biāo)得以量化，為乙肝免疫規(guī)劃工作提供了科學(xué)、客觀、動(dòng)態(tài)的參考數(shù)據(jù)。下面就其新技術(shù)應(yīng)用情況簡(jiǎn)述如下。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備 化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，由安圖實(shí)驗(yàn)儀器(鄭州)有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品型號(hào)Lumo，化學(xué)發(fā)光法抗-HBs檢測(cè)試劑盒由鄭州安圖生物工程股份有限公司生產(chǎn)。

1.2 檢測(cè)對(duì)象 采用多階段、分層、整群抽樣方法，對(duì)2003～2010年出生兒童為檢測(cè)對(duì)象。在注射疫苗前檢測(cè)抗-HBs濃度，由專(zhuān)職護(hù)士采取靜脈血3 ml，送檢驗(yàn)室檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果以＜10 mIU/ml為陰性，對(duì)乙肝病毒(HBV)感染無(wú)保護(hù)性，需注射乙肝疫苗。≥10 mIU/ml為陽(yáng)性，對(duì)普通人群具有足夠的保護(hù)作用［1］。暫時(shí)無(wú)需注射乙肝疫苗。除此之外，要登記其姓名、性別、出生年月、乙肝疫苗初免完成情況 、初免注射乙肝疫苗劑量、乙肝患病家族史等相關(guān)內(nèi)容。2年期間，共檢測(cè)3～11歲兒童1248名，其中男性575名，女性673人，男女性別比為1∶1.17。

1.3 檢測(cè)方法 將3 ml靜脈血離心沉淀，取無(wú)溶血、無(wú)乳糜的血清檢測(cè)。使用上述專(zhuān)用儀器，專(zhuān)用試劑盒，嚴(yán)格按操作規(guī)程檢測(cè)。試劑盒效期內(nèi)使用。

2 結(jié)果

2.1 被檢測(cè)兒童，抗-HBs陽(yáng)性率達(dá)73.56%，抗-HBs≥10 mIU/ml，平均濃度771.63 mIU/ml，并隨著年齡增長(zhǎng)雙項(xiàng)指標(biāo)均呈下降趨勢(shì)，見(jiàn)表1。

表1 1248名兒童抗-HBs陽(yáng)性、濃度值檢測(cè)結(jié)果

3個(gè)年齡組間抗-HBs陽(yáng)性率，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理χ2=51.86，P＜0.01差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 男女性別間抗-HBs陽(yáng)性率及抗體濃度值檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表2。

表2 1248名兒童男女性別間抗-HBs陽(yáng)性、抗體濃度檢測(cè)結(jié)果

男女性別間陽(yáng)性率經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，χ2=1.36，P＞0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái)，乙肝疫苗不但在新生兒中普種，并已在成人中廣泛應(yīng)用，其免疫效果已經(jīng)得到了充分肯定。隨著衛(wèi)生知識(shí)的普及及人群對(duì)身體健康的關(guān)注，人們逐漸認(rèn)識(shí)到，用注射疫苗預(yù)防疾病是最經(jīng)濟(jì)、最有效的手段。實(shí)踐證明通過(guò)接種乙肝疫苗而產(chǎn)生的保護(hù)性抗體不但可以預(yù)防乙肝，又可以減少因乙肝而引起的肝硬化、肝癌的發(fā)生?？梢哉f(shuō)，它不但是乙肝疫苗，它也是肝硬化疫苗、肝癌疫苗。

吉林省白城市于1991年按衛(wèi)生部《全國(guó)乙肝疫苗免疫接種方案》的要求，已把乙肝疫苗納入新生兒計(jì)劃免疫方案。乙肝計(jì)劃免疫20年來(lái)，對(duì)于兒童的抗-HBs免疫效果，一直沒(méi)有確切的量化指標(biāo)。本次檢測(cè)方法采用最先進(jìn)的化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)，搜集2年來(lái)的1248名3～11歲兒童血清樣本，跟蹤檢測(cè)，使本市兒童乙肝計(jì)免結(jié)果科學(xué)客觀地反映出來(lái)，為今后制定免疫規(guī)劃提供了科學(xué)依據(jù)。

乙肝傳播途徑主要是血液、胎傳和接觸性傳播。經(jīng)口腔傳播乙肝的問(wèn)題已經(jīng)得到證實(shí)［2］。白城市中小學(xué)生吃“小飯桌”的比較多，又有生日聚會(huì)或經(jīng)常光顧德克士、肯德基快餐、街頭食品作坊等餐飲場(chǎng)所，除需預(yù)防血液傳播和母嬰途徑傳播外，更要防止“密切接觸”中的經(jīng)口傳播乙肝。這就需要計(jì)免工作者對(duì)兒童中抗-HBs濃度值＜10 mIU/ml的陰性易感者實(shí)施加強(qiáng)免疫措施。對(duì)于抗-HBs≥10 mIU/ml的兒童，什么時(shí)間需加強(qiáng)乙肝疫苗免疫則視其抗-HBs濃度的高低而定，濃度值越高，加強(qiáng)免疫的時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)。此次檢測(cè)結(jié)果顯示，在男女性別的抗-HBs陽(yáng)性率分別為71.48%和75.33%，χ2=1.36，P＞0.05，其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這一結(jié)果與相關(guān)報(bào)道不相一致［3］，可能存在地區(qū)間差異，或者與使用的疫苗生產(chǎn)廠家不同及與抽樣誤差有關(guān)。

在乙肝計(jì)劃免疫實(shí)施以前，我國(guó)人口平均乙肝表面抗原(HBsAg)感染率為10%［4］，可謂是“肝炎大國(guó)”，計(jì)免實(shí)施后的2009年白城市3～5歲兒童HBsAg感染率就降至0.55%［5］取得驕人的計(jì)劃免疫成果。然而，這不應(yīng)該是引為驕傲的理由，要想鞏固這一成果是要付出艱辛的努力。因?yàn)橥ㄟ^(guò)本次檢測(cè)結(jié)果得知，雖然新生兒出生后按免疫程序接種了3針5 μg乙肝疫苗。并且到3～5歲時(shí)保護(hù)性抗體陽(yáng)性率仍達(dá)83.38%，抗體濃度在878.04 mIU/ml。但是隨著年齡的增長(zhǎng)，到6～8歲、9～11歲兩個(gè)年齡段時(shí)，乙肝抗體保護(hù)率下降至78.00%和62.34%，抗-HBs平均濃度值分別降至732.48 mIU/ml和704.36 mIU/ml，并且各年齡組間抗-HBs陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(χ2=51.86，P＜0.01)。這說(shuō)明出生后雖然全程接種了乙肝疫苗，但當(dāng)生長(zhǎng)至3～5歲、6～8歲、9～11歲三個(gè)年齡段時(shí)分別有 16.62%、22.00%和37.66%的兒童有感染HBV的風(fēng)險(xiǎn)。全國(guó)高等醫(yī)藥院校教材，《傳染病學(xué)》第八版，認(rèn)為接種后隨著時(shí)間的推移，部分人抗-HBs水平會(huì)逐漸下降，如果少于10 mIU/ml，需加強(qiáng)注射一次［6］，為了掌握這部分人的抗-HBs水平，就必須實(shí)施跟蹤監(jiān)測(cè)，以掌握其抗-HBs的動(dòng)態(tài)指標(biāo)，適時(shí)加強(qiáng)注射乙肝疫苗，提高這部分易感者的抗-HBs免疫水平是我們疾控工作者需要努力的目標(biāo)。

［1］鄭州安圖生物工程股份有限公司.乙型肝炎病毒表面抗體定量檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)說(shuō)明書(shū)，2013.

［2］薛承巖.經(jīng)口腔途徑傳播和感染乙型肝炎病毒的調(diào)查.中華流行病學(xué)雜志，1988(1):21-22.

［3］林平，朱靈芝.365名小學(xué)生接種國(guó)產(chǎn)酵母乙肝疫苗5年免疫效果觀察.疾病控制雜志，2004，8(1):79.

［4］駱抗生.乙型肝炎基礎(chǔ)與臨床.北京:人民衛(wèi)生出版社，1997:187.

［5］劉權(quán)，周湛，崔柏峰，等.白城市3～5歲兒童乙型肝炎疫苗免疫效果評(píng)價(jià).中國(guó)計(jì)劃免疫，2007，13(1):53.

［6］李蘭娟，任紅.傳染病學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社，2013:43.