楊敬輝，潘 娟，劉占民

（河北農業(yè)大學海洋學院，河北 秦皇島066003）

脂肪營養(yǎng)作為節(jié)約蛋白質、促進魚類生長的重要途徑越來越多地被飼料加工企業(yè)所采用，結果是高能量、高脂肪飼料的應用導致魚類脂肪肝現(xiàn)象越來越嚴重，魚類重度脂肪肝會導致生長緩慢、餌料系數(shù)上升，免疫力下降、發(fā)疾率上升，經濟損失慘重，嚴重制約了漁業(yè)生產。通過在飼料中添加中藥制劑肝膽利康散，觀察對草魚脂肪肝的防治作用，并與L－肉毒堿和膽汁酸2種不同作用機理的添加劑進行比較，為魚類脂肪肝的防治尋求選藥依據。

1 材料與方法

1.1 藥物 肝膽利康散，組方：茵陳30、大黃30、郁金25、連翹15、柴胡15、梔子15、白芍15、牡丹皮15、藿香15、葡萄糖125，河北省農林科學院第一獸藥廠生產，批號（2005）030289200，市購；L－肉毒堿（含量98%），湖北華陽生化有限公司生產，CAS#541－15－1批號20100812，市購；膽汁酸（25%），山東龍昌生化公司生產，批號20100525，市購。

1.2 基礎飼料（餌料） 由天津寶坻飼料廠提供的草魚魚種專用飼料的未經制粒粉料，飼料組成（見表1）。

表1 基礎日糧的組成及營養(yǎng)成分

1.3 試驗用添加藥物餌料 按照試驗目的，制成添加中藥肝膽利康散（A組）、L－肉毒堿（B組）、膽汁酸（C組）的3組添加藥物料和未添加藥物基礎料作空白對照（D組）（見表2）。加入藥物的基礎料和空白基礎料攪拌均勻，用小型平模制粒機制成1.5mm的顆粒餌料。

1.4 給藥方法與時間 每組設3個重復，投喂3次/d，8：30、13：30、17：00各投1次，投餌率為魚體重的3%，投餌30min后紀錄采食情況，盡量使其飽食。試驗時間21d。

1.5 試驗草魚與分組 疑似患脂肪肝的庫養(yǎng)一齡草魚魚種，平均體重42g?；铘~觀察腹部略膨大，體色較淺，解剖后腸系膜脂肪大量蓄積，肝臟脂肪浸潤、顏色黃白，有油膩感，膽囊顏色茶褐色，呈典型脂肪肝病變，初步確診為脂肪肝魚。選用外觀癥狀明顯的初步確診病魚120尾，分為A、B、C、D 4組，每組30尾（見表3），分別飼養(yǎng)在120cm×45cm×60 cm的試驗用水族箱中；自來水經過曝氣和自然晾曬24h后使用，試驗期水溫控制在24℃～26℃，每天吸污，添加新水10～15cm。試驗魚在水族箱內馴養(yǎng)5d，開始正式試驗。

表2 各試驗組藥物添加種類及添加量

表3 試驗動物分組

1.6 采樣與處理 試驗期間，每7d為1療程，連續(xù)用藥3個療程，每個療程結束后，分別從各試驗組隨機抽取3尾魚，3個重復共9條魚，解剖后剝離肝胰臟，稱重，－20℃冰箱保存。

1.7 樣品的測定 試驗結束后集中進行測定，測量指標包括魚種肝胰體比（肝胰臟和身體總重的比值）、體脂含量和肝脂含量，粗脂肪采用GB6432－86索氏抽提法測量。

2 試驗結果及分析

2.1 試驗結果 見表4。

表4 肝膽利康散、L－肉毒堿、膽汁酸對草魚肝胰體重比、體脂含量、肝脂含量的影響

2.2 試驗結果分析

2.2.1 各用藥組組內不同用藥時間的結果與比較A、B、C各組在7、14、21d進行肝胰體比、體脂含量和肝脂含量3項指標測定，經比較，結果差異極顯著（P＜0.01）（見表3）。

A組肝胰體比（肝胰臟重和體重比值）14d較7 d降低3.15%，21d較14d下降12.7%；體脂含量14d較7d降低2.1%，21d較14d下降12.7；肝脂含量14d較7d降低5.1%，21d較14d下降4.1%；差異均極顯著（P＜0.01）。B組肝胰體比14 d較7d降低9.1%，21d較14d降低了11.2%，體脂含量14d比7d降低了2.1%，21d比14d降低了13.3%；肝脂含量14d較7d降低6.0%，21d較14d降低7.9%，差異均極顯著（P＜0.01）。C組肝胰體比14d較7d降低5.9%，21d較14d下降10.8%；體脂含量14d較7d降低2.2%，21d較14d下降9.21%；肝脂含量14d較7d降低4.6%，21d較14d降低6.3%；差異均極顯著（P＜0.01）。

對照組（D組）肝胰體比、體脂含量和肝脂含量均呈上升趨勢。

2.2.2 各用藥組與對照組比較不同用藥時間對3項指標的影響效果 在7、14、21d3個用藥階段，和對照組比較肝胰體比、體脂含量和肝脂含量變化，結果為，用藥7d時，A組、B組、C組肝胰體比分別下降2.31%、4.48%、4.37%；體脂含量分別下降0.73%、3.67%、1.14%；肝脂含量分別下降1.91%、5.09%、3.82%。用藥14d時，A 組、B組、C組肝胰體比分別下降5.58%、14.06%、10.48%；體脂含量分別下降4.37%、7.29%、4.37%；肝脂含量分別下降8.17%、11.94%、9.43%；用藥21d時，A組、B組、C組肝胰體比分別下降18.87%、24.81%、21.01%；體脂含量分別下降 13.47%、21.98%、15.06%；肝脂含量分別下降 12.50%、19.34%、15.62%。L－肉堿組對3項指標的影響效果最為顯著，膽汁酸、肝膽利康不及L－肉毒堿效果顯著。

2.2.3 用藥組組間效果比較 A組和C組比較，對體脂的影響效果差異不顯著；A組和C組比較，A組和B組比較，B組和C組比較，其他各項結果差異極顯著（P＜0.01），由此表明，L－肉毒堿對各項指標的影響效果最好；膽汁酸對肝胰體比和肝脂的影響不及L－肉毒堿，優(yōu)于肝膽利康散；肝膽利康散對各項指標的影響效果不及L－肉堿和膽汁酸（見表3）。

3 結論與討論

中藥制劑肝膽利康散、L－肉毒堿、膽汁酸可降低患脂肪肝草魚的肝胰體比、體脂含量和肝脂含量，能夠有效的防治草魚脂肪肝的發(fā)生和發(fā)展，可作為常用首選藥物使用；L－肉毒堿、膽汁酸降低肝胰體比、體脂含量和肝脂含量的效果優(yōu)于中藥制劑肝膽利康散，中藥制劑的無公害和長效優(yōu)勢還應值得注意。

草魚體脂含量增加，肝臟脂肪蓄積和膽汁顏色發(fā)生變化（肝膽綜合征）可顯著降低草魚的生長速度和抗病能力，造成草魚疫病多發(fā)，死亡率高，對草魚的養(yǎng)殖威脅很大。L－肉毒堿、膽汁酸和中藥散劑肝膽利康散能夠促進魚的生長，降低體脂和肝胰臟脂肪含量。肝膽利康散是中藥散劑，具有保肝、利膽、瀉下、利尿作用。目前，中藥制劑對魚類體脂、肝脂含量影響的文獻資料較少，程玉冰（2008）［1］等有三黃粉和多維聯(lián)合使用防治草魚肝膽綜合征的報道，張盈嬌（2010）［2］有類似報道。試驗表明，肝膽利康散具有明顯的降低體脂、肝脂和降低肝胰體比的作用，但和L－肉毒堿和膽汁酸相比效果略差，統(tǒng)計結果差異顯著，說明中藥制劑效果和化學制劑相比作用緩慢。L－肉毒堿又稱肉毒堿，學名β－羥基－γ－三甲基丁酸，參與長鏈脂肪酸的轉運和β－氧化，對魚類的生長的脂肪代謝具有積極的作用，國外學者已有L－肉毒堿對魚類肉質品質具有顯著改善的報道。Santulli（1986）［3］研究報道，L－肉毒堿能夠顯著降低海鱸魚肝臟和肌肉里的脂肪的含量；張東鳴（2002）［4］在飼料中200mg/kg L－肉毒堿，鯉魚的體脂含量顯著下降，和本試驗的結果大致相同。本試驗中L－肉毒堿對體脂下降的速度和對照組相比在14d差異顯著，說明L－肉毒堿對脂肪的利用是一個漸進過程，在短時間內（通常意義的治療疾病的1個療程5 d）難以顯效。

膽汁酸是膽汁的主要成分，具有較強的表面活性，能夠乳化脂肪，擴大脂肪與脂肪酶的接觸面積，加速脂肪的消化吸收。劉建強［5］等研究表明，膽汁酸還可以幫助排出體內的有害物質，降低血漿內毒素水平；周書耘［6］2010年研究在軍曹魚的飼料中添加膽汁酸，對魚的生長、飼料系數(shù)和肝脂含量有顯著影響，本試驗結果與此一致，只是在降低肝脂肪比方面和L－肉毒堿有顯著差異。試驗結果和資料表明，中藥制劑肝膽利康散等和L－肉毒堿均能降低肝胰體比、肝脂含量和體脂含量，對防治魚類脂肪肝有較好效果，應進一步在聯(lián)合用藥方面進行研究和探討。

［1］ 程玉冰，潘庭雙，侯冠軍.不同中草藥添加劑對草魚生長及肝膽綜合癥的影響［J］.安徽農學通報，2008，14（23）：146.

［2］ 張盈嬌，謝青，曾曉丹，等.飼料中添加“健肝散”對丁魚歲魚脂肪肝的作用 ［J］.水生態(tài)學雜志，2010，3（3）：94－97.

［3］ Santulli.A Effect of supplemental dietary carnitine on growth and lipid metabolish of hatchery－reared sea bass［J］.Aquaculture，1986，59：177－186.

［4］ 張東鳴，黃權，周景祥.不同蛋白質水平條件下，L－肉堿對鯉魚生長和肌肉營養(yǎng)成分的影響［J］.吉林農業(yè)大學學報，2002，24（1）：82－87.

［5］ 劉建強，張志堅，王雯.膽汁酸對肝硬化大鼠腸道細菌移位和內毒素血癥的影響［J］.福建醫(yī)科大學學報，2006，40（3）：231－233.

［6］ 周書耘，劉永堅，梁海鷗，等.飼料中添加膽汁酸對軍曹魚生長及體組成的影響［J］.南方水產，2010，4（6）：22－25.