，，

1. 浙江康恩貝制藥股份有限公司(蘭溪市,321009)2. 上海大學生物醫(yī)學工程研究所(上海,200072)

0 引言

現(xiàn)代植物化學研究表明，桑枝中含有芪類、黃酮類、生物堿類，多糖類、香豆素類等多種重要活性化合物，其中的芪類化合物作為植物的抗菌素具有很好的生物活性。而桑皮苷是芪類化合物的一種，具有抗炎鎮(zhèn)痛、預防酒精肝、止咳等作用。近代藥理學研究證明，桑白皮的水或甲醇提取物具有祛痰、抗炎、降血糖、降壓、抗癌、抗菌等作用[1-2]。桑皮苷中有一主要成分為桑皮苷A，桑皮苷 A ( mulberroside A) 為二羥基芪類化合物，又稱為氧化白藜蘆醇苷。桑皮苷的分析一般采用液相色譜儀，分析相對繁瑣[3-4]。

拉曼光譜技術從物質(zhì)的分子振動光譜來識別和區(qū)分不同的物質(zhì)結構，成為研究物質(zhì)分子結構的有效手段。拉曼光譜技術對樣品制備沒有特殊要求，無損檢測，并可以直接測量水溶液樣品的拉曼光譜。拉曼光譜具有定性分析并對相似物質(zhì)進行區(qū)分的功能，并且在藥物的分析中已經(jīng)開始使用[5-6]。由于拉曼光譜的峰強度與相應分子的濃度成正比，拉曼光譜也能用于定量分析。本文嘗試采用銀溶膠作為拉曼增強基底來對中藥提取物桑皮苷樣品中的有效成分進行拉曼表面增強光譜分析。

2 實驗方法

2.1 Ag納米顆粒的制備

Ag納米顆粒的制備采用液相還原法，硝酸銀為原料，檸檬酸鈉為還原劑。取50 mL的0.001 mol/L濃度的AgNO3溶液，使用數(shù)顯恒溫磁力攪拌器加熱至沸騰，并攪拌，逐滴加入1%的檸檬酸鈉溶液，溶液始終保持沸騰且磁力攪拌60 min，得到銀溶膠，封口放入冰箱冷藏備用。

2.2 表面增強拉曼檢測

取桑皮苷加入到銀溶膠中，放置于共焦顯微拉曼光譜儀(Renishaw)上進行拉曼檢測。測試采用785 nm激光光源，光譜收集時間為10 s，功率約2 mw左右。

3 實驗結果

桑皮苷標樣由浙江康恩貝制藥股份有限公司提供，經(jīng)液相色譜測定含量為98%，測定的桑皮苷標樣的拉曼光譜見圖1。

圖1 桑皮苷標樣的拉曼光譜Fig.1 Raman spectra of mulberroside standard sample

圖2 桑皮苷制備樣的拉曼光譜Fig.2 Mulberroside preparation of Raman spectra of samples

桑皮苷的制備樣為從桑樹皮中經(jīng)乙醇提取純化而得。制備樣添加Ag納米顆粒測定拉曼光譜見圖2。

從圖1中可以看出，標樣中的峰位置有：1 633 cm-1、1 610 cm-1、1 271 cm-1、997 cm-1-1、430 cm-1等而桑皮苷制備樣的拉曼光譜(圖2)也有類似的峰出現(xiàn)之外，還有其它不同的峰出現(xiàn)，如557 cm-1,806 cm-1,837 cm-1等。其中950 cm-14為C-C骨架的伸縮振動所引起，1 606 cm-1為苯環(huán)內(nèi)部碳原子非對稱伸縮振動所引起[4]。1 601 cm-1和1 649 cm-1附近的峰作為二苯乙烯的特征峰[7-9]，在制備樣和標樣的拉曼光譜中都出現(xiàn)了類似的峰即1 601 cm-1和1 634 cm-1，說明桑皮苷中有類似有二苯乙烯結構的物質(zhì)存在，和現(xiàn)有的文獻報道也相符合，也說明可以用拉曼光譜來分桑皮苷制備樣中是否有桑皮苷主要成分。我們下一步的工作將在確定特征成分的情況下，再利用拉曼光譜苯乙烯的特征峰強度進行定量分析，這樣將會大大簡化桑皮苷制備生產(chǎn)過程中含量的檢測分析。

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