黃練 駱璐董春霞

（重慶市動物疫病預(yù)防控制中心，重慶 401120）

豬肌內(nèi)脂肪調(diào)控研究進(jìn)展

黃練 駱璐*董春霞

（重慶市動物疫病預(yù)防控制中心，重慶 401120）

豬肌內(nèi)脂肪含量在很大程度上影響著豬肉的嫩度、多汁性和風(fēng)味，本文在簡述豬肌內(nèi)脂肪含量測定技術(shù)的基礎(chǔ)上，著重闡述了心型脂肪酸結(jié)合蛋白基因（H-FABP）和脂肪細(xì)胞定向和分化因子-1基因（ADD1）等肌內(nèi)脂肪沉積主要候選基因以及microRNAs對豬肌內(nèi)脂肪沉積和代謝的調(diào)控作用，以期為利用基因調(diào)控改善豬的肌內(nèi)脂肪含量提供參考。

豬；肌內(nèi)脂肪；調(diào)控

隨著人們的消費水平逐漸提高，對豬肉的消費需求已由數(shù)量轉(zhuǎn)變?yōu)槠焚|(zhì)，目前評定豬肉品質(zhì)的指標(biāo)主要有系水力、肉色、pH、風(fēng)味和肌內(nèi)脂肪含量等，其中肌內(nèi)脂肪含量在很大程度上影響著豬肉的嫩度、多汁性、風(fēng)味[1]、大理石紋評分、失水率和滴水損失等[2]指標(biāo)。豬肌內(nèi)脂肪含量是指沉積在某塊肌肉內(nèi)的肌纖維間與肌束間的脂肪含量，肌內(nèi)脂肪含量的最佳范圍為2%～3%，屠宰后以大理石紋評分進(jìn)行度量，活體測量主要使用計算機(jī)視覺技術(shù)、B超、超聲波檢測技術(shù)、近紅外光譜技術(shù)以及高光譜成像技術(shù)等。現(xiàn)在我國普遍飼養(yǎng)引進(jìn)的大白、長白、杜洛克等豬種，而這些引進(jìn)豬種盡管瘦肉率非常高，但其肌內(nèi)脂肪含量較低，3個豬種的平均肌內(nèi)脂肪含量分別為（1.97±0.31）%、（1.69±0.52）%和（2.11±0.15）%，僅杜洛克接近最佳肌內(nèi)脂肪含量值；此外，由于在選育過程中忽視了提高肌內(nèi)脂肪含量，更使得目前商品豬的肌內(nèi)脂肪含量難以達(dá)到最佳值，從而在很大程度上影響了豬肉品質(zhì)。研究表明，肌內(nèi)脂肪含量受遺傳、營養(yǎng)水平和環(huán)境等因素的影響和調(diào)控，因此，本文著重闡述了H-FABP和ADD1等肌內(nèi)脂肪沉積主要候選基因以及microRNAs對豬肌內(nèi)脂肪沉積和代謝的調(diào)控作用，以期為利用基因調(diào)控改善豬的肌內(nèi)脂肪含量提供參考。

1 主要候選基因的調(diào)控作用

1.1 心型脂肪酸結(jié)合蛋白基因

心型脂肪酸結(jié)合蛋白基因（Heart-typefattyacid bindingprotein,H-FABP）是目前公認(rèn)的肌內(nèi)脂肪沉積候選基因，主要表達(dá)于心肌、骨骼肌和乳腺組織，其編碼的心型脂肪酸結(jié)合蛋白在細(xì)胞內(nèi)脂肪酸的運輸過程中發(fā)揮重要作用。多項研究也證實H-FABP基因存在多態(tài)位點，且其多態(tài)性影響著豬肌內(nèi)脂肪含量。許衛(wèi)華等[3]研究表明H-FABP基因HinfI位點和MspI位點均存在多態(tài)性，二者的等位基因分別為H和A，頻率分別為0.5690和0.7414，關(guān)聯(lián)分析表明AA基因型的肌內(nèi)脂肪含量顯著高于Aa基因型。朱淑斌等[4]在姜曲海豬和蘇姜豬群體中檢測出H-FABP基因內(nèi)含子1區(qū)BsmI位點存在多態(tài)性，表現(xiàn)為BB、Bb、bb三種基因型，關(guān)聯(lián)分析表明BB、Bb型的大理石紋顯著高于bb型個體，肌內(nèi)脂肪含量為BB型顯著高于Bb型和bb型個體，從而證實該位點多態(tài)性對以上兩個品種豬的肌內(nèi)脂肪含量有顯著影響。耿忠誠等[5]在三江白豬群體中檢測出H-FABP基因內(nèi)含子2區(qū)Hinf*-RFLP（BB、Bb、bb）和HaeⅢ-RFLP（DD、Dd、dd）存在多態(tài)性，關(guān)聯(lián)分析表明bb型個體的肌內(nèi)脂肪含量顯著高于Bb型個體，且dd基因型的肌內(nèi)脂肪含量顯著高于Dd和DD基因型。姜延志等[6]研究表明在雅南豬、大河豬、大河烏豬以及杜長大三元雜交豬群體中，H-FABP基因的HinfI和MspI位點均存在多態(tài)性，且對肌內(nèi)脂肪含量的影響差異顯著，各基因型肌內(nèi)脂肪含量最小二乘均值關(guān)系為Hh＞HH和bb＞Bb＞BB。高妍等[7]在松遼黑豬、軍牧1號白豬、PIC豬、長白豬、杜洛克豬、大白豬和松野雜交豬群體中均檢測出H-FABP基因HinfI位點和HaeⅢ位點存在多態(tài)性，對松遼黑豬的肌內(nèi)脂肪含量進(jìn)行了關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果表明HH基因型的肌內(nèi)脂肪含量極顯著高于Hh基因型，Hh基因型又極顯著高于hh基因型，且dd和Dd基因型極顯著高于DD基因型。而近期的研究對HinfI位點HH基因型個體的高肌內(nèi)脂肪含量進(jìn)行了深入探討，HH基因型個體的脂類分解代謝相關(guān)基因CPT-1、LPL和PPARy三種基因mRNA表達(dá)顯著高于hh基因個體，且這三個基因mRNA表達(dá)量與肌內(nèi)脂肪細(xì)胞甘油三酯含量呈正相關(guān)，表明HH基因型個體可能脂類代謝活動更強(qiáng)，從而相對增加了肌內(nèi)脂肪沉積[8]。此外滇南小耳豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞中甘油三酯的含量為HH＞Hh＞hh，HH基因型的脂類合成代謝相關(guān)基因H-FABP、A-FABP、SCD、ACC、FAS、DGAT-1mRNA表達(dá)水平顯著高于Hh、hh基因型，且這些基因mRNA的表達(dá)水平與甘油三酯含量呈極顯著的正相關(guān)，從而證實HH基因型個體肌內(nèi)脂肪含量高可能是由于其脂類代謝相關(guān)基因的高表達(dá)水平引起的[9]，以上這些使我們對基因型影響個體肌內(nèi)脂肪含量的機(jī)制有了進(jìn)一步的了解和認(rèn)識。

1.2 脂肪細(xì)胞定向和分化因子-1基因

脂肪細(xì)胞定向和分化因子-1（AdipocytoDetem inationsadDifferentiationfactor-1,ADD1）又稱固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白，是固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白家族的一員，在調(diào)控脂肪酸和膽固醇的合成過程中與固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1a、2協(xié)同發(fā)揮作用，并與脂肪分化相關(guān)的基因協(xié)調(diào)作用，是甘油三酯代謝、脂肪生成和胰島素敏感性之間連接的關(guān)鍵[10]。ADD1基因同樣也在各品種的豬群中存在基因位點的多態(tài)性，且其多態(tài)性影響著豬肌內(nèi)脂肪含量。鄧正德等[11]在大河烏豬ADD1基因Eam1104I-RFLP位點上檢測出H和T兩種等位基因，頻率分別為0.5988和0.5062，關(guān)聯(lián)分析表明HH基因型個體的肌內(nèi)脂肪含量顯著高于TT基因型個體。張永云等[12]在烏金豬和長白豬群體檢測到ADD1基因的第2外顯子存在多態(tài)性，表現(xiàn)為A、B兩種等位基因和AA、AB兩種基因型，在烏金豬中頻率分別為0.240和0.760，長白豬群體中為0.634和0.366，通過與肌內(nèi)脂肪含量關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)，ADD1基因多態(tài)性對烏金豬和長白豬肌內(nèi)脂肪含量的影響顯著，且AB＞AA（P＜0.05），提示可通過提高AB基因型的頻率來增加肌內(nèi)脂肪含量，達(dá)到改善豬肉品質(zhì)的目的。陳杰等[13]在蘇太豬群體中檢測出ADD1基因的第347、374兩個位點的多態(tài)性，關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)AB基因型的肌內(nèi)脂肪含量最高，極顯著地高于AA純合子，BB純合子的肌內(nèi)脂肪含量介于AB和AA之間，并有高于AA純合子的趨勢，但是不同基因型個體之間的背膘厚沒有顯著差異，另外，ADD1基因多態(tài)性通過何種作用機(jī)制影響豬肌內(nèi)脂肪含量還有待進(jìn)一步實驗驗證。

1.3 其他候選基因

此外，脂聯(lián)素基因、脂聯(lián)素受體基因、脂蛋白酯酶基因、黑素皮質(zhì)素受體4基因、脂肪酸合成酶基因和激素敏感脂酶基因均被證實在豬肌內(nèi)脂肪沉積過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。陳其美[14]研究表明高肌內(nèi)脂肪含量的萊蕪豬肌肉組織中的Adipo和AdipoR1基因的表達(dá)水平顯著高于低肌內(nèi)脂肪含量的萊蕪豬（P ＜0.05），這表明Adipo和AdipoR1基因的表達(dá)可能影響了肌內(nèi)脂肪的沉積，且在背膘、肌肉和肝臟三種組織中AdipoR1基因的表達(dá)均與肌內(nèi)脂肪含量呈顯著正相關(guān)（P ＜0.05），而AdipoR2基因的表達(dá)均與肌內(nèi)脂肪含量呈顯著負(fù)相關(guān)（P ＜0.05）；在肌肉中，Adipo基因的表達(dá)與肌內(nèi)脂肪含量呈顯著正相關(guān)（P ＜0.05）。廉紅霞等[15]通過對杜長大三元雜交去勢公豬（體重10～110kg）的大理石紋評分和肌內(nèi)脂肪含量以及LPL基因表達(dá)水平之間的關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)三者之間存在極顯著的正相關(guān)，表明LPL基因可能在調(diào)控豬肌內(nèi)脂肪含量中發(fā)揮作用。王卉等[16]證實烏金豬和長白豬在黑素皮質(zhì)素受體4（MC4R）基因TaqⅠ-RFLP位點均存在多態(tài)性，且烏金豬aa基因型的肌內(nèi)脂肪含量顯著高于AA和Aa基因型（P ＜0.05），這表明MC4B基因可通過不同基因型調(diào)控豬肌內(nèi)脂肪的含量。陳杰等[17]研究表明FAS與HSLmRNA的比值與肌內(nèi)脂肪含量之間存在顯著的正相關(guān)（R =0.464，P ＜0.01，P=60）；且隨著肌內(nèi)脂肪含量的增加，F(xiàn)AS與HST比值有升高的趨勢，從而推測FAS和HSL在豬背最長肌肌內(nèi)脂肪的沉積中發(fā)揮著作用。

2 MicroRNAs的調(diào)控作用

MicroRNA（miRNA）是一類長約22nt的非編碼小RNA，廣泛存在于各種生物中，能夠調(diào)節(jié)生物體生長、發(fā)育和凋亡等過程，其調(diào)節(jié)機(jī)制主要是通過堿基互補(bǔ)配對原則與靶基因的mRNA結(jié)合后形成雙鏈RNA，從而誘導(dǎo)靶mRNA降解或抑制其翻譯過程，從而對靶基因在轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行調(diào)節(jié)[18]。劉慧瑩[19]從豬肌內(nèi)脂肪組織中鑒定出包括miR-208、miR-126、miR-10a、miR-30、miR-365、miR-101等在內(nèi)的44個miRNAs高表達(dá)于肌內(nèi)脂肪含量較高的肌內(nèi)脂肪組織中，并且利用實時熒光定量PCR其中的7個高表達(dá)于高的肌內(nèi)脂肪含量中，miRNAs的這種在不同含量的肌內(nèi)脂肪中的差異表達(dá)模式可以證實miRNAs在調(diào)控豬肌內(nèi)脂肪沉積的過程中具有重要作用。

目前也有一些關(guān)于單個miRNA在豬脂肪代謝中的調(diào)控作用研究，這對揭示miRNA在豬肌內(nèi)脂肪沉積中的調(diào)控作用有重要的參考作用。李國喜[20]研究表明，miRNA-103參與脂類代謝和脂肪細(xì)胞分化、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、紅細(xì)胞生成和免疫調(diào)節(jié)，且在豬前體脂肪細(xì)胞分化過程表達(dá)水平被上調(diào)5～9倍，進(jìn)一步研究證實正常情況下miR-103可通過靶作用于維甲酸誘導(dǎo)-14（RAI14）基因促進(jìn)豬前體脂肪細(xì)胞分化。陳晨[21]研究表明：miR-183通過靶向結(jié)合細(xì)胞表面受體基因LRP6，抑制經(jīng)典的Wnt/β-catenin信號通路的激活，促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化和甘油三酯的積累，從而促進(jìn)3T3-L1前脂肪細(xì)胞的脂肪形成，而miR-135a通過直接靶向作用APC基因阻礙3T3-L1前脂肪細(xì)胞的分化和脂肪的形成。劉帥[22]研究證實，在豬脂肪細(xì)胞形成過程中，miR-191起著顯著的負(fù)調(diào)控作用，并參與調(diào)節(jié)成脂關(guān)鍵基因C/EBPβ對豬脂肪細(xì)胞形成的影響，為證實miR-191在豬脂肪沉積機(jī)理中的作用奠定了基礎(chǔ)。以上研究結(jié)果均證實miRNAs在豬脂肪代謝過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，但目前對miRNAs的這種調(diào)控作用的了解仍處于起始階段，還需要進(jìn)一步更為全面的研究miRNA在豬脂肪代謝中的調(diào)控作用，以期推動利用miRNA對豬肌內(nèi)脂肪含量進(jìn)行調(diào)控。

3 小結(jié)

綜上所述，在檢測豬肌內(nèi)脂肪含量中利用現(xiàn)代化的可視技術(shù)具有較大的應(yīng)用前景，且H-FABP和ADD1等主效基因在豬肌內(nèi)脂肪沉積過程中具有重要作用，但其不同基因型對豬肌內(nèi)脂肪沉積的調(diào)控機(jī)制還有待進(jìn)一步研究；此外，miRNAs對豬脂肪代謝的調(diào)控作用將會是豬肌內(nèi)脂肪調(diào)控研究中的一個熱點。

[1]王小舟.豬肌內(nèi)脂肪沉積的影響因素及其研究進(jìn)展[J].中國豬業(yè),2013(5):61-63.

[2]譚林,姜海龍.肌內(nèi)脂肪含量與豬肉品質(zhì)的相關(guān)性分析[J].飼料博覽,2010(12):11-13.

[3]許衛(wèi)華,康麗珠,林秀嬌,等.槐豬H-FABP基因多態(tài)性及其與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)性研究[J].福建師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2014,30(2):76-80.

[4]朱淑斌,趙旭庭,周春寶,等.姜曲海豬H-FABP基因內(nèi)含子1多態(tài)性與肉質(zhì)性狀的相關(guān)分析[J].中國畜牧雜志,2013,49(13): 12-15.

[5]耿忠誠,陳建華.三江白豬H-FABP基因多態(tài)性和肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)性分析[J].中國畜牧雜志,2007,43(15):7-12.

[6]姜延志,劉曉研,李芳瓊,等.豬H-FABP基因多態(tài)性及其與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)研究[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報,2010,41(7):792-796.

[7]高妍,張永宏,姜寧,等.豬H-FABP基因遺傳多態(tài)性及與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)分析[J].中國獸醫(yī)學(xué)報,2008,28(5):599-605.

[8]江佳偉,黃英,楊明華,等.H-FABP不同基因型對滇南小耳豬脂肪分解代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報,2013,44 (6):837-842.

[9]李志娟,高士爭,潘洪彬,等.不同H-FABP基因型滇南小耳豬脂類合成代謝相關(guān)基因表達(dá)水平研究[J].中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報, 2013,35(5):661-667.

[10]張鐵贏,邊連全.豬脂肪細(xì)胞定向和分化因子1基因的研究進(jìn)展[J].豬業(yè)科學(xué),2013(5):106-108.

[11]鄧正德,連林生.大河烏豬鈣蛋白酶抑制蛋白基因、脂肪細(xì)胞定向和分化因子1基因多態(tài)性及其與肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析[J].養(yǎng)豬,2012(3):57-59.

[12]張永云,黃英,楊明華,等.ADD1基因多態(tài)性與烏金豬肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)系[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2013,28(2):196-200.

[13]陳杰,趙茹茜,楊曉靜,等.ADD1基因PCR-SSCPs標(biāo)記與豬肌內(nèi)脂肪含量及背膘厚的關(guān)系[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2004,27 (3):66-69.

[14]陳其美.豬脂聯(lián)素和脂聯(lián)素受體基因的mRNA表達(dá)對肌內(nèi)脂肪含量和背膘厚的影響[D].泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2009.

[15]廉紅霞,盧德勛,高民.豬生長肥育期背最長肌LPL基因表達(dá)與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)研究[J].畜牧與獸醫(yī),2007(12):32-36.

[16]王卉,郭雷,高士爭,等.黑素皮質(zhì)素受體4基因多態(tài)性及與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)性研究[J].云南畜牧獸醫(yī),2010(2):1-3.

[17]陳杰,楊曉靜,佟輝,等.FAS和HSLmRNA在豬背最長肌的表達(dá)及其與肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)系[J].農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報,2004,12 (4):422-426.

[18]冉茂良,陳斌,尹杰,等.睪丸發(fā)育和精子生成相關(guān)miRNA研究進(jìn)展[J].遺傳,2014,36(7):646-654.

[19]劉慧瑩.豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)miRNA的鑒定及其功能研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2014.

[20]李國喜.豬脂肪組織發(fā)育相關(guān)miRNA的鑒定及miR-103生物學(xué)功能的初步研究[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2011.

[21]陳晨.miR-135a和miR-183對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化及脂肪形成的調(diào)控作用研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2013.

[22]劉帥.MicroRNA-191在豬脂肪細(xì)胞形成中的作用及機(jī)理研究[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2013.

辛國昌：2014年生豬市場供需形勢及2015年春節(jié)前生豬市場價格走勢

【本刊訊】2014年9月25日，第五屆中國獸醫(yī)大會在山東青島召開。會議期間，農(nóng)業(yè)部畜牧業(yè)司監(jiān)測分析處處長辛國昌就2014年生豬市場供需形勢及2015年春節(jié)前生豬市場價格走勢進(jìn)行了分析和預(yù)測。

據(jù)辛國昌介紹，2011年出欄一頭肥豬（以100kg計）賺415元，而2012年、2013年連續(xù)兩年行情慘淡，2012年平均出欄一頭肥豬僅賺75元，2013年平均出欄一頭肥豬僅賺50元。按照以往大約三年一個豬周期的規(guī)律，2014年應(yīng)該是養(yǎng)豬的一個好年頭，但2014年春節(jié)前生豬市場價格在消費旺季反常下降。辛國昌認(rèn)為，出現(xiàn)反常的主要原因在于國家宏觀經(jīng)濟(jì)下行、集團(tuán)采購豬肉減少而導(dǎo)致豬肉消費需求低迷不振。

但他同時告訴大家不必悲觀，因為就生豬市場價格監(jiān)測情況看，本輪“豬周期”已經(jīng)探底。受生豬和能繁母豬存欄持續(xù)下降以及消費需求開始有較大改觀等因素影響，生豬市場價格在下降32個月后，自2014年5月份開始震蕩上行。2014年8月份和9月份平均出欄一頭肥豬可分別盈利50元和68元，2014年10月份第3周全國平均活豬價格為14.43元/kg，雖連續(xù)6周小幅下降，但大部分養(yǎng)殖場（戶）基本可以實現(xiàn)盈虧平衡。

辛國昌認(rèn)為，雖然目前來看，生豬市場價格上行的過程還很緩慢，但畢竟已經(jīng)進(jìn)入上升通道，后市可觀。而對后期走勢的判斷，需要充分考慮當(dāng)前及未來一段時間內(nèi)的生豬生產(chǎn)和消費形勢。

從生產(chǎn)方面看，能繁母豬存欄從2013年9月份開始同比下降，至今整整一年，近期下降幅度達(dá)到連續(xù)7個月超過5%的預(yù)警值，比前四年同期平均水平下降8.1%；但母豬生產(chǎn)水平比前四年平均水平提高了1.9%，達(dá)到每頭母豬年提供13.64頭肥豬，同時肥豬出欄活重增加3.2%。能繁母豬存欄減少，將導(dǎo)致生豬出欄量相應(yīng)減少；而母豬生產(chǎn)水平提升、肥豬出欄活重增加又可引起豬肉產(chǎn)量有所增加，這一減一增，經(jīng)綜合測算后，2015年一季度，也即元旦后春節(jié)前，豬肉上市供應(yīng)量可能會下降2%～3%；從消費方面看，中央出臺了一系列經(jīng)濟(jì)微刺激政策，宏觀經(jīng)濟(jì)下行壓力減小，經(jīng)濟(jì)趨穩(wěn)將帶動消費需求，同時四季度及春節(jié)前又是豬肉消費旺季。

因此，考慮上述生豬市場供需形勢，2015年春節(jié)前豬價可能會上揚，甚至在2015年上半年，養(yǎng)豬也能迎來一波好行情。

S828；S814.1

B

1673-4645(2014)11-0036-04

2014-09-25

黃練（1983-），男，碩士，主要從事動物疫病防控工作

*通訊作者：駱璐（1983-），女，碩士，主要從事重大動物疫病防控工作