高艷青

三七總皂苷對(duì)缺血性再灌注的研究進(jìn)展

高艷青

三七總皂苷；缺血性再灌注；研究進(jìn)展

三七為五加科植物三七（panaxnotoginseng (Burk.)F.H.Chen）的干燥根及根莖，云南是其主產(chǎn)地，同時(shí)在貴州、四川、江西、廣西、湖北等地區(qū)也有栽培。三七是古代治療金瘡和跌打損傷的中藥，具有滋補(bǔ)強(qiáng)壯、止痛消腫、活血化瘀的功效。主要活性成分三七總皂苷（panaxnotoginsengsaponin,PNS）具有降低血壓、擴(kuò)張外周血管的作用，還能夠?qū)ρǖ男纬稍斐梢种?。本文就?年來三七總皂苷在缺血性再灌注方面的研究情況做一綜述。

1 三七總皂苷的缺血性再灌注藥理學(xué)研究

1.1 對(duì)腦缺血再灌注的研究 缺血再灌注會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞氧自由基生成增多，損傷膜磷脂，使鈣離子超載，對(duì)蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞外基質(zhì)均產(chǎn)生損傷，導(dǎo)致代謝障礙，腦功能障礙等。蔣媛靜[1]研究血栓通粉針（三七總皂苷）對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷神經(jīng)細(xì)胞Bcl-2表達(dá)的影響，方法：60只大鼠被隨機(jī)分成血栓通大劑量組、血栓通小劑量組、川芎嗪組、模型組、假手術(shù)組，采用大腦中動(dòng)脈栓塞法建立大鼠腦缺血再灌注損傷模型，用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腦組織中Bcl-2表達(dá)。結(jié)果缺血再灌注組大鼠與假手術(shù)組比較、Bcl-2蛋白陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目均增多，與缺血再灌注組比較，血栓通大劑量組、川芎嗪組Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增多（P＜0.01）；與血栓通小劑量組比較，血栓通大劑量組Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞增高差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。血栓通大劑量組與川芎嗪組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論腦缺血再灌注24 h后Be1-2蛋白表達(dá)增強(qiáng)．血栓通大劑量組可上調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)，能減輕腦組織的缺血再灌注損傷，改善神經(jīng)功能缺失，其作用機(jī)制可能與增加Bcl-2表達(dá)有關(guān)。這可能是血栓通粉針（三七總皂苷）治療缺血性腦血管病的機(jī)制之一。

張學(xué)敏等[2]觀察血栓通粉針（三七總皂苷）對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦組織中細(xì)胞間黏附因子（ICAM-1）表達(dá)的影響。方法：45只Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、治療組，利用線栓法制作大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型，利用免疫組化染色觀察再灌注后ICAM-1的表達(dá)情況，比較不同試驗(yàn)組相同灌注點(diǎn)ICAM-1表達(dá)的變化。結(jié)果局灶性腦缺血再灌注后，在相同時(shí)間點(diǎn)模型組ICAM-1的表達(dá)均較假手術(shù)組升高，治療組均低于模型組。血栓通粉針可能通過降低ICAM-1在缺血區(qū)的表達(dá)，抑制其局部的炎性反應(yīng)，對(duì)抗腦缺血再灌注損傷。

1.2 對(duì)腎缺血再灌注的研究 唐洪泰等[3]選用SD大鼠，隨機(jī)分成假傷組、腎臟缺血-再灌注損傷對(duì)照組、三七皂苷R1治療組1[20 mg/（kg·d）]和三七皂苷R1治療組2[（40 mg/（kg·d）]，每組各6只。腎臟缺血-再灌注損傷后72小時(shí)處死大鼠，并采集血液和腎臟組織標(biāo)本。通過血肌酐水平檢測(cè)和組織學(xué)檢查觀察腎臟損傷情況，通過分子生物學(xué)方法觀察腎臟組織細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血肌酐水平和組織學(xué)結(jié)果提示三七皂苷R1可以減輕腎臟缺血-再灌注損傷。NR1可以明顯減輕由于缺血-再灌注損傷所引起的促炎性細(xì)胞因子TNF-α及髓過氧化合物酶活性的升高、p38磷酸化和NF-κB的活化，同時(shí)促進(jìn)抗凋亡細(xì)胞因子bcl-2的表達(dá)。提示三七皂苷R1可能是通過抑制p38和NF-κB，減輕炎癥反應(yīng)、減少細(xì)胞凋亡來減輕腎臟缺血-再灌注損傷的。

1.3 對(duì)肺缺血再灌注的研究 倪世容等[4]采用健康日本大耳白兔84只，隨機(jī)分為對(duì)照組、肺缺血再灌注1、3、5 h組和相應(yīng)三七總皂甙干預(yù)組。復(fù)制肺缺血再灌注損傷模型。采用原位缺口末端標(biāo)記（TUNEL）法、聚丙烯酰胺凝膠電泳觀測(cè)肺組織細(xì)胞凋亡，原位雜交技術(shù)檢測(cè)肺組織細(xì)胞Fas/FasL系統(tǒng)和caspase-3基因表達(dá)。結(jié)果肺缺血再灌注組肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)，肺缺血再灌注5 h組（22.08±1.93）；對(duì)照組（2.04±0.67）、Fas/FasL和caspase-3基因表達(dá)，肺缺血再灌注5 h組（0.241 ±0.029）；對(duì)照組：（0.121±0.015）均明顯高于對(duì)照組（P＜0.01），并出現(xiàn)電泳梯形條帶結(jié)構(gòu)；三七總皂甙干預(yù)組Fas/FasLmRNA及其caspase-3的表達(dá)，三七總皂甙干預(yù)5 h組（12.58±1.82）；肺缺血再灌注5 h組（22.08±1.93）也明顯低于缺血再灌注組（P＜0.01）。

1.4 對(duì)胃缺血再灌注的研究 鄧海洪[5]將藥物采用0.9%氯化鈉注射液配制成相應(yīng)濃度，給藥體積均為0.5 ml/100 g。連續(xù)給藥3 d，每天1次；第1、2、3次給藥分別在造模前30 min，第4、5次給藥分別在造模后6和12h。對(duì)照組給予注射同等濃度的0.9%氯化鈉注射液。結(jié)果試驗(yàn)組6-Keto- PGFIa含量明顯升高，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；試驗(yàn)組死亡率明顯低于對(duì)照組，兩組患者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。三七總皂苷能通過降低TXA 合成，升高PGI，達(dá)到對(duì)局灶性胃缺血再灌注損傷的保護(hù)。

1.5 對(duì)小腸缺血再灌注的研究 錢忠義等[6]采用腸系膜上動(dòng)脈夾閉-松夾方式復(fù)制SD大鼠IR模型。檢測(cè)血漿脂多糖和D-乳酸含量；取血液、肝、脾、腸系膜淋巴結(jié)做細(xì)菌培養(yǎng)；免疫組織化學(xué)檢測(cè)小腸組織中的NF-kB及TNF-α表達(dá)；采用脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)小腸組織細(xì)胞凋亡。結(jié)果PNS組肝、脾、腸系膜淋巴結(jié)及血液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性數(shù)明顯低于模型組（P＜0.05）；三七總皂苷200 mg/kg和400 mg/kg PNS組血漿脂多糖濃度分別是461 EU/L，320 EU/L，與模型組（570 EU/L）比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；PNS組的血漿D-乳酸濃度分別是0.37 mmol/L、0.31 mmol/L與模型組（0.44 mmol/L）比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；三七總皂苷也可降低NF- kB和TNF-α的表達(dá)，且細(xì)胞凋亡數(shù)密度低于模型組。三七總皂苷通過降低NF-kB和TNF-α表達(dá)，減輕細(xì)胞因子對(duì)小腸的損傷，減少小腸黏膜細(xì)胞凋亡，發(fā)揮對(duì)小腸IR損傷的保護(hù)作用。

1.6 對(duì)上肢缺血再灌注的研究 陳麗玲等[7]通過分組（三七治療組、常規(guī)治療組）治療15例被籠底板卡住的猴子，前臂缺血再灌注治愈情況的比較，說明臨床上采用三七皂苷治療肢體缺血再灌注效果明顯；對(duì)細(xì)胞凋亡有一定保護(hù)作用。與對(duì)照組比較，總有效率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。三七皂苷對(duì)猴子前肢缺血再灌注損傷有良好的保護(hù)作用。

2 結(jié)語(yǔ)與展望

綜上所述，三七總皂苷在缺血性再灌注方面研究較多，主要集中在腦缺血再灌注的研究，較少涉及機(jī)理，尚未深入到細(xì)胞和分子水平，臨床試驗(yàn)也未進(jìn)行多中心、大樣本、雙盲雙模擬的試驗(yàn)，缺乏循證醫(yī)學(xué)的支持，今后應(yīng)進(jìn)一步從細(xì)胞水平、分子水平或基因水平揭示其藥理作用機(jī)制，同時(shí)也應(yīng)進(jìn)行提取工藝的改進(jìn)，為三七的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

[1] 蔣媛靜.血栓通粉針(三七總皂苷)對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后Bcl-2蛋白表達(dá)的影響[J].中國(guó)中醫(yī)急癥,2013,22(9):1546-1546.

[2] 張學(xué)敏,馬風(fēng)杰,李東洪,等.血栓通粉針對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦組織細(xì)胞間黏附因子表達(dá)的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2013,22(5):477-477.

[3] 唐洪泰,劉文軍,賈一韜,等.三七提取物Notoginsenoside R1減輕大鼠腎臟缺血-再灌注損傷[C].中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2012年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編,北京,2012:259-259.

[4] 倪世容,徐正衸,王鑫,等.三七總皂甙降低兔肺缺血再灌注損傷和抑制細(xì)胞凋亡[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,32(2):170-170.

[5] 鄧海洪.三七總皂苷對(duì)局灶性胃缺血再灌注血漿前列環(huán)素和血栓素A2水平的影響[J].現(xiàn)代診斷與治療,2013,22(5):477-477.

[6] 錢忠義,申麗娟,王芳,等.三七總皂苷預(yù)處理對(duì)大鼠小腸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J].世界華人消化雜志,2012,20(14):1178-1178.

[7] 陳麗玲,劉汝文,劉宗平,等.三七皂苷對(duì)猴子上肢缺血再灌注的臨床應(yīng)用[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘,2012,28(1):171-171.

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1673-5846(2014)09-0287-02

湖北鄂州鄂鋼醫(yī)院藥劑科，湖北鄂州 436000