謝顯珍 樊青玲 熊 峻 肖 玥
(湖南省常德職業(yè)技術(shù)學(xué)院,常德415000)
指紋圖譜技術(shù)在中藥鑒別中的應(yīng)用價值※
謝顯珍 樊青玲 熊 峻 肖 玥
(湖南省常德職業(yè)技術(shù)學(xué)院,常德415000)
中藥指紋圖譜分析是一種通過對于復(fù)雜中藥藥物體系整體上進(jìn)行鑒別與研究的技術(shù)工具,對當(dāng)今中藥乃至天然產(chǎn)物質(zhì)量評價有很重要的作用,它的廣泛應(yīng)用使得中藥鑒別技術(shù)更加科學(xué),完善,實用和先進(jìn)。本文結(jié)合指紋圖譜技術(shù)在中藥鑒別中的應(yīng)用淺談一些粗淺的認(rèn)識。
指紋圖譜技術(shù);中藥鑒別;應(yīng)用價值
19世紀(jì)末20世紀(jì)初,指紋鑒定誕生于當(dāng)時的法醫(yī)學(xué)和犯罪學(xué)。人類的指紋是由各種不連貫的點和線紋構(gòu)成,它有三種不同的模式:拱形,螺紋形和環(huán)形,從而使得每個人的指紋都擁有絕對唯一的特點,對于法醫(yī)學(xué)和犯罪學(xué)來說,中藥指紋圖譜技術(shù)不是一個概念的重復(fù)。對于中藥而言,它不是簡簡單單的研究一個方面來判斷其優(yōu)劣。它講求的是物種的專屬與唯一的特性。中藥鑒定學(xué)是通過去研究與分析中藥中藥物的質(zhì)量和品種的差異,擴大和尋找新藥源的一種學(xué)科。指紋圖譜可根據(jù)檢測時采用的分析手段的差異分為中藥化學(xué)成分指紋圖譜和中藥生物技術(shù)指紋圖譜。中藥化學(xué)成分指紋圖譜可分為色譜指紋圖譜與光譜指紋圖譜等;而中藥生物技術(shù)指紋圖譜也可分為:中藥DNA指紋圖譜,中藥電泳指紋圖譜等。
中藥指紋圖譜是一種綜合的量化的色譜的鑒別手段,可以用來分析原料藥材的種類和質(zhì)量。如今色譜指紋圖譜作為質(zhì)量控制方法已經(jīng)受到了國家藥監(jiān)部門的認(rèn)可。指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)是控制中藥質(zhì)量的先進(jìn)技術(shù),它促使了中藥生產(chǎn)更加嚴(yán)格更加標(biāo)準(zhǔn),使中藥的質(zhì)量越發(fā)受到重視,這對于讓中藥走向全球,讓中藥造福人類有非常巨大的長遠(yuǎn)價值和顯著意義。同時,色譜指紋圖譜技術(shù)也是推動中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵技術(shù),雖然目前指紋圖譜技術(shù)在中藥研究領(lǐng)域中的應(yīng)用還不是很完美,但是大力去開展該技術(shù)的研究與產(chǎn)業(yè)實踐,結(jié)合國際上現(xiàn)有的成果,就能夠不斷完善指紋圖譜質(zhì)量控制技術(shù)體系。
2.1中藥DNA指紋圖譜對于中藥,特別是對于植物藥和動物藥的鑒定中,DNA指紋圖譜技術(shù)發(fā)揮了在品種定源和基源鑒定分析中的強大優(yōu)勢,當(dāng)今DNA指紋圖譜技術(shù)主要分為多聚酶鏈反應(yīng)(PCR),隨機擴增多態(tài)性(RAPD),DNA片段分析技術(shù)(RELP),任意引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(AP-PCR)等。
2.2中藥電泳指紋圖譜中藥電泳鑒別法是一種根據(jù)將動植物中藥細(xì)胞中含有穩(wěn)定和特異的蛋白質(zhì)分子作為指標(biāo),來從分子的層面進(jìn)行中藥鑒定的一種方法。它是由山東中醫(yī)藥大學(xué)石俊英教授研發(fā)的一種中藥鑒定新技術(shù)。中藥電泳鑒別法解決了以往中藥鑒別方法專屬性低下,分辨率不強和相似藥品不易辨別的重大問題。
2.3中藥光譜指紋圖譜中藥光譜指紋圖譜可以分為:X-射線,紅外(IR),紫外(UV)衍射等多種方法,它是根據(jù)不同產(chǎn)品品種與產(chǎn)地的差異,而造成光譜性質(zhì)的不同來判斷藥材的品種與質(zhì)量。
2.4中藥色譜指紋圖譜中藥色譜指紋圖譜法是通過利用色譜方法和其他連用技術(shù)建立的同種中藥或制劑所共有的組分群體的特征圖譜或圖像的方法。當(dāng)今,中藥色譜指紋圖譜就是普遍意義上所指的中藥指紋圖譜,它包含:氣相色譜(GC)指紋圖譜,薄層色譜(TLC)指紋色譜,高效毛細(xì)管電泳(HOCE)指紋圖譜,高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜等。
2.4.1氣相色譜(GC)指紋圖譜氣相色譜(GC)一般與質(zhì)譜檢測器(MS)聯(lián)用,具有靈敏度高,分析速度快,樣品用量少的特點,一般適用于易揮發(fā)性化學(xué)成分的分離鑒定,對于滿足中藥復(fù)雜成分同時定性的需求發(fā)揮了重大的作用,并且在指紋圖譜的研究上有了很大的價值。
2.4.2薄層色譜(TLC)指紋圖譜薄層色譜是很多國家藥典中最經(jīng)常用的鑒別方法,因為它具有操作簡單,分析速度快,經(jīng)濟,結(jié)果形象直觀,易于比較等特點,所以受到廣泛的歡迎。在薄層色譜法中可以通過峰值,峰位和斑點顏色等參數(shù)作宏觀的比較。
2.4.3高效毛細(xì)管電泳(HPCE)指紋圖譜高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜法有分離效率高,速度快,分離模式多,使用樣品和試劑量少,適用范圍廣的特點。通過運用高效毛細(xì)管電泳(HPCE)指紋圖譜建立了冬蟲夏草指紋圖譜,可以幫助鑒別其質(zhì)量的優(yōu)劣性。
2.4.4高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜高效液相色譜是依據(jù)樣品在流動相和固定相吸附能力的差異而實現(xiàn)分離的一類液相分離技術(shù),它是以硅膠等色譜柱作為分離通道,并以高壓泵作為驅(qū)動力。是目前應(yīng)用最多的一類,具有重復(fù)性好,分析速度快,樣品處理簡單等特點。根據(jù)對HPLC指紋圖譜,模糊聚類分析,為中藥樣品的鑒定提供了新方法。
指紋圖譜技術(shù)在中藥鑒別中發(fā)揮了無可替代的作用,解決了人們多年對于中藥藥物分析的重大難題,但是隨著當(dāng)今醫(yī)學(xué)水平的發(fā)展,單純的利用指紋圖譜技術(shù)難以全面地反映出藥物的信息。所以,應(yīng)該更多地將它與其他技術(shù)聯(lián)用,從而發(fā)揮出它在中藥鑒定方面的更大優(yōu)勢。
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10.3969/j.issn.1672-2779.2014.07.073
:1672-2779(2014)-07-0104-01
楊 杰 本文校對:肖 霞
2013-12-21)
湖南常德職業(yè)技術(shù)學(xué)院院級科研項目[No:ZY1336]