趙 秀，李 青，段宏泉，喬 衛(wèi)

(天津醫(yī)科大學(xué)，天津300070)

糖尿病是臨床常見(jiàn)的代謝性疾病，是繼癌癥、心腦血管疾病之后人類健康的第三大殺手［1］。2011年國(guó)際糖尿病聯(lián)盟的一項(xiàng)調(diào)查研究表明，全世界糖尿病患者人數(shù)已經(jīng)達(dá)到3.66億，而發(fā)展中國(guó)家發(fā)病趨勢(shì)逐漸高于發(fā)達(dá)國(guó)家［2］。目前，我國(guó)已經(jīng)確診的糖尿病患者數(shù)量高達(dá) 9 240萬(wàn)人，發(fā)病率高達(dá)9.7%［3］。因此，對(duì)于糖尿病的預(yù)防與控制成為目前醫(yī)療工作者的研究重點(diǎn)之一，全世界研究者都致力于尋找新的更有效的血糖控制品。本研究觀察了蒲公英水煎劑聯(lián)合委陵菜黃酮對(duì)糖尿病小鼠血糖、血脂的影響，以期為抗糖尿病新藥的研究提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠，雌雄兼用，體質(zhì)量(23±2)g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，室溫(21±3)℃，相對(duì)濕度64%～72%。日光照12 h，自由飲食與攝水。

1.2 藥品、試劑、儀器 委陵菜黃酮，自制，高效液相色譜法測(cè)定其質(zhì)量分?jǐn)?shù)為94.38%(峰面積歸一化法);蒲公英水煎劑，自制，準(zhǔn)確秤取1 kg蒲公英，放于蒸煮容器后加蒸餾水浸泡1 h，煮沸30 min后過(guò)濾。藥渣再加蒸餾水繼續(xù)煎煮，煮沸20 min后過(guò)濾，兩次濾液合并濃縮成每毫升相當(dāng)于生藥1 g的藥液;蒲公英與委陵菜黃酮聯(lián)合劑，自制，按蒲公英水煎劑與委陵菜黃酮1∶1比例混合。四氧嘧啶(Sigma公司)，TG試劑盒、總膽固醇TC試劑盒(中生北控生物科技有限公司)。血糖儀(美國(guó)強(qiáng)生One-touch Ultra，穩(wěn)豪型)，低速自動(dòng)平衡離心機(jī)(河北省安新縣離心機(jī)廠)，UV-240紫外分光光度計(jì)(日本島津)。

1.3 模型制備 參照文獻(xiàn)［4］。取昆明種小鼠40只，雌雄各半。將小鼠禁食(不禁水)約12 h后，尾尖靜脈注射新配制的四氧嘧啶溶液65 mg/kg，60 h后再禁食(不禁水)12 h，剪尾尖取血，用血糖儀測(cè)血糖值，血糖值＞11.1 mmol/L的小鼠定性為模型制備成功。

1.4 動(dòng)物分組及給藥方法 將40只糖尿病模型小鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、委陵菜組、蒲公英組、聯(lián)合劑組各10只，另取重量最相近的正常昆明種小鼠10只作為空白對(duì)照組。每天對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃1次，連續(xù)15 d。其中模型對(duì)照組予蒸餾水10 mL/kg，委陵菜組予委陵菜黃酮0.8 mg/kg，蒲公英組予蒲公英水煎劑1.25 g/kg，聯(lián)合劑組及空白對(duì)照組均予蒲公英與委陵菜黃酮聯(lián)合劑1.25 g/kg。

1.5 檢測(cè)方法 小鼠末次給藥前禁食不禁水，12 h后剪斷尾尖取血，取血糖儀測(cè)量血糖值;眼眶靜脈叢取血，離心10 min，取血清，按試劑盒使用方法檢測(cè)總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以±s表示，采用單因素方差分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組給藥前后體質(zhì)量、空腹血糖比較 結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 各組給藥前后體質(zhì)量和空腹血糖比較(±s)

表1 各組給藥前后體質(zhì)量和空腹血糖比較(±s)

注:與模型對(duì)照組比較，○P＜0.05，●P＜0.01;與蒲公英組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01;與委陵菜組比較，◇P＜0.05，◆P＜0.01

組別 體質(zhì)量(g)給藥前 給藥后空腹血糖(mmol/L)給藥前 給藥后聯(lián)合劑組 22.71±2.41 28.83±5.32 29.85±4.89 19.68±4.31●△◇模型對(duì)照組 22.56±2.14 28.79±3.43 28.69±4.19 26.41±4.17△◇蒲公英組 23.03±2.36 29.16±2.86 29.76±3.52 21.21±3.04○委陵菜組 24.15±1.53 28.73±3.42 29.29±3.02 22.21±4.91○空白對(duì)照組 28.23±2.45○ 28.63±2.73 6.54±2.53○▲◆ 6.68±1.27○▲◆

2.2 各組給藥后血清TC、TG水平比較 結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各組給藥后血清TC、TG水平比較(mmol/L，±s)

表2 各組給藥后血清TC、TG水平比較(mmol/L，±s)

注:與模型對(duì)照組比較，○P＜0.05，●P＜0.01;與蒲公英組比較，△P＜0.01;與委陵菜組比較，◇P＜0.05，◆P＜0.01

組別TC TG聯(lián)合劑組 3.34±0.87●△ 1.23±0.98○模型對(duì)照組 6.48±2.59◆ 2.48±2.09◇蒲公英組 6.14±2.28◆ 1.18±0.57○◇委陵菜組 3.89±1.11●△ 1.37±0.53○空白對(duì)照組 2.25±0.49●△◆ 0.97±0.51○◇

3 討論

糖尿病是多種原因造成的臨床常見(jiàn)的代謝性疾病，其病理過(guò)程復(fù)雜，其特點(diǎn)是糖類、蛋白質(zhì)以及脂肪的代謝紊亂。糖尿病可并發(fā)心腦血管疾病、腎臟疾病、神經(jīng)病變及糖尿病足等［4］。近年研究［5，6］證實(shí)，糖尿病的發(fā)生、發(fā)展與脂代謝紊亂相關(guān)。吳道愛(ài)等［7］對(duì)糖尿病患者的血脂進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)照健康人群，發(fā)現(xiàn)糖尿病患者血脂指標(biāo)均有顯著增高，證實(shí)了糖尿病的發(fā)生、發(fā)展與脂代謝紊亂相關(guān)。隨著糖尿病病程的發(fā)展，其可并發(fā)其他系統(tǒng)各種疾病。近年有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，如果糖尿病患者伴隨TG升高，那其脂肪肝、高血壓、冠心病的并發(fā)率明顯增高;如糖尿病患者伴隨TC升高，其眼底病變并發(fā)率顯著升高［8］?？梢?jiàn)脂代謝紊亂是糖尿病并發(fā)血管病變的重要原因之一，因此對(duì)糖尿病的防治不能只是著眼于對(duì)血糖的控制，更應(yīng)該積極預(yù)防和改善患者的血脂代謝紊亂問(wèn)題。如何開(kāi)發(fā)利用既能有效控制患者血糖水平，又能同時(shí)取得很好控制血脂效果的新藥，成為當(dāng)前研究者共同追求的目標(biāo)。近年來(lái)，中草藥提取物的研究為糖尿病新藥的研究提供了不少新的思路。

委陵菜屬于薔薇科屬植物，其能抗瘧疾、咳嗽，還具有降低血糖、抗病毒以及抗炎的作用［9～13］。有研究者對(duì)其進(jìn)行提取研究，發(fā)現(xiàn)其主要成分為萜類物質(zhì)、黃酮、甾體類物質(zhì)以及酚類［14，15］。目前，學(xué)界研究普遍認(rèn)同其降血糖有效成分為委陵菜黃酮［16］。蒲公英為菊科植物蒲公英、堿地蒲公英或同屬數(shù)種植物的干燥全草，具有清熱解毒、散結(jié)消腫以及抑菌、抗炎、降血脂等作用［17，18］。研究發(fā)現(xiàn)，蒲公英水煎劑能有效降低實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠的血糖水平。然而，針對(duì)這兩種藥物的研究，主要集中在其提取工藝以及單獨(dú)運(yùn)用于糖尿病的層面，關(guān)于兩者聯(lián)合運(yùn)用于糖尿病的研究未見(jiàn)報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，余4組給藥前空腹血糖較空白對(duì)照組升高，余4組給藥后空腹血糖水平較模型組降低，模型對(duì)照組給藥后空腹血糖較蒲公英組升高，聯(lián)合劑組、空白對(duì)照組空腹血糖較蒲公英組降低，聯(lián)合劑組、空白對(duì)照組給藥后空腹血糖較委陵菜組降低。說(shuō)明聯(lián)合劑的降糖作用優(yōu)于單獨(dú)使用二藥，這可能與二者都含有能降低血糖的成分，協(xié)同使用，能提高療效相關(guān)。本研究還發(fā)現(xiàn)，蒲公英組TG水平較模型對(duì)照組降低，委陵菜組、聯(lián)合劑組、空白對(duì)照組TC及TG水平較蒲公英組降低;委陵菜組、聯(lián)合劑組、空白對(duì)照組TC水平較蒲公英組降低;模型對(duì)照組TC、TG及蒲公英組TC水平較委陵菜組升高，蒲公英組、空白對(duì)照組TG水平較委陵菜組降低。說(shuō)明聯(lián)合劑與委陵菜黃酮的降脂作用一樣，但是優(yōu)于單獨(dú)使用蒲公英水煎劑，這可能與委陵菜不具有降低血脂的功效，而蒲公英具有降低血脂的功效相關(guān)，而兩藥協(xié)同使用，相當(dāng)于中醫(yī)相使的配伍意義，能產(chǎn)生提高療效的效應(yīng)，然而其具體作用機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究。

總之，蒲公英水煎劑聯(lián)合委陵菜黃酮是理想的抗糖尿病方式，不僅能有效降低血糖值，還能改善血脂代謝紊亂。

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