賈寶珠，鮑金勇，鄭曉儀，杜 冰，陳慶發(fā)，楊公明

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，廣東廣州510642）

香蕉皮原花色素提取工藝的研究

賈寶珠，鮑金勇，鄭曉儀，杜 冰，陳慶發(fā)，楊公明*

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，廣東廣州510642）

以香蕉皮為原料，采用溶劑提取法和超聲波輔助提取法對原花色素的提取工藝進(jìn)行研究。結(jié)果表明，溶劑提取法取原花色素的最佳工藝條件為：丙酮體積分?jǐn)?shù)75%，料液比1∶12g/mL，提取溫度50℃，提取時間90min，原花色素提取得率為0.459%，純度為6.01%；超聲波輔助提取法原花色素的最佳工藝條件為：丙酮體積分?jǐn)?shù)75%，料液比1∶10g/mL，超聲溫度50℃，超聲時間35min，原花色素提取得率為0.685%，純度為9.57%。與單純的溶劑提取法相比，超聲輔助提取法提取得率更高、產(chǎn)品純度更好，是一種高效、節(jié)能的提取方法。

原花色素，香蕉皮，超聲輔助提取，工藝優(yōu)化

香蕉是世界“四大水果”之一，在熱帶和亞熱帶地區(qū)廣泛種植[1]。近年來，隨著低溫加工技術(shù)的應(yīng)用和香蕉抗性淀粉等新產(chǎn)品的開發(fā)上市，香蕉深加工產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展。香蕉皮作為香蕉深加工的廢棄物，大量堆積，造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染。但目前國內(nèi)外對于香蕉的研究和加工都著眼于香蕉果肉上，有關(guān)香蕉皮的研究還涉及較少，僅有少量香蕉皮糖類物質(zhì)和總酚的研究報道[2-5]。

香蕉皮約占香蕉總重的40%，含有多種功能性成分[6]，且富含原花色素。原花色素是一種多酚類化合物，具有很強(qiáng)的抗氧化和清除自由基能力，已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品及化妝品等諸多領(lǐng)域[7]。目前，香蕉皮原花色素的研究和利用尚無報道。本文研究了從香蕉皮中提取原花色素的工藝，并對溶劑提取法和超聲波輔助提取法進(jìn)行比較，旨在提供一種優(yōu)化的香蕉皮提取原花色素的方法和參數(shù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

香蕉皮 市售香牙蕉，剝離果肉；原花色素標(biāo)準(zhǔn)品 天津市尖峰天然產(chǎn)物研究開發(fā)有限公司，UV＞95%；甲醇、乙醇、丙酮、鹽酸、香草醛 分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司。

PL203電子天平 上海梅特勒-托利多儀器有限公司；DXF-04D手提式粉碎機(jī) 廣州市大祥電子機(jī)械設(shè)備有限公司；SHZ-88臺式水浴恒溫振蕩器 江蘇太倉市實(shí)驗設(shè)備廠；TDL-5-A飛鴿離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠；RE-32A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠；SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵 鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司；KH-100SP雙頻數(shù)控超聲波清洗器 昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司；DGG-9070B電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海森信實(shí)驗儀器有限公司；752N紫外-可見分光光度計 上海儀電分析儀器有限公司。

1.2 原花色素的制備

香蕉皮→護(hù)色→低溫烘干→粉碎→過篩→提取→離心→減壓干燥→低溫烘干。

將香蕉皮置于護(hù)色液（0.4%檸檬酸，0.1%抗壞血酸）中浸泡3～5min，50℃烘干至含水量低于10%，粉碎，過40目篩，得香蕉皮粉。

準(zhǔn)確稱取1.000g香蕉皮粉，以一定料液比加入一定體積分?jǐn)?shù)的提取劑，恒溫反應(yīng)一定時間后，在4000r/min條件下離心20min，上清液減壓干燥，50℃烘干至含水量低于6%，得香蕉皮原花色素粗提品。

1.3 原花色素的測定

采用香草醛-鹽酸法[8]。香蕉皮原花色素提取得率和純度的計算公式如下：

式中：m0—提取所用香蕉皮粉的質(zhì)量，g；m1—粗提品中原花色素的質(zhì)量，g；m2—粗體品的質(zhì)量，g。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確稱取0.005g原花色素標(biāo)準(zhǔn)品，用70%甲醇溶解，定容至25mL，獲得0.2mg/mL原花色素標(biāo)準(zhǔn)液。分別移取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL原花色素標(biāo)準(zhǔn)液于10mL容量瓶中，用70%甲醇定容。分別取1mL上述原花色素甲醇溶液，加入6.00mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的香草醛溶液和3.00mL 36%～38%濃鹽酸，搖勻后避光反應(yīng)30min。以70%甲醇作空白，在500nm處測吸光度。

標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y=1.4536x+0.0012，R2=0.9991。

1.5 溶劑提取法工藝優(yōu)化

1.5.1 單因素實(shí)驗設(shè)計

1.5.1.1 溶劑體積分?jǐn)?shù)體積分?jǐn)?shù)對原花色素提取得率的影響 分別以水，30%、45%、60%、75%、90%的乙醇和丙酮為提取劑，在料液比1∶12，提取溫度為60℃的條件下提取2h。測定原花色素的提取得率。

1.5.1.2 料液比對原花色素提取得率的影響 以75%的丙酮為提取劑，分別以料液比1∶10、1∶12、1∶14、1∶16、1∶18g/mL，提取溫度為60℃的條件下提取2h。測定原花色素的提取得率。

1.5.1.4 提取時間對原花色素提取得率的影響 以75%丙酮為提取劑，在料液比1∶12，提取溫度為60℃，提取時間分別為1.0、1.5、2.0、2.5、3.0h。測定原花色素的提取得率。

1.5.2 正交實(shí)驗設(shè)計 在溶劑提取法單因素實(shí)驗的基礎(chǔ)上，選擇丙酮體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取溫度、提取時間4個因素，每個因素選取3個水平，以原花色素的提取得率為考查指標(biāo)，采用L9（34）正交實(shí)驗。溶劑提取法各因素水平的選取如表1所示。

表1 溶劑提取法正交實(shí)驗的因素水平Table.1 Factor level of orthogonal experiment of solvent extraction method

1.6 超聲波輔助提取法工藝優(yōu)化

1.6.1 單因素實(shí)驗設(shè)計

1.6.1.1 超聲波輔助下溶劑體積分?jǐn)?shù)對原花色素提取得率的影響 分別以30%、45%、60%、75%、90%的乙醇和丙酮為提取劑，以料液比1∶10，在50℃，25Hz超聲波輔助條件下提取30min。測定原花色素的提取得率。

1.6.1.2 超聲波輔助下料液比對原花色素提取得率的影響 以75%丙酮為提取劑，分別以料液比1∶4、1∶6、1∶8、1∶10、1∶12、1∶14g/mL，在50℃，25Hz超聲波輔助條件下提取30min。測定原花色素的提取得率。

1.6.1.3 超聲時間對原花色素提取得率的影響 以75%丙酮為提取劑，以料液比1∶10g/mL，在50℃，25Hz超聲波輔助條件下，分別提取10、20、30、40、50min。測定原花色素的提取得率。

在制定稅收節(jié)約戰(zhàn)略的過程中，應(yīng)考慮相應(yīng)的稅收和非稅收因素，全面分析和評價稅法所允許的各種避稅方法的利弊。

1.6.1.4 超聲溫度對原花色素提取得率的影響 以75%丙酮為提取劑，以料液比1∶10g/mL，分別在35、45、55、65、75℃，25Hz超聲波輔助條件下，提取30min。

1.6.2 正交實(shí)驗設(shè)計 在超聲波輔助提取法單因素實(shí)驗的基礎(chǔ)上，選擇丙酮體積分?jǐn)?shù)、料液比、超聲溫度、超聲時間4個因素，每個因素選取3個水平，以原花色素的提取得率為考查指標(biāo)，采用L9（34）正交實(shí)驗。超聲波輔助提取法各因素水平的選取如表2所示。

表2 超聲波輔助提取法正交實(shí)驗的因素水平Table.2 Factor level of orthogonal experiment of ultrasound-assisted extraction method

圖1 提取溶劑對原花色素提取得率的影響Fig.1 Effect of different solvents on extraction result

2 結(jié)果與分析

2.1 溶劑提取法提取工藝的優(yōu)化

2.1.1 溶劑體積分?jǐn)?shù)對原花色素提取得率的影響以水為提取劑原花色素提取得率較低，僅為0.120%，不予考慮。由圖1可知，原花色素的提取得率隨溶劑體積分?jǐn)?shù)的增加先增大后減小。溶劑體積分?jǐn)?shù)較低時，乙醇的提取效果較好；當(dāng)溶劑體積分?jǐn)?shù)大于60%時，丙酮的提取效果優(yōu)于乙醇，75%丙酮的提取效果最好。這可能是由于原花色素具有較大的極性，易溶于水；但植物中的原花色素通常與蛋白質(zhì)、多糖等形成氫鍵，有機(jī)溶劑具有斷裂氫鍵的作用，因此有機(jī)溶劑-水的復(fù)合溶劑體系更有利于原花色素的提取。隨著溶劑體積分?jǐn)?shù)的增加，氫鍵破壞能力逐漸增大；然而，水具有穿透植物細(xì)胞的作用，溶劑體積分?jǐn)?shù)升高會導(dǎo)致原花色素的滲出量減少[9]。因此，選擇丙酮作為提取劑，其最佳體積分?jǐn)?shù)為75%。

2.1.2 料液比對原花色素提取得率的影響 由圖2可知，原花色素的提取得率隨料液比的增大先增大后減小。當(dāng)料液比為1∶12g/mL時，原花色素的提取得率最高。此時，香蕉皮中的原花色素幾乎全部被提取出來，增大料液比對提取效果無顯著影響，并且考慮到溶劑成本，選擇1∶12g/mL為最佳料液比。

圖2 料液比對原花色素提取得率的影響Fig.2 Effect of the rate of solution to solid on extraction result

2.1.3 提取溫度對原花色素提取得率的影響 由圖3可知，原花色素的提取得率隨著提取溫度的升高先增大后減小。當(dāng)提取溫度為55℃時，原花色素的提取得率最高。這可能是由于升高溫度有助于原花色素的提??；但原花色素的熱穩(wěn)定性較差，溫度過高，原花色素的分子結(jié)構(gòu)易被破壞，發(fā)生氧化或降解反應(yīng)[10]，使得原花色素提取得率降低。由于因此，選擇55℃為最佳提取溫度。

圖3 提取溫度對原花色素提取得率的影響Fig.3 Effect of temperature on extraction result

2.1.4 提取時間對原花色素提取得率的影響 由圖4可知，原花色素的提取得率隨著提取時間的延長先增大后減小。當(dāng)提取時間為1.5h時，提取得率最高。這可能是由于隨著提取時間的增加，細(xì)胞中的原花色素逐漸被提取出來。當(dāng)提取時間小于1.5h，原花色素提取不充分；當(dāng)提取溫度達(dá)到1.5h時，原花色素幾乎完全被提取出來；但提取時間繼續(xù)延長，會引起原花色素結(jié)構(gòu)變化[11]，雜質(zhì)的浸出量也會增加。因此，選擇1.5h為最佳提取時間。

圖4 提取時間對原花色素提取得率的影響Fig.4 Effect of time on extraction result

2.1.5 溶劑提取法的正交實(shí)驗設(shè)計 溶劑提取法L9（34）正交實(shí)驗結(jié)果如表3所示。分析極差R可知，影響原花色素提取效果的因素大小順序為：提取溫度（A）＞料液比（C）＞丙酮體積分?jǐn)?shù)（B）＞提取時間（D）。根據(jù)均值大小可知，香蕉皮中原花色素提取的最優(yōu)條件為：A1B2C2D2，即最佳提取條件為：75%丙酮，料液比1∶12g/mL，50℃提取90min，為正交實(shí)驗中的第二組實(shí)驗。以優(yōu)化出的最佳條件，實(shí)驗3次，所得原花色素提取得率平均為0.459%，純度為6.01%。

表3 溶劑提取法的正交實(shí)驗設(shè)計與結(jié)果Table.3 Design and result of orthogonal test

2.2 超聲波輔助提取法提取工藝的優(yōu)化

2.2.1 超聲波輔助下溶劑體積分?jǐn)?shù)對原花色素提取得率的影響 由圖5可知，原花色素的提取得率隨著溶劑體積分?jǐn)?shù)的增大原花色素的提取得率先增大后減小，且丙酮的提取效果明顯優(yōu)于乙醇。當(dāng)溶劑體積分?jǐn)?shù)為75%時，原花色素的提取得率達(dá)到最高。因此，選擇丙酮作為提取劑，其最佳體積分?jǐn)?shù)為75%。

2.2.2 超聲波輔助下料液比對原花色素提取得率的影響 由圖6可知，原花色素的提取得率隨著料液比的增大先增大后減小。當(dāng)料液比為1∶10g/mL時，原花色素的提取得率達(dá)到最高。這可能是由于在一定范圍內(nèi)，隨著溶劑體積的增大，原花色素的提取得率逐漸增大；當(dāng)料液比達(dá)到1∶10g/mL時，原花色素幾乎被提取完全；若料液比繼續(xù)增大，提取溶劑過剩，多余的提取溶液將會吸收超聲波的能量，影響超聲效果[12]。因此，選擇1∶10g/mL為最佳料液比。

圖5 提取溶劑對原花色素提取得率的影響Fig.5 Effect of different solvents on extraction result

圖6 料液比對原花色素提取得率的影響Fig.6 Effect of the rate of solution to solid on extraction result

2.2.3 超聲時間對原花色素提取得率的影響 由圖7可知，原花色素的提取得率隨著超聲時間的延長先增大后減小。30min時，提取得率達(dá)到最大。由于原花色素的結(jié)構(gòu)中含有大量羥基，長時間浸泡，可能會引起原花色素結(jié)構(gòu)的變化；而且超聲時間過長，會造成能源的浪費(fèi)。因此，考慮到實(shí)驗結(jié)果和實(shí)驗成本，選擇30min為最佳超聲時間。

圖7 超聲時間對原花色素提取得率的影響Fig.7 Effect of ultrasonic time on extraction result

2.2.4 超聲溫度對原花色素提取得率的影響 由圖8可知，原花色素的提取得率隨著溫度的升高先增大后減小。當(dāng)超聲溫度為55℃時，原花色素提取得率最高。這可能是由于溫度的升高，分子運(yùn)動速度逐漸加快，有利于細(xì)胞內(nèi)原花色素的滲透、擴(kuò)散和溶解；但溫度過高會破壞原花色素的結(jié)構(gòu)，原花色素?fù)p失嚴(yán)重，從而降低原花色素的提取得率。因此，選擇55℃為最佳超聲時間。

圖8 超聲溫度對原花色素提取得率的影響Fig.8 Effect of ultrasonic temperature on extraction result

2.2.5 超聲波輔助提取法的正交實(shí)驗設(shè)計 超聲波輔助提取法L9（34）正交實(shí)驗結(jié)果如表4所示。由極差R可知，影響原花色素提取效果的因素大小順序為：丙酮體積分?jǐn)?shù)（A）＞超聲溫度（D）＞料液比（B）＞超聲時間（C）。根據(jù)k值大小可知，在超聲波輔助下，香蕉皮中原花色素提取的最優(yōu)條件為：A2B2C3D1，即75%丙酮，料液比1∶10g/mL，超聲提取35min，超聲溫度為50℃，恰為正交實(shí)驗9組中的最大組。以優(yōu)化出的最佳條件，實(shí)驗3次，所得原花色素提取得率平均為0.685%，純度為9.57%。

表4 超聲波輔助提取法的正交實(shí)驗設(shè)計與結(jié)果Table.4 Design and result of orthogonal test

2.3 超聲波輔助提取法與溶劑提取法的對比

取相同質(zhì)量的香蕉皮粉，分別采用溶劑提取和超聲波輔助提取的最佳工藝條件實(shí)驗3次。由圖9可知，超聲波輔助提取法提取原花色素的得率和純度都明顯高于單純?nèi)軇┨崛》?。且超聲波輔助提取法大大縮短了提取時間，同時還減少了提取溶劑的用量。超聲輔助提取法提取時間短、溶劑用量少、提取得率高、產(chǎn)品純度高，是一種高效、節(jié)能、環(huán)保的提取方法。

圖9 溶劑提取與超聲波輔助提取對原花色素提取得率和純度的影響Fig.9 Comparison method of solvent extraction with ultrasoundassisted extraction on proanthocyanidins yield and purity

3 結(jié)論

3.1分別采用溶劑提取法和超聲波輔助提取法對香蕉皮中的原花色素進(jìn)行提取，并對通過單因素、正交實(shí)驗對兩種提取方法的工藝進(jìn)行了優(yōu)化。

3.2溶劑提取法的最佳工藝為：丙酮體積分?jǐn)?shù)75%，料液比1∶12，提取溫度50℃，提取時間90min，原花色素的提取得率為0.459%，純度為6.01%。

3.3超聲波輔助提取法的最佳工藝為：丙酮體積分?jǐn)?shù)75%，料液比1∶10，超聲溫度50℃，超聲時間35min，原花色素的提取得率為0.685%，純度為9.57%。

3.4超聲波輔助提取法原花色素的提取得率和純度都明顯高于溶劑提取法，且該法大大縮短了提取時間，同時還減少了提取溶劑的用量，是一種高效、節(jié)能、環(huán)保的提取方法。

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Study on extraction technology of proanthocyanidins from banana peel

JIA Bao-zhu，BAO Jin-yong，ZHENG Xiao-yi，DU Bing，CHEN Qing-fa，YANG Gong-ming*
（South China Agricultural University，Guangzhou 510642，China）

The condition of extracting proanthocyanidins from banana peel were studied.For solvent extraction method，optimized conditions were 75%acetone，material/liquid ratio 1∶12g/mL，temperature 50℃and extraction time 90min.The yield of proanthocynidins was 0.459%，with a purity about 6.01%.For ultrasound-assisted extraction method，the following conditions were established：75%acetone，the ratio of material to liquid 1∶10g/mL，extracting at 50℃with 35min ultrasonic treatment.The yield was 0.685%，with a purity up to 9.57%. In comparision with solvent extraction method，ultrasound-assisted extraction method achieved higher yield and purity.It was an efficient and energy-saving method on extracting proanthocyanidins from banana peel.

proanthocyanidins；banana peel；ultrasound-assisted extraction；process optimization

TS209

B

1002-0306（2014）06-0251-05

2013－08－01 *通訊聯(lián)系人

賈寶珠（1989-），女，在讀碩士研究生，研究方向：食品高新技術(shù)。

東莞市科技計劃項目（200910810100600）；廣州市科技計劃項目（12C12101661）。