李本俊 才鳳 趙華 初正云

1.遼寧衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)系，遼寧沈陽110101；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，遼寧大連116600

羚羊清肺顆粒中冰片的含量測定

李本俊1才鳳2趙華1初正云2

1.遼寧衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)系，遼寧沈陽110101；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，遼寧大連116600

目的制訂羚羊清肺顆粒中冰片的含量測定方法。方法采用《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥE規(guī)定的氣相色譜測定方法：色譜柱：HP20M（30 m×0.32 mm×1.0 μm）（PEG20M）；柱溫：140℃；氣化溫度：280℃；檢測器溫度：300℃；載氣：氮?dú)猓ㄉV純）；流速：35.5 mL/min；分流比：40∶1；進(jìn)樣量：1 μL。結(jié)果羚羊清肺顆粒中冰片稱樣量在1.85～11.13 mg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，平均回收率在97.71%～101.24%之間，RSD為1.35%（n=6），符合《中國藥典》2010年版一部規(guī)定，其他方法學(xué)考查均符合《中國藥典》2010年版一部規(guī)定。結(jié)論本研究所采用的氣相色譜法操作快速、簡便、易行，精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性好，可用于羚羊清肺顆粒中冰片的含量測定。

羚羊清肺顆粒；冰片；氣相色譜法；含量測定

羚羊清肺顆粒是在原散劑的基礎(chǔ)上將其改變成顆粒，屬中藥新藥第9類，具有清熱瀉火、涼血解毒、化痰息風(fēng)等功能，用于溫?zé)岵　⒏邿嵘窕?、煩躁口渴、驚厥抽搐及小兒肺熱咳嗽等［1］。本品由羚羊角、金銀花、冰片等十八味中藥組成，由于方中藥味較多，所含成分復(fù)雜，對本品的質(zhì)量控制帶來諸多不便。由于冰片為方中主要藥物，所含標(biāo)志性成分為右旋龍腦，其含量常被作為冰片的主要質(zhì)量控制指標(biāo)［2］，并在制劑中視為冰片含量。右旋龍腦分子式為C10H18O，具有揮發(fā)性［3］，故采用氣相色譜法對冰片進(jìn)行限量測定［4-6］，以控制本品質(zhì)量，保證臨床用藥的安全、準(zhǔn)確和有效。

1 儀器與試藥

H5890氣相色譜儀檢測器：FID。

對照品：冰片，由中國藥品生物制品檢定所提供，批號：110743-201303，純度含量＞98.5%，；樣品：羚羊清肺顆粒（沈陽天益堂中藥廠）；正十五烷（色譜純）；其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：HP20M（30m×0.32mm×1.0 μm）（PEG20M）；柱溫：140℃；氣化溫度：280℃；檢測器溫度：300℃；載氣：氮?dú)猓ㄉV純）；流速：35.5 mL/min；分流比：40∶1；進(jìn)樣量：1 μL。

2.2 測定指標(biāo)與測定方法的確立

本品由羚羊角、冰片、蘆根、梔子、連翹、甘草、金銀花、知母等十八味中藥加工制成，冰片在方中用量為62 g，含量較高，所以選用冰片為含量測定指標(biāo)，采用氣相色譜法，以正十五烷為內(nèi)標(biāo)，對本品進(jìn)行含量測定。

2.3 溶液的制備

2.3.1 內(nèi)標(biāo)溶液的制備參考《中國藥典》2010年版一部［7］冠心蘇合丸含量測定項(xiàng)下內(nèi)標(biāo)物的制備方法，取正十五烷適量，用醋酸乙酯溶解并制成每毫升含5.004 mg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備確定取本品適量，精密稱取適量，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1 mL與醋酸乙酯4 mL，密塞，振搖使冰片溶解，靜置，取上清液為供試品溶液［8］。

2.3.3 陰性溶液的制備取除去冰片以外的其他藥材，按供試品制備方法制成陰性溶液。

2.4 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)考察

參考《中國藥典》2010年版一部［7］冠心蘇合丸項(xiàng)下的含量測定方法進(jìn)行試驗(yàn)。色譜條件為色譜柱：HP20M（30 m×0.32 mm×1.0 μm）（PEG20M）；柱溫：140℃；氣化溫度：280℃；檢測器溫度：300℃；載氣：氮?dú)猓ㄉV純）；流速：35.5 mL/min；分流比：40∶1；進(jìn)樣量：1 μL，并以正十五烷為內(nèi)標(biāo)，可滿足氣相色譜測定的要求，理論塔板數(shù)按正十五烷計算應(yīng)不低于1200。

2.5 線性關(guān)系的考察

精密稱取冰片對照品1.85、3.23、5.94、8.57、11.13 mg，置5 mL量瓶中，按“2.4”項(xiàng)下含量測定方法加入正十五烷內(nèi)標(biāo)物，分別精密量取1 μL注入氣相色譜儀［9］，進(jìn)行測定，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，冰片峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[10］，計算回歸方程，回歸方程為：Y＝0.205 152X+0.001 75（r＝0.9999）。測定結(jié)果顯示，冰片稱樣量在1.85～11.13 mg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 校正因子的測定

取上述測定標(biāo)準(zhǔn)曲線不同濃度的供試品溶液，照《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥD內(nèi)標(biāo)法測定校正因子，按“2.4”項(xiàng)下含量測定方法加正十五烷內(nèi)標(biāo)物[11]，分別精密量取1 μL注入氣相色譜儀，進(jìn)行測定，F(xiàn)的平均值為0.9759，RSD為0.37%（n=5）。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取本品1 g，傾出內(nèi)容物，研細(xì)，按“2.3.2”項(xiàng)下方法制備供試液，精密取同一供試液，按0、3、6、9、12 h時間間隔，分別進(jìn)樣分析［12］，測定冰片的含量的RSD為0.84%（n＝5），表明供試液在12 h內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。

2.8 精密度試驗(yàn)

取本品l g，傾出內(nèi)容物，研細(xì)，按“2.3.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液。分別精密吸取1 μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，測定其冰片的含量［13］。計算其冰片和內(nèi)標(biāo)物RSD分別為0.52%（n=5）和1.76%（n=5）。

2.9 重現(xiàn)性試驗(yàn)

取5份（批號130805）樣品各lg，傾出內(nèi)容物，研細(xì)[8]，按“2.5”項(xiàng)下方法分別測定，測定其冰片含量的RSD為0.54%（n=5）。

2.10 回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的6份，分別加入內(nèi)標(biāo)溶液1 mL和冰片對照品溶液4 mL（濃度為0.625 16 mg/mL），按“2.4”項(xiàng)下含量測定方法測定［14］，結(jié)果顯示其樣品回收率在97.71%～101.24%之間，RSD為1.35%（n=6）。見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

2.11 陰性干擾試驗(yàn)

精密吸取供試品溶液、陰性液、對照品溶液各1 μL，分別注入氣相色譜儀中，繪制氣相色譜圖，由色譜圖提示，在對照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品溶液具有相同保留時間的色譜峰，陰性液在此峰位無吸收，對本品中冰片的含量測定無干擾，方法專屬性良好，氣相色譜圖見圖1～3，氣相色譜測定結(jié)果見表2、3、4。

圖1 冰片對照品氣相色譜圖

表2 對照品氣相色譜測定結(jié)果

3 討論

圖2 供試品氣相色譜圖

表3 供試品氣相色譜測定結(jié)果

圖3 陰性干擾氣相色譜圖

表4 陰性干擾氣相色譜測定結(jié)果

冰片是羚羊清肺顆粒的重要有效成分之一，先采用高效液相色譜法測定時干擾較大，又因冰片具有揮發(fā)性，因此選用氣相色譜法測定冰片含量，在本實(shí)驗(yàn)擬定色譜條件下異龍腦與龍腦可達(dá)到完全分離。本法簡便、靈敏、快速、準(zhǔn)確，可作為羚羊清肺顆粒中冰片的質(zhì)量控制方法。

中成藥成分復(fù)雜，組分比較多，在測定過程中易污染色譜柱，影響儀器的穩(wěn)定性和靈敏度，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在每次測定完后將柱溫適當(dāng)升高，避免由于雜質(zhì)峰污染柱子所帶來的干擾，且樣品測定數(shù)據(jù)穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。

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Content determination of borneol in Lingyang Qingfei Granules

LI Benjun1CAI Feng2ZHAO Hua1CHU Zhengyun2
1.Department of Pharmacy,Liaoning College of Health Vocational Technology,Liaoning Province,Shenyang110101, China;2.School of Pharmacy,Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Liaoning Province,Dalian 116600, China

Objective To establish a method for determination of the borneol content of Lingyang Qingfei Granules. Methods Gas chromatography in AppendixⅥE of Chinese Pharmacopeia(2010 edition,1 volume)determination was used as follow:chromatographic column:HP20M(30 m×0.32 mm×1.0 μm)(PEG20M);column temperature:140℃; gasification temperature:280℃;detector temperature:300℃;carrier gas:Nitrogen(chromatographic purity);flow rate: 35.5 mL/min,the split ratio:40:1;sample size:1 μL.Results Borneol of Lingyang Qingfei Granules in the sample weight in the range of 1.85-11.13 mg showed a good linear relationship,the average rate of recovery was 97.71%-101.24%,RSD was 1.35%(n=6),in accordance with the relevant provisions,other methods of study were in conformity with the relevant provisions.Conclusion This method of GC is rapid,simple,and convenient to operate,its precision,repeatability and stability are all good,it can be used for the content determination of borneol of Lingyang Qingfei Granules.

Lingyang Qingfei Granules;Borneol;Gas chromatography;Content determination

R284.1

A

1673-7210（2014）09（b）-0081-03

2014-03-17本文編輯：衛(wèi)軻）

李本俊（1957-），男，副教授；研究方向：中藥炮制及高職教育研究。