張紀(jì)媛鐘建玲何 惠

（1.廣東省廣州市白云區(qū)疾病控制預(yù)防中心檢驗科，510445；2.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院）

免疫熒光法檢測細(xì)菌性陰道炎臨床分析

張紀(jì)媛1鐘建玲2何 惠2

（1.廣東省廣州市白云區(qū)疾病控制預(yù)防中心檢驗科，510445；2.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院）

目的 評價免疫熒光法檢測細(xì)菌性陰道炎的臨床價值。方法 80例疑似細(xì)菌性陰道炎患者取宮頸口分泌物3份標(biāo)本，并標(biāo)記為A、B和C。A標(biāo)本均采用線索細(xì)胞檢查法檢測，B標(biāo)本均采用免疫熒光法檢測，C標(biāo)本采用細(xì)菌培養(yǎng)法檢測。A和B檢測結(jié)果均參考C標(biāo)本檢測結(jié)果進(jìn)行評價。結(jié)果 線索細(xì)胞法的特異度和準(zhǔn)確度均顯著低于免疫熒光法（P均＜0.05），兩種檢測方法的靈敏度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 采用免疫熒光法檢測細(xì)菌性陰道炎具有更高的檢測價值，而且檢測方法簡單快速，有利于提高醫(yī)院競爭力，值得檢驗臨床考慮。

免疫熒光法；線索細(xì)胞法；細(xì)菌性陰道炎

陰道炎是婦科常見疾病，細(xì)菌性陰道炎亦占一定比例。細(xì)菌性陰道炎主要是由加德納菌與以些厭氧菌混合感染引起的[1]。該病不僅給患者帶來身心痛苦，而且還可能誘發(fā)宮頸癌或?qū)е虏挥?，因此早期及時準(zhǔn)確的診斷，對于患者能更快更準(zhǔn)確的接受治療具有重要意義。為了選擇合適的診斷方法，我們對患者分別采用線索細(xì)胞檢查法和免疫熒光法進(jìn)行檢測?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年8月—2014年1月在廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診的80例疑似細(xì)菌性陰道炎患者。入選標(biāo)準(zhǔn)：①符合以下項目中的任意兩項，pH＞4.5，均質(zhì)、稀薄的陰道分泌物，氨試驗陽性；②檢測期間無月經(jīng)和妊娠，最近48 h內(nèi)無性生活[2]。本組病例年齡（32.7±6.5）歲；病程（4.3±0.7）個月。

1.2 方法 所有患者均在消毒條件下用無菌棉簽取宮頸口分泌物3份標(biāo)本，并標(biāo)記為A、B和C。A標(biāo)本均采用線索細(xì)胞檢查法檢測：將標(biāo)本采用滾動式方法薄而均勻地涂于玻璃片，自然干燥。然后進(jìn)行革蘭染色。然后在鏡下直接查找線索細(xì)胞，陽性：染色不定或革蘭陰性小桿菌或球桿菌覆蓋于陰道鱗狀上皮細(xì)胞表面。B標(biāo)本均采用免疫熒光法檢測：免疫熒光檢測試劑盒為華大基因集團(tuán)提供。滴加磷酸鹽緩沖液（pH為7.4，濃度為0.01 mol/L）于待檢標(biāo)本片上，保持10 min后清除，然后滴加適當(dāng)稀釋的抗體溶液（含熒光標(biāo)記）完全覆蓋標(biāo)本。恒溫下保持一段時間后，取出玻片，磷酸鹽緩沖液沖洗，之后在磷酸鹽緩沖液中浸泡8～10 min。取出玻片，濾紙吸去多余水分，加甘油1滴，蓋玻片覆蓋，熒光顯微鏡下觀察。陽性：成堆發(fā)亮綠色熒光。C標(biāo)本采用細(xì)菌培養(yǎng)法檢測，兩種檢測方法的結(jié)果均參考細(xì)菌培養(yǎng)法結(jié)果進(jìn)行評價。統(tǒng)計兩種檢測方法的特異度、靈敏度和準(zhǔn)確度。

表1 兩種檢測方法效果比較

1.3 統(tǒng)計分析 采用SPSS 12.0軟件處理相關(guān)數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

本次細(xì)菌培養(yǎng)法共確診73例。線索細(xì)胞法的特異度和準(zhǔn)確度均顯著低于免疫熒光法（P均＜0.05），兩種檢測方法的靈敏度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

3 討論

加德納菌是細(xì)菌性陰道炎的主要致病菌，該菌為革蘭陰性或有變異的球菌樣小桿菌，適于在pH＞4.5的環(huán)境下生長。細(xì)菌性陰道炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)主要為4項[3]：①pH＞4.5；②均質(zhì)、稀薄的陰道分泌物；③氨試驗陽性；④存在加德納菌。符合任意3項即可確診，但臨床上常常遇到符合前3項中的任意兩項，還需要進(jìn)一步確定是否加德納菌，這時就有必要選擇合適的檢測方法，以提高加德納菌的檢出率。

線索細(xì)胞法是目前臨床上廣泛應(yīng)用的檢測方法，是利用加德納菌能否被染色的物理性質(zhì)。線索細(xì)胞即陰道上皮細(xì)胞，若存在加德納菌，可大量附著其表面，從而在鏡下被觀測到。但線索細(xì)胞法受標(biāo)本采集、顯微鏡質(zhì)量和操作者經(jīng)驗等諸多因素影響[4]；此外，陰道內(nèi)環(huán)境較為復(fù)雜，可能也存在著一些其他的革蘭陰性菌，從而導(dǎo)致線索細(xì)胞法的特異度降低[5]，出現(xiàn)假陽性誤診的情況，如本次線索細(xì)胞法的特異度為86.3%，處于一個相對較低的水平。

免疫熒光法的原理是利用特異抗體與抗原（加德納菌）結(jié)合，通過觀察特異抗體所帶熒光的分布和強(qiáng)度[6]，從而判斷是否存在加德納菌。由于抗原是針對加德納菌特制的，可有效避免其他雜菌的非特異度結(jié)合，因此具有很高的特異度[7]。而且抗原可高效的結(jié)合于抗原，因此也具有很高的靈敏度[8]，有效避免了漏診。本次免疫熒光法的特異度達(dá)到了97.3%，靈敏度達(dá)到了100.0%。

從觀察結(jié)果來看，免疫熒光法的特異度和準(zhǔn)確度均顯著高于線索細(xì)胞法，而且具有很高的靈敏度，顯示了更好的檢測效果。我們認(rèn)為，采用免疫熒光法檢測細(xì)菌性陰道炎具有更高的檢測價值，而且檢測方法簡單快速，有利于檢測人員在保證準(zhǔn)確度的基礎(chǔ)上提高工作效率，對于提高醫(yī)院競爭力具有積極意義，值得檢驗臨床考慮。

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1672-7185（2014）12-0046-02

10.3969/j.issn.1672-7185.2014.12.026

2014-01-03）

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