邱正明, 郭鳳領(lǐng), 陳磊夫 , 郭世喜, 吳金平*

(1.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所，湖北 武漢 430064；2.神龍架百草園生態(tài)科技有限公司，湖北 神龍架 442499)

大葉碎米薺(CardaminemacrophyllaWilld.var.macrophylla)屬于十字花科碎米薺屬植物。生長于山坡灌木林下、溝邊、石隙、高山草坡水濕處，海拔在1 600～4 200 m之間。大葉碎米薺全株用藥，通尿利便、止痛及治敗血病，具有很好的食療保健作用[1]。目前僅對不同海拔下大葉碎米薺中激素和水溶性維生素含量[2-3]、營養(yǎng)成分和化學(xué)成分進行了研究[4]；對壺瓶碎米薺進行了異地栽培、營養(yǎng)成分、胚和胚乳的研究以及不同溫度對其生理的影響[5-7]；對華中碎米薺進行了生藥學(xué)研究[8]；對堇葉碎米薺研究了硒和溫度對其生理特性的影響[9-11]。

異硫氰酸鹽是十字花科植物的一種具有防癌抗癌作用的有機硫化合物[12]，近年來受到營養(yǎng)學(xué)與預(yù)防醫(yī)學(xué)界的高度重視[13]。筆者對大葉碎米薺中異硫氰酸鹽進行了GC-MS鑒定分析，為大葉碎米薺作為一種野菜資源的開發(fā)利用提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

大葉碎米薺由神龍架百草園生態(tài)科技有限公司提供。

異硫氰酸苯乙酯(PEITC)標準品、丙酮、二氯甲烷(色譜純，美國Sigma-Aldrich公司)。乙醇、無水Na2SO4、NaCl等均為分析純，購于國藥集團上海試劑公司。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Agilent公司)，配6890N型氣相色譜儀，5973i型質(zhì)量選擇檢測器，以及7683型自動進樣器。

1.2 方法

1.2.1 異硫氰酸鹽提取

提取工藝流程：大葉碎米薺莖尖→碾碎→酶解→有機溶劑提取→旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)→粗提物。

用蒸餾水小心洗凈采收的大葉碎米薺莖尖，吸水紙擦干莖尖上的水。準確稱取新鮮大葉碎米薺莖50.0 g, 加入磷酸鹽緩沖液( pH 7.2～7.4)，經(jīng)均質(zhì)器勻漿，于37 ℃水浴恒溫30 min，在5 000 r/min下離心10 min,取過濾后的上清液加入二氯甲烷( 100 mL) 分2次萃取，合并萃取液后將其置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸干，用2 mL丙酮定容，待GC-MS測定[14-15]，結(jié)果見表1。

1.2.2 GC-MS分析條件

DB-5MS型毛細管氣相色譜柱(5%苯基-95%甲基聚硅氧烷，30 m×0.25 mm ID×0.25 μm膜厚)。載氣，氦氣(武漢鋼鐵公司，純度為99.999%)；柱流速，1 mL/min；進樣口溫度，250 ℃；柱溫程序：初始溫度50 ℃，保持2 min，以10 ℃/min的速率，升溫至190 ℃，再以20 ℃/min的速率，升溫至3 000 ℃，保持，5 min；進樣量，1 μL(不分流進樣)；離子化方式，EI；電子能量，70 eV；接口溫度，280 ℃；離子源溫度，230 ℃；四極桿溫度，150 ℃；質(zhì)譜檢測方式：選擇離子監(jiān)測(SCAN)掃描范圍，45～450 amu[16]。

1.2.3 定量方法

配制1 mg/L異硫氰酸苯乙酯(PEITC)標準溶液，本研究中總異硫氰酸鹽量均以異硫氰酸苯乙酯溶液為參考進行測定，外標法定量。

2 結(jié) 果

大葉碎米薺提取液總離子流如圖1所示。測定結(jié)果表明，大葉碎米薺提取液中鑒定出2種異硫氰酸鹽化合物，分別為異硫氰酸烯丙酯和異硫氰酸甲硫基烯丙酯，兩者的含量分別為2.32、0.50 mg/kg，通過面積歸一化法求得每種化合物的相對含量，兩者含量分別為1.732%、0.375%。分析結(jié)果如表1所示。

圖1 大葉碎米薺提取液的總離子流圖

表1 大葉碎米薺中異硫氰酸鹽主要成分

3 討 論

十字花科植物具有減少癌癥發(fā)生率的作用是因為這些植物中含有異硫氰酸鹽。大量的實驗表明許多異硫氰酸鹽都具有抗癌作用，如蘿卜硫素(sulforaphane)[17]，異硫氰酸苯甲酯和異硫氰酸苯乙酯(PEITC)等[16]。國外對十字花科蔬菜中的異硫氰酸鹽提取工藝研究相對較少[18-20]，多是采用冷凍干燥，酶解等分離純化異硫氰酸鹽，工藝復(fù)雜，成本高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。本研究采用直接破碎大葉碎米薺苗工藝，降低成本，為工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

郜瑞等研究表明[4]，每100 g大葉碎米薺中粗脂肪含量為2.480±0.035 g；粗蛋白含量為19.60±0.00 g；可溶性糖含量為3.150±0.252 g；4種常量元素含量次序為K(4.09 g)>Ca(3.52 g)>Mg(4.50×10-1g)>Na(2.65×10-1g)；微量元素含量次序為每100 g含F(xiàn)e(8.35×10-2g)>Mn(9.93×10-3g)>Zn(4.25×10-3g)>Cu(6.00×10-4g)。大葉碎米薺中至少含有19種常見氨基酸，氨基酸總含量達34.4%。其中以谷氨酸和谷氨酞胺總含量 (6.00%)>丙氨酸(3.06%)>天冬氨酸和天冬酰胺(2.85%)>精氨酸(2.66%)>亮氨酸(2.45%)>纈氨酸(2.32%)>脯氨酸(2.07%)。大葉碎米薺中含有人體所需的7種必需氨基酸，共計12.8%。必需氨基酸與總氨基酸的比值為37.3%。鑒定出23種化合物大葉碎

米薺揮發(fā)性化合物鑒定出23種，其中含量較多有六氫合金歡丙酮(41.0%)、苯酚(8.10%)、植醇(3.05%)，β-紫羅蘭酮(3.02%)、欖香烯(2.24%)和香芹酚(1.76%)。本研究通過異硫氰酸鹽的研究，豐富了大葉碎米薺的功能成分，為進一步開發(fā)利用符合現(xiàn)代都市人追求的“原始、自然、野味”的大葉碎米薺這種野生蔬菜資源提供了依據(jù)。

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