周繼術(shù)Bente E. TorstensenIngunn Stubhaug,

(1. 西北農(nóng)林科技大學動物科技學院水產(chǎn)科學系, 楊凌 712100; 2. National Institute of Nutrition and Seafood Research (NIFES), P.O.Box 2029, Nordnes, 5817 Bergen, Norway; 3. Skretting ARC, Stavanger, Norway)

飼料中植物油替代魚油對大西洋鮭肝細胞油酸跨膜吸收的影響

周繼術(shù)1,2Bente E. Torstensen2Ingunn Stubhaug2,3

(1. 西北農(nóng)林科技大學動物科技學院水產(chǎn)科學系, 楊凌 712100; 2. National Institute of Nutrition and Seafood Research (NIFES), P.O.Box 2029, Nordnes, 5817 Bergen, Norway; 3. Skretting ARC, Stavanger, Norway)

以 [1-14C]油酸(oleic acid;18:1n-9, OA)為指示劑, 研究了不同飼料油源飼喂下大西洋鮭肝細胞膜脂肪酸組成受到改變時該細胞對OA吸收的狀況, 以探討植物油(Vegetable oil, VO)替代魚油(Fish oil, FO)對大西洋鮭肝細胞脂肪酸跨膜吸收的影響, 為大西洋鮭飼料中植物油替代魚油的可行性提供理論依據(jù)。試驗先以魚油和大豆油為油源配制兩種全價配合飼料, 分別飼喂大西洋鮭幼鮭5個月, 使其產(chǎn)生不同的脂肪酸組成。在飼養(yǎng)結(jié)束后, 分離并培養(yǎng)試驗魚肝細胞, 將細胞與[1-14C]OA及37.5 μmol/L OA(1/30, mol/mol, 0.3 μCi/瓶)共孵育2h, 收集并測定細胞內(nèi)OA放射活性, 再計算細胞內(nèi)OA吸收量 [nmol/(h·million cells)]。同時, 試驗采取RT-PCR方法測定了細胞脂肪酸運送蛋白(Fatty acid transport protein, FATP)、脂肪酸移位蛋白(Fatty acid translocase, FAT/CD36)的基因表達量。結(jié)果表明, FO和 VO組肝細胞對 OA吸收分別為(0.924±0.258)及(0.888±0.179) nmol/(h·million cells), 兩組間無顯著差異(P＞0.05)。RT-PCR的檢測結(jié)果表明, FAT/CD36和FATP基因表達量在FO與VO兩組間均無顯著差異(P＞0.05)。結(jié)果表明, 從植物油替代魚油不影響大西洋鮭肝細胞對長鏈脂肪酸的跨膜吸收方面來看, 大西洋鮭飼料中以植物油替代魚油具有可行性。

植物油; 魚油; 大西洋鮭; 肝細胞; 脂肪酸; 跨膜吸收

長鏈脂肪酸(Long chain fatty acid, LCFA)跨膜吸收是細胞內(nèi)脂質(zhì)代謝的基礎(chǔ), 長期的觀點認為,該跨膜吸收過程是一種簡單擴散, 不需要膜蛋白的協(xié)助就能完成[1]。隨著一系列如脂肪酸運輸?shù)鞍?Fatty acid transport protein, FATP)[2]、脂肪酸移位蛋白(Fatty acid translocase, FAT/CD36)[3]等脂肪酸跨膜轉(zhuǎn)運蛋白的發(fā)現(xiàn), 脂肪酸依靠膜蛋白進行跨膜吸收的觀點也獲得了相應(yīng)的理論支持。在大西洋鮭的肝臟和紅肌等組織中也發(fā)現(xiàn)有FAT/CD36和FATP基因的表達[4], 而在脂肪代謝中具有重要作用的脂肪酸結(jié)合蛋白(Liver basic fatty acid binding protein, Lb-Fabp)基因在鯉體中也有相應(yīng)表達[5]。不論LCFA的跨膜吸收以何種方式進行, 細胞膜的各種特性都是實現(xiàn)其跨膜吸收的關(guān)鍵, 而細胞膜的各類特性與該膜脂肪酸組成密切相關(guān), 而后者又易受飼用油源的影響。研究發(fā)現(xiàn), 當以魚油、花生四烯酸、EPA[6]和 DHA[7]等油源或脂肪酸飼喂動物后, 其細胞膜的流動性就會增強, 而細胞膜的流動性與細胞膜功能密切相關(guān), 反映出油源脂肪酸改變了細胞膜的結(jié)構(gòu)和功能[8,9], 而細胞乃至細胞膜脂肪酸組成的差異會引起細胞膜脂質(zhì)組成的變化, 進而引起膜張力結(jié)構(gòu)的改變, 最終影響膜結(jié)合蛋白的功能[10]。因此推測, 在“油源-細胞膜-膜蛋白-脂肪酸吸收”這樣一個脂肪酸吸收鏈上, 不同脂肪源所引起的細胞膜脂肪酸組成的差異可能會最終導致該細胞對脂肪酸跨膜吸收的不同, 而這種吸收的不同可能與細胞膜或膜蛋白的結(jié)構(gòu)或功能有關(guān)。

目前, 大西洋鮭(Salmo salar L.)所需能源的20%—30%來自飼料中的魚油(Fish oil, FO)[11], 對魚油的需求量大, 而在全球漁業(yè)資源的緊缺以及動物飼養(yǎng)對魚油需求量增加的狀況下, 魚油供應(yīng)越為缺乏, 尋求來源廣、價格適宜的植物油(Vegetable oil, VO)則成為當務(wù)之急[12]。植物油與魚油的差別主要體現(xiàn)在其脂肪酸組成的差異, 這種差異雖然對魚類生長沒有影響, 但會改變魚體脂肪酸組成[13,14], 而這種改變是否會影響到大西洋鮭機體組織細胞對LCFA的跨膜吸收, 相關(guān)研究則較為缺乏。為此, 本試驗以FO與VO為油源制成兩種試驗飼料, 對大西洋鮭進行為期 5個月的飼養(yǎng), 然后分析魚體肝臟脂肪酸組成并分離培養(yǎng)大西洋鮭肝細胞以進行油酸跨膜吸收試驗, 通過探討兩組細胞對OA吸收的差異,為大西洋鮭飼料中植物油替代魚油提供理論依據(jù),為養(yǎng)殖魚類飼料油源的選擇及其養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供參考。

1 材料與方法

1.1 飼養(yǎng)試驗

將100尾大西洋鮭(Salmo salar L.) 幼鮭( 165 ± 15) g 隨機均分為兩組, 飼養(yǎng)于挪威海洋研究所水產(chǎn)實驗室(IMR, 挪威卑爾根)室內(nèi)養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi)的兩個養(yǎng)殖缸中, 分別飼以VO與FO為脂肪源的兩組試驗飼料, 飼養(yǎng)周期為5個月。試驗飼料由Nofima公司(Titlestad, 挪威)生產(chǎn), 其組成及成分請見表1。每千克飼料含粗蛋白439 g, 粗脂肪284 g, 碳水化合物121 g, 水61 g, 灰分89 g, 能量238 MJ。飼養(yǎng)期間平均水溫為 10?C, 鹽度為 32‰—34‰, 采用 24h連續(xù)光照。

表1 試驗飼料組成Tab. 1 Feed composition (g/kg)

1.2 飼料及試驗魚肝臟脂質(zhì)的脂肪酸及脂類組成測定

在飼養(yǎng)試驗結(jié)束后, 每組隨機采魚 2尾[(524± 23) g], 剝離其肝臟, 同時采集飼料樣品, 用氯仿/甲醇(2∶1 v/v)[16]分別抽提其總脂, 然后參照Lie and Lambertsen[17]的方法測定其脂肪酸組成, 同時采用高效薄層色譜(HPTLC, Darmstadt, Germany)法[18]測定其脂類組成。

脂肪酸組成測定 先將抽提的脂肪皂化, 再用12% BF3(Sigma, Poole, UK)甲醇溶液甲基化, 最后將甲酯用氣相色譜2000進行分離。分離條件為: 進樣時柱溫冷卻, 進樣后升溫, 20s 升至60℃, 25℃/min; 28min升至 160℃, 25℃/min; 17min 升至 190℃, 25?C/min; 9min升至220℃。色譜硅毛細管柱內(nèi)徑(id) 0.32 mm。與標準品的甲酯混合物為對照, 以脂肪酸滯留時間來確定脂肪酸的組成, 脂肪酸的定量測定采用Totalchrom軟件 (version 6.2, Perkin Elmer) 進行分析計算。每克組織脂肪酸的含量是以19:0 脂肪酸甲酯作內(nèi)標進行測定。

脂類組成測定 將脂質(zhì)溶于含0.05% BHT氯仿后, 取約10 μg (1 μL) 總脂點樣于HPTLC (10 cm× 20 cm)上樣孔中。然后將該薄層于乙酸甲酯∶異丙醇∶氯仿∶甲醇∶0.25% KCl水溶液 (25∶25∶25∶10∶9 v/v)[19]混合試劑中展開至薄層2/3高度, 自然干燥后再將該薄層于異己烷∶二乙醚∶乙酸(80∶25∶1.5, v/v/v) 混合溶劑中分離薄層余下的 1/3高度。將8%磷酸溶液中溶有3%乙酸銅的混合溶液噴灑于薄層上, 再將該薄層于160℃下炭化15min, 與標準品對照并識別各類脂質(zhì), 然后于CAMAG TLC掃描儀3上讀取各類脂質(zhì)密度值。

1.3 肝細胞的分離和培養(yǎng)

在飼養(yǎng)結(jié)束后, 每組隨機選取FO組 [(580±23) g]和 VO 組[(500±143) g] 大西洋鮭各 3尾, 分別用50 L加有充氧海水的桶運到實驗室, 進行肝細胞的分離和培養(yǎng)。

將大西洋鮭用0.1 g/L MS222 (3-氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽, metacain, Sigma Poole, UK)麻醉, 剖開魚腹, 找出肝靜脈, 從肝靜脈以兩步灌注法[20]給肝進行試劑灌注。第一步灌注 HEPES緩沖液(NaCl 8.4 g/L、KCl 0.5/g L、EDTA 0.0074 mg/L), 同時剪破心臟, 使灌注液從此處流出。當肝體由最初的淡紅變?yōu)榈S色時, 將灌注液換為0.1 mg/mL膠原酶-HEPES緩沖液。當肝臟呈松軟腫脹和半透明狀態(tài)時, 將肝剪下放入 PBS溶液中, 用鑷子撕裂肝組織并輕輕攪拌混勻。將該溶液用100 μm 尼龍網(wǎng)過濾, 再將濾液并于4℃下離心(50 g) 5min。倒掉上清,加入PBS后再輕輕混勻, 并于同等條件下離心。如此條件下再重復兩次離心, 然后將細胞溶于 20 mL L-15 完全培養(yǎng)基中制成細胞懸液。

用臺盼藍測定細胞懸液的細胞活力, 以活率＞85%為宜。將活率適宜的細胞懸液進行一定程度稀釋, 再分別接種于 25 cm2培養(yǎng)瓶(BD Bioscience, Erembodegem, 比利時)和 6孔板(TPP, Trasadingen,瑞士)中, 活細胞接種量分別為 107個/瓶和 3.8×106個/孔。培養(yǎng)用瓶和 6孔板的接種表面預先用(2 μg/cm2)層黏蛋白進行了包被。細胞于12℃ 培養(yǎng)24h。每尾魚肝細胞有兩個重復(n=6) 。

胎牛血清(FBS)和谷氨酸酯購于 Gibco-brl/Life Technologies (Gaithersburg, MD, USA), L-15培養(yǎng)基、油酸、層粘連蛋白、膠原酶(VIII)、羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、牛血清白蛋白 (BSA)、臺盼藍等試劑均購自Sigma(Poole, UK)。

1.4 脂肪酸跨膜吸收測定

將分離并培養(yǎng)于培養(yǎng)瓶內(nèi)的貼壁細胞與含[1-14C]OA (美國放射化學有限公司, Laborel, 奧斯陸, 挪威)的培養(yǎng)液(0.3 μCi/瓶)共孵育2h。在這培養(yǎng)液中, 參照大西洋鮭血液脂肪酸濃度, 另添加 OA,使其在培養(yǎng)基中的濃度為 37.5 μmol/L([1-14C]OA/ OA: 1/30, mol/mol)。[1-14C]OA與OA均與BSA結(jié)合。孵育結(jié)束后收集細胞。將培養(yǎng)液移除, 加入1.4 μL PBS液分兩次將細胞轉(zhuǎn)入離心管中, 4℃下離心(500 g) 5min。移除上清, 在獲得的細胞團內(nèi)加入 0.5 mL 0.88% KCl 溶液制成細胞混懸液。用破碎儀將細胞混懸液中的細胞破碎, 再移取細胞破碎液 50 μL與8 mL閃爍液(Ecoscint A, National Diagnostics, USA)混合, 由閃爍計數(shù)器(TRI-CARB 2000CA, United Technologies Packard, U.K.)測其放射活性(M)。

OA吸收量由細胞內(nèi)測得的放射活性(M)為依據(jù),經(jīng)[1-14C]OA 放射活性比活度(μCi/mmol) 轉(zhuǎn)換為[1-14C]OA 摩爾數(shù), 再由 OA 與[1-14C]OA 分子比(30∶1) 換算為總OA摩爾數(shù)。具體計算公式如下:

OA 吸收量[nmol/(h·million cells)]=[(M×10)/ [1-14C]OA比活度(μCi/mmol) ] ×1000×(1+30)/10/2

1.5 脂肪酸膜結(jié)合蛋白的基因表達測定

將培養(yǎng)于6孔板的細胞用含膜蛋白抑制劑的培養(yǎng)液進行與 1.3相同條件的處理, 以未進行抑制劑處理的細胞為對照, 2h后收集細胞并按 TRIZOL?(Invitrogen, California, USA) 法提取細胞總 RNA,再由 RNAwizprotocalTM(Ambion) 試劑盒對其純化,經(jīng)DNA酶(DNA-freeTM, Ambion) 處理后用分光光度法(A260/280)測其質(zhì)量。

cDNA (500 ng) 是根據(jù)TaqMan反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) 在50 μL反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)合成。在這個反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)含 1×TaqMan RT緩沖液, 5.5 mmol/L MgCl2, 每種脫氧核甘(dNTP)含量為500 μmmol/L, 18S rRNA 寡 d(T)16/六聚物為2.5 μmmol/L, RNase 抑制劑和反轉(zhuǎn)錄酶分別為 0.4和1.67 U/μL。每個反應(yīng)系統(tǒng)三個重復。反應(yīng)條件為初始溫度25℃下反應(yīng)10min, 48℃下反應(yīng)60min, 然后95℃下作用5min, 最后降至4℃。對總RNA進行兩倍稀釋以測定計算效率。稀釋曲線由6個系列的稀釋濃度(31—1000 ng) 制成, 每個稀釋濃度3個重復。每批次96孔反應(yīng)板中均有RT對照。PCR引物序列, GenBank 序列號以及每個基因的擴增大小見表2。

定量 PCR采用 FAM 熒光化學原理的LightCycler?480 RT PCR系統(tǒng) (Roche Applied Sciences, Basel, 瑞士) 。RT-PCR反應(yīng)采用SYBR Green Master Mix (LightCycler 480 SYBR Green master mix kit, Roche), 其20 μL反應(yīng)混合物包括FastStart DNA 多聚酶, 基因的特異性引物和 2 μL cDNA (2 μL)。每個樣品3次重復同時以同一反應(yīng)板中無模板組為對照。PCR開始時在50℃下反應(yīng)2min, 然后在 95℃下反應(yīng) 10min, 然后進行 40次循環(huán)反應(yīng): 95℃反應(yīng)15s, 60℃反應(yīng)1min。

參照Roche Applied Science[21]的E-Method對目的基因和管家基因的擴增效率進行了分析, 以EF1-αβ和β-actin兩個管家基因為基礎(chǔ), –ΔCt法計算表2所示基因的相對表達量。

1.6 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)表示為平均數(shù)±標準差 (n=培養(yǎng)瓶數(shù)或培養(yǎng)孔數(shù))。采用隨后用EXCEL中t-test對試驗組和對照組進行統(tǒng)計學檢驗。P＜0.05表示為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同油源對大西洋鮭肝臟脂肪酸組成及脂類組成的影響

經(jīng)過5個月飼喂, 飼料油源對肝臟脂肪酸組成的影響非常顯著, 表現(xiàn)為植物油源組肝臟比魚油組肝臟含有更低水平的 n-3脂肪酸以及飽和與單不飽和脂肪酸, 同時含有較高水平的n-6脂肪酸, 這與植物油源組飼料比魚油組飼料含更低水平 n-3系列脂肪酸、飽和與單不飽和脂肪酸以及含更高水平n-6脂肪酸一致(表 3)。此外, FO及VO組肝臟的n-3/n-6比例也與該組魚所喂飼料油源的n-3/n-6比例一致(表3)。

表2 基因表達中的基因序列信息和引物設(shè)計Tab. 2 The sequence information and primer-design in the relative gene expression.

由表可知, 兩組油源飼喂后, 對大西洋鮭肝臟各類極性脂質(zhì)含量、三酰甘油、膽固醇含量等大量成分均無顯著影響, 僅對脂類組成中的微量成分,如二酰甘油、游離脂肪酸等(0.3—1.1 mg/g)有顯著影響, 表現(xiàn)為VO組高于FO組?？傮w來看, 大豆油與魚油對鮭肝臟脂類含量影響較小。

2.2 油酸的吸收

FO與VO組大西洋鮭肝細胞對油酸的吸收值分別為(0.924±0.258)和(0.888±0.179) nmol/(h·million cells), 組間無顯著差異(P= 0.459)(圖1)。

圖1 植物油替代魚油對大西洋鮭肝細胞OA跨膜吸收的影響Fig. 1 Effect of replacing dietary fish oil (FO) with vegetable oil (VO) on trans-membrane OA uptake in Atlantic salmon hepatocytes

2.3 協(xié)助脂肪酸跨膜吸收膜蛋白的基因表達量

FATP是協(xié)助脂肪酸跨膜吸收的重要膜蛋白之一, 其基因的表達量在 FO與 VO組間無顯著差異(P＞0.05)(圖2A)。另一重要膜蛋白是FAT/CD36, 其組間基因表達量的差異也未達顯著水平(P=0.0515) (圖2B)。

圖 2 飼料油源對大西洋鮭肝細胞 FATP(A)和 FAT/CD36(B)基因表達的影響Fig. 2 Relative gene expression of fatty acid transport protein (FATP, A) and fatty acid translocase (FAT/CD36, B) in hepatocytes of Atlantic salmon

3 討論

飼喂FO和VO兩組飼料的大西洋鮭肝臟脂肪酸組成在飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、n-6或n-3系列脂肪酸方面均有顯著差異, 且分別與所飼油源的脂肪酸組成相一致, 這與以往對大西洋鮭[22—24]、鼠脂肪細胞[25]、虹鱒紅細胞[26,27]等的研究結(jié)果一致,反映出動物機體組織和細胞的脂肪酸組成與所食油源脂肪酸組成保持高度一致的特性。以往試驗[28]及本次試驗(圖1)也發(fā)現(xiàn), 大西洋鮭肝細胞對脂肪酸的跨膜吸收受到細胞膜蛋白抑制劑的抑制, 反映出該

吸收對膜蛋白的依賴性。然而與本研究小組的預設(shè)不同的是, 雖然兩組間大西洋鮭肝細胞膜的脂肪酸組成已受到所飼油源的改變, 但兩組細胞對油酸的吸收并沒有出現(xiàn)明顯差異(P＞0.05), 顯示出盡管細胞膜脂肪酸組成因飼料油源而有所改變, 但膜結(jié)合蛋白的功能或活性等可能并未因此受到影響。

表3 飼喂5個月后飼料和大西洋鮭肝脂肪酸(%)及脂類(mg/g hepatic tissue)組成Tab. 3 Dietary and hepatic fatty acid composition (%) and lipid class composition (mg/g hepatic tissue) after 5 months of feeding and prior to hepatocyte isolation

為進一步了解“油源-細胞膜-膜蛋白-脂肪酸吸收”這一過程中各環(huán)節(jié)間的關(guān)系, 本試驗測定了協(xié)助脂肪酸跨膜吸收的膜蛋白基因表達量。與脂肪酸跨膜吸收密切相關(guān)的膜蛋白包括 FAT/CD36、FATP等, 該類蛋白協(xié)助了細胞對長鏈脂肪酸的吸收[29]。在纖維原細胞[30]、內(nèi)皮細胞[31]和肌細胞[32]的研究中已發(fā)現(xiàn), 增加 FAT/CD36基因表達量能提高細胞對長鏈脂肪酸的吸收。本試驗發(fā)現(xiàn), 在FO與VO兩組油源飼喂下, FATP 和FAT/CD36兩基因表達量在兩組間均無顯著差異(P＞0.05)。Torstensen, et al.[4]在大西洋鮭的研究中也發(fā)現(xiàn), 在100% FO和100% VO飼喂下, 肝臟和紅肌的FAT/CD36和FATP基因表達在組間無顯著差異。本試驗FO與VO組FATP與FAT/ CD36基因表達量的結(jié)果與其肝細胞對油酸吸收量無差異的結(jié)果一致, 表明飼料油源對大西洋鮭肝細胞的脂肪酸跨膜吸收無顯著影響, 為大西洋鮭飼料中植物油替代魚油的可行性提供了一定的理論依據(jù)。

在本試驗中選擇OA作為研究LCFA跨膜吸收的指示性脂肪酸, 是由于這種脂肪酸在魚油和植物油中均存在, 是兩類油脂共有的脂肪酸, 也是LCFA中的典型脂肪酸。研究發(fā)現(xiàn), 在同種油源飼喂下大西洋鮭的肝細胞對不同LCFA的吸收僅有量的區(qū)別,表現(xiàn)為20:5n-3≥22:6n-3＞18:3n-3=18:2n-6＞18:1n-9[28],而不同油源飼喂下鮭的肝細胞對不同脂肪酸的吸收沒有顯示互作效應(yīng)[33], 表明細胞對不同脂肪酸的吸收相對獨立且效果一致, 因此在本文中細胞對油酸的跨膜吸收情況一定程度上可代表其他LCFA的吸收狀況。

4 結(jié)論

植物油替代魚油對大西洋鮭肝細胞跨膜吸收長鏈脂肪酸無顯著影響, 從跨膜吸收方面來看, 大西洋鮭飼料中用植物油替代魚油具有一定可行性。

致謝:

感謝挪威國家海產(chǎn)品營養(yǎng)研究所(the National Institute of Nutrition and Seafood Research, NIFES)的 Betty Irgens女士和Thu Thao Nguyen女士在實驗技術(shù)上的幫助。

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OLEIC ACID TRANS-MEMBRANE UPTAKE IN HEPATOCYTES OF ATLANTIC SALMON (SALMO SALAR L.) AND EFFECT OF REPLACING DIETARY FISH OIL WITH VEGETABLE OIL

ZHOU Ji-Shu1,2, Bente E. Torstensen2and Ingunn Stubhaug2,3
(1. College of Animal Science and Technology, Northwest A&F University, Yangling 712100 China; 2. National Institute of Nutrition and Seafood Research (NIFES), P.O.Box 2029, Nordnes, 5817 Bergen, Norway; 3. Skretting ARC, Stavanger, Norway)

Taking [1-14C] OA (oleic acid;18:1n-9) as the indicator, the uptake of OA in Atlantic salmon (Salmo salar L.) hepatocyte with different membrane fatty acid composition induced by dietary fish oil (FO) and vegetable oil (VO) diets was determined to investigate the effect of replacing dietary fish oil with vegetable oil on fatty acid uptake and to provide the probability of replacing dietary fish oil with vegetable oil in Atlantic salmon diet. Atlantic salmon post smolt was fed diets containing either 100% FO or VO for 5 months to produce hepatocytes with typical FO and VO fatty acid composition, then OA uptake in isolated hepatocytes were studied by incubating with [1-14C] OA and 37.5 μmol/L OA (1/30, mol/mol, 0.3 μCi/flask) for 2h and by calculating the radioactivity in the cells. Meanwhile total RNA of the other same batch of FO and VO hepatocytes were extracted and the relative expression of FATP (fatty acid transport protein) and FAT/CD36 (fatty acid translocase) were determined by RT-PCR. The result showed that OA uptake in FO and VO was (0.924±0.258) nmol/(h·million cells) cells and (0.888±0.179) nmol/(h·million cells) respectively and there was no significant different between them (P＞0.05). The relative expression of FATP and FAT/CD36 were not significantly different between FO and VO hepatocytes too. The results indicate that by the same OA uptake between FO and VO hepatocytes, replacing dietary FO with VO was available in Atlantic salmon diet.

Vegetable oil; Fish oil; Atlantic salmon; Hepatocyte; Fatty acid; Trans-membrane uptake

S965.2

A

1000-3207(2014)01-0121-08

10.7541/2014.16

2012-11-19;

2013-09-28

西北農(nóng)林科技大學科研啟動(2010BSJJ008); 國家留學基金委員會聯(lián)合培養(yǎng)項目及挪威國家海產(chǎn)品營養(yǎng)研究所(the National Institute of Nutrition and Seafood Research, NIFES)資助

周繼術(shù)(1973—),女, 重慶人; 博士; 主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)、健康與飼料研究。E-mail: zhoujishu@163.com