王立英 劉偉 唐志琴 段繼慧

抗核抗體譜檢測在自身免疫性疾病診斷中的價值

王立英 劉偉 唐志琴 段繼慧

作者單位：300192 天津市，天津市第一中心醫(yī)院檢驗科

目的 分析自身免疫性疾?。╝utoimmune disease，AID）患者抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）譜檢測結果，評價ANA譜在診斷AID中的應用價值。方法選擇2012年5月－2013年5月于我院就診的AID患者513例，非AID患者353例，并對其ANA譜的檢測結果進行回顧性分析。結果系統(tǒng)性紅斑狼瘡組抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體、抗SM抗體、抗SSA抗體、抗rRNP抗體陽性率均高于對照組，且差異均有統(tǒng)計學意義（P均<0．05）；混合性結締組織病組抗U1RNP抗體、抗SSA抗體陽性率均高于對照組，且差異均有統(tǒng)計學意義（P均<0．05）；干燥綜合征組抗SSA抗體、抗SSB抗體陽性率均高于對照組，且差異均有統(tǒng)計學意義（P均<0．05）；進行性系統(tǒng)性硬化病組抗SCL－70抗體、抗CENP－B抗體陽性率均高于對照組，且差異均有統(tǒng)計學意義（P均<0．05）；多發(fā)性肌炎／皮肌炎組抗JO－1抗體陽性率高于對照組，且差異有統(tǒng)計學意義（P<0．05）。當抗組蛋白抗體、抗核小體抗體、抗rRNP抗體和抗dsDNA抗體同時陽性時，系統(tǒng)性紅斑狼瘡組陽性率顯著高于混合性結締組織病組，且差異有統(tǒng)計學意義（P<0．05）。結論ANA譜檢測對AID的診斷及鑒別診斷有重要價值。

自身免疫性疾病；抗核抗體譜；診斷

自身免疫性疾?。╝utoimmune disease，AID）是一種與自身免疫密切相關，血清中可出現(xiàn)多種自身抗體并由此引起多系統(tǒng)多臟器受累的多樣化疾病，又稱風濕性疾病。如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE），混合性結締組織?。╩ixed connective tissue disease，MCTD），干燥綜合征（Sjogren＇s syndrome，SS），進行性系統(tǒng)性硬化?。╬rogressive systemic sclerosis，PSS），多發(fā)性肌炎／皮肌炎（polymyositis and dermatomyositis，PM／DM）等［1］。AID臨床表現(xiàn)錯綜復雜，任何年齡均可發(fā)病，發(fā)病過程中常導致組織和器官的損傷。AID患者在細胞免疫和體液免疫方面都有很多異常，多種自身抗體的出現(xiàn)對AID的發(fā)病和診斷具有重要意義，有些自身抗體不僅存在于一種AID中，也可存在于幾種AID中［2，3］。檢測這些自身抗體有助于AID的診斷和鑒別診斷，本文研究對2012年5月至2013年5月我院513例AID患者血清中的多種自身抗體檢測結果進行回顧性分析，以探討抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）譜對不同AID的診斷及鑒別診斷價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2012年5月－2013年5月于我院就診的AID患者513例，女457例，男56例；年齡15～79歲，平均年齡（42．3±11．1）歲。其中SLE患者91例，MCTD患者319例，SS患者77例，PSS患者5例，PM／DM患者21例，每種疾病診斷均符合美國風濕病協(xié)會診斷標準［4］。對照組選取我院同期非AID住院患者353例，女122例，男231例；年齡17～85歲，平均年齡（46．7±13．2）歲。其中不同腎病患者109例，不同血液病患者116例，皮膚病患者63例，甲狀腺疾病患者37例，糖尿病患者18例，慢性肝炎患者10例。

1.2 方法

1.2.1 標本采集與分離采集所有受試者清晨空腹靜脈血3 ml，靜置30 min后，以離心半徑10 cm，3500 r／min離心8 min分離血清。

1.2.2 ANA譜檢測ANA譜檢測采用歐蒙免疫印跡法，試劑盒為德國歐蒙公司生產(chǎn)，嚴格按照操作說明書進行檢測。首先，按比例稀釋血清進行抗原抗體反應，然后加入酶標抗體進行反應，最后加入顯色劑顯色，結果以出現(xiàn)一條黑色標志線判為陽性。

1.3 統(tǒng)計學處理采用SPSS 19．0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料比較采用卡方檢驗，以P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同AID組患者與對照組患者ANA譜檢測結果91例SLE患者抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體、抗SM抗體、抗SSA抗體、抗rRNP抗體陽性率分別為46．2%（χ2＝152．986）、37．4%（χ2＝121．343）、35．2%（χ2＝122．474）、19．8%（χ2＝67．141）、60．4%（χ2＝133．904）、28．6%（χ2＝78．116）高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P均＜0．05）。319例MCTD患者抗U1RNP抗體、抗SSA抗體陽性率分別為48．9%（χ2＝207．408）、32．0%（χ2＝63．928）高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P均＜0．05）。77例SS患者抗SSA抗體、抗SSB抗體陽性率分別為75．3%（χ2＝182．543）、39．0%（χ2＝105．651）高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P均＜0．05）。PSS組5例患者抗SCL－70抗體、抗CENP－B抗體陽性率分別為40．0%（χ2＝93．589）、20．0%（χ2＝12．743）高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P均＜0．05）。21例PM／DM患者抗JO－1抗體陽性率為19．0%（χ2＝42．886）高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0．05），見表1。

2.2 抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體、抗rRNP抗體同時陽性時，SLE組與MCTD組陽性結果比較當抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體、抗rRNP抗體四種抗體同時陽性時，SLE組陽性率顯著高于MCTD組陽性率，差異有統(tǒng)計學意義（χ2＝29．666，P＜0．05），見表2。

3 討論

AID是一種與自身免疫關系密切的疾病，在患病過程中，既有T細胞參與的細胞免疫，也有B細胞活化產(chǎn)生的體液免疫，多種自身抗體的出現(xiàn)使其臨床表現(xiàn)復雜多樣，尋找與AID診斷密切相關的血清學指標十分重要。ANA譜正是對血清中的多種自身抗體進行檢測，目前，ANA譜已包括抗細胞核、細胞漿、細胞骨架、細胞分裂周期蛋白等不同臨床意義的三十余種自身抗體［5］。ANA見于多種AID，因此，檢測ANA譜對AID的診斷及鑒別診斷具有重要意義及應用價值。

表1 不同AID組患者與對照組ANA譜陽性率檢測結果比較［n（%）］

表2 SLE組與MCTD組抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體、抗rRNP抗體同時陽性的陽性率比較［n（%）］

SLE患者免疫調節(jié)異常，在細胞凋亡過程中，吞噬細胞不能完全吞噬染色質斷裂所釋放的核酸，從而可產(chǎn)生多種ANA。本文研究結果顯示，SLE患者多種自身抗體陽性率均高于對照組，且差異有統(tǒng)計學意義，與上述觀點一致?？筍M抗體是酸性糖蛋白，幾乎僅見于SLE患者血清中，因其特異性高，是目前公認的診斷SLE的血清標志性抗體，陽性率為5%～30%［6］。本文研究結果顯示，僅SLE組抗SM抗體陽性率為19．8%，其余AID組均為陰性，表明抗SM抗體對SLE的診斷具有較高的特異性?？筪sDNA抗體是SLE高度特異性抗體，已作為SLE的診斷標準之一［5］。本文研究結果顯示，SLE組抗dsDNA抗體陽性率為46．2%，顯著高于對照組，抗dsDNA抗體的表達也可隨有效藥物治療后降低甚至轉陰?？购诵◇w抗體在SLE患者血清中為主要自身抗原，近年的研究［7］已得到證實，SLE患者核小體過度釋放，不但使同源B細胞產(chǎn)生抗核小體抗體，而且還可引起抗dsDNA抗體和抗組蛋白抗體的形成。有研究［8］表明，抗核小體抗體檢測對SLE的診斷具有越來越重要的意義。本文研究結果顯示，抗核小體抗體陽性率在SLE組中最高，為35．2%，其次為MCTD組（8．5%）。本文研究還發(fā)現(xiàn)，抗核小體抗體陽性可出現(xiàn)在抗dsDNA抗體檢測陰性患者血清中，也可出現(xiàn)在抗SM抗體、抗組蛋白抗體檢測為陰性的患者血清中，提示抗核小體抗體在疾病的診斷中可以彌補其他抗體的不足。

研究［9］表明，抗rRNP抗體與中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟受累有關。動物實驗［10］表明，抗dsDNA抗體、抗核小體抗體與早期狼瘡腎炎的形成有密切關系?？菇M蛋白抗體雖不具有診斷特異性，但有學者［11］認為可參與狼瘡腎炎的發(fā)病。由本文研究結果可以看出，抗組蛋白抗體、抗核小體抗體、抗rRNP抗體、抗dsDNA抗體四種抗體同時陽性出現(xiàn)在SLE組的幾率比MCTD組高出很多，預示SLE患者發(fā)生狼瘡腎炎的可能性較高。這與學者Bruner等［12］的研究報道相一致。

本文研究結果顯示，抗U1RNP抗體陽性率在MCTD組為48．9%，SLE組為28．6%，SS組為6．5%，PM／DM組為4．8%，表明抗U1RNP抗體是MCTD的特異性抗體，陽性率最高，同時，其對SLE診斷也具有一定輔助意義。

抗SSA抗體、抗SSB抗體是SS的特異性抗體，本文研究結果顯示，抗SSB抗體陽性率在SS組最高為39．0%，抗SSA抗體在SS組、SLE組陽性率分別為75．3%、60．4%，與陸俊忠等［13］報道抗SSA抗體陽性率在SS組、SLE組中分別為72．5%、64．0%，抗SSB抗體在SS組中為42．5%的結果基本一致，說明抗SSB抗體是SS特異性抗體?？筍SB抗體僅在少數(shù)SLE患者中出現(xiàn)，陽性率為10%～15%。本文研究中，SLE組抗SSB抗體陽性率為9．9%?？筍SA抗體與抗SSB抗體常同時檢測出，聯(lián)合檢測對提高SS的診斷有重要意義。

本文研究結果顯示，PSS組抗SCL－70抗體陽性率為40．0%，在其他AID組和對照組極少陽性，表明抗SCL－70抗體是PSS標志性抗體［5］，提示抗SCL－70抗體檢測對PSS診斷有重要價值。本文研究中PSS組抗SCL－70抗體陽性率結果低于文獻［14］報道的66．7%，考慮可能與本文研究樣本量較少有關，應加大樣本量進行進一步檢測?？笴ENP－B抗體是局限型PSS特異性抗體，陽性率平均為30%，在其他AID陽性率小于5%［15］。本文研究結果顯示，PSS組抗CENP－B抗體的陽性率為20．0%，而SLE組、MCTD組、SS組陽性率均小于5%，需要特別指出的是抗CENP－B抗體與抗SCL－70抗體很少同時檢測出，抗CENP－B抗體也不能用于彌漫性硬皮病的診斷。

抗JO－1抗體多為PM／DM的血清標志性抗體，陽性率為20%～30%，抗體的效價與疾病的活動性相關。本文研究結果顯示，PM／DM組抗JO－1抗體陽性率為19．0%，其他AID組幾乎陰性，提示抗JO－1抗體對PM／DM的診斷具有較高的特異性。

總之，靶抗原的不同造成多種自身抗體的出現(xiàn)，ANA譜檢測十多種自身抗體的高表達對幫助診斷AID提供了依據(jù)，具有很好的應用價值。有些自身抗體可存在于幾種AID中，聯(lián)合檢測可提高試驗的敏感性和陰性預測值，可提高診斷準確率。本文研究血清ANA譜檢測僅是自身抗體中的一小部分，正確認識ANA系列中每一項抗體的價值意義，對AID的診斷及鑒別診斷具有重要的指導作用。

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（本文編輯：陳淑蓮）

The value of antinuclear antibody series in autoimmune diseases diagnosis

WANG Li－ying，LIU Wei，TANG Zhi－qin，et al．Department of Clinical Laboratory，Tianjin First Center Hospital，Tianjin 300192，China

ObjectiveTo evaluate the value of antinuclear antibody（ANA）series tests in the diagnosis of autoimmune diseases（AID）．Methods513 cases AID patients and 353 cases without AID patients were selected from May 2012 to May 2013．And results of ANA series tests in these patients were analyzed retrospectively．ResultsThe positive rates of anti－dsDNA antibody，anti－h(huán)istone antibody，anti－nucleosomes antibody，anti－SM antibody，anti－SSA antibody，anti－rRNP antibody in systemic lupus erythematosus（SLE）group were all higher than those of control group，and the differences all had statistical significance（Pall＜0．05）．The positive rates of anti－U1RNP antibody and anti－SSA antibody in mixed connective tissue disease（MCTD）were all higher than those of control group，and the differences all had statistical significance（Pall＜0．05）．The positive rates of anti－SSA antibody and anti－SSB antibody in primary Sjogren＇s syndrome group，and anti－SCL－70 antibody and anti－CENP－B antibody in progressive systemic sclerosis group，and anti－JO－1 antibody in polymyositis and dermatomyositis group were all higher than those of control group，and the differences all had statistical significance（Pall＜0．05）．The positive rate of anti－h(huán)istone antibody，anti－nucleosomes antibody，anti－rRNP antibody and anti－dsDNA antibody all together positive in SLE group was higher than that of MCTD group，and the difference had statistical significance（P＜0．05）．ConclusionANA series tests have great significance in the discrimination diagnosis and diagnosis of the AID．

Autoimmune disease；Antinuclear antibody series；Diagnosis

10.3969／j.issn.1674－7151.2014.02.006

2014－04－01）