益氣通脈飲對(duì)慢性心力衰竭大鼠心功能及血清ANP、BNP含量的影響

吉利 張艷

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧沈陽(yáng) 110032）

益氣通脈飲對(duì)慢性心力衰竭大鼠心功能及血清ANP、BNP含量的影響

吉利 張艷

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧沈陽(yáng) 110032）

目的：探討益氣通脈飲不同劑量給藥對(duì)慢性心力衰竭（CHF）大鼠心功能及心鈉素（ANP）、腦鈉素（BNP）含量的影響。方法：采用結(jié)扎大鼠左冠狀動(dòng)脈主干的方法復(fù)制急性心梗后心衰大鼠模型，造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、中藥等效劑量組、中藥大劑量組、西藥對(duì)照組，另設(shè)正常對(duì)照組，每組8只，分別給予相應(yīng)藥物或生理鹽水連續(xù)灌胃8周后，多普勒超聲心動(dòng)圖機(jī)測(cè)定CHF大鼠心功能，酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)大鼠血清中ANP、BNP含量。結(jié)果：與模型對(duì)照組比較，益氣通脈飲各劑量組大鼠治療后心功能各項(xiàng)指標(biāo)均有不同程度改善，ANP、BNP含量明顯降低。結(jié)論：益氣通脈飲可以改善CHF模型大鼠的心功能，降低血清中ANP、BNP含量，從而延緩慢性心力衰竭的發(fā)生和發(fā)展。

心力衰竭 益氣通脈飲 心功能 ANP BNP

慢性心力衰竭（CHF）是心血管疾病的終末期表現(xiàn)和最主要的死因。近年來(lái)，筆者通過(guò)臨床研究發(fā)現(xiàn)，心氣虛衰是CHF發(fā)病的始動(dòng)因素，而血瘀是CHF的中心病理環(huán)節(jié)。我們根據(jù)CHF的病機(jī)特點(diǎn)，篩選藥物制成益氣通脈飲，治療CHF取得了良好的療效。為了進(jìn)一步探求益氣通脈飲治療CHF的作用機(jī)理，我們建立CHF大鼠模型，觀察益氣通脈飲對(duì)CHF模型大鼠的心功能及血清心鈉素（ANP）、腦鈉素（BNP）含量的影響，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物10～12周齡健康雄性Wistar大白鼠100只，體重250～300g，由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 試劑益氣通脈飲：由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房提供，制成每毫升含生藥1.26g的溶液。藥物組成：黃芪30g，人參10g，紅花20g，丹參15g，三七10g，益母草30g，葶藶子20g?？扑貋啠河珊贾菽硸|制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20000371，規(guī)格：50mg/片。大鼠心鈉素（ANP）、腦鈉素（BNP）酶聯(lián)免疫試劑盒：購(gòu)于武漢新啟迪生物科技有限公司，產(chǎn)品編號(hào)分別為EIA06242、EIA06249。儀器設(shè)備：DH-140B型小動(dòng)物呼吸機(jī)，由浙江醫(yī)科大學(xué)醫(yī)療實(shí)驗(yàn)儀器廠生產(chǎn)；MS-2000多媒體化心電圖軟件，由廣州市龍飛達(dá)科技有限公司生產(chǎn)；SONOS5500分色多普勒超聲心動(dòng)圖機(jī)，由Agilent公司生產(chǎn)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 造模與分組參考文獻(xiàn)[1]方法，在無(wú)菌操作下，于胸骨左側(cè)第3、4肋間皮膚處橫向切開(kāi)長(zhǎng)約1.5cm的切口，鈍性分離軟組織，暴露心臟后，于左冠狀動(dòng)脈前降支起點(diǎn)下2～4mm處用6號(hào)絲線結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈主干造成急性心肌梗死模型。術(shù)后記錄標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)聯(lián)及胸前導(dǎo)聯(lián)（紙速50mm/s）心電圖，ST段弓背抬高者為造模成功。常規(guī)喂養(yǎng)飼料與水1周后，于第2周將其飼料減半，致大鼠處于半饑餓狀態(tài)，常規(guī)喂水；于第3周開(kāi)始，每天游泳1次，致疲乏無(wú)力（約20min）；于第4周由電檢科醫(yī)生做彩色超聲多普勒心動(dòng)圖，測(cè)定左室收縮末期容積（ESV）、左室舒張末期容積（EDV）、左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左室每搏輸出量（SV），進(jìn)而計(jì)算出左室心指數(shù)（CI），CI≤180mL/（min·kg）者作為心衰成功模型入選。入選的大鼠隨機(jī)分成4組：模型對(duì)照組、中藥等效劑量組、中藥大劑量組、西藥對(duì)照組，另取心功能正常的大鼠作為正常對(duì)照組，每組8只。

2.2 給藥造模成功后，中藥等效劑量組與大劑量組分別按照5.4g/kg、16.2g/kg予中藥煎取液灌胃，即相當(dāng)于臨床成人劑量與3倍成人劑量；西藥對(duì)照組予科素亞混懸液，按4.5mg/kg灌胃，相當(dāng)于臨床成人劑量；模型對(duì)照組與正常對(duì)照組以同體積的生理鹽水灌胃。每日1次，共8周。

2.3 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法心功能檢查：給藥結(jié)束后由電檢科醫(yī)生為大鼠做彩色超聲多普勒心動(dòng)圖，測(cè)定左室收縮末期容積（ESV）、左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左室舒張末期容積（EDV）、左室每搏輸出量（SV），各項(xiàng)數(shù)值均經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后獲得。血清ANP、BNP含量測(cè)定：給藥結(jié)束后，在5%戊巴比妥（2～3mL/kg）腹腔注射麻醉下開(kāi)胸取左心室腔血2mL，注入試管中，搖勻，4℃3000r/min離心10min，取血清置于-20℃保存，用酶聯(lián)免疫法測(cè)定ANP與BNP含量，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0 for windows統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析。各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果均以（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 各組大鼠一般狀態(tài)比較除正常對(duì)照組外，其他各組大鼠在造模后均出現(xiàn)不同程度的蜷臥、脫毛、消瘦、厭食、便溏等癥狀，尤以未經(jīng)任何治療的模型對(duì)照組最重。模型對(duì)照組大鼠一般狀態(tài)差，表現(xiàn)為活動(dòng)度顯著下降，進(jìn)食及飲水量明顯減少，消瘦明顯。各組大鼠治療后狀態(tài)普遍有所改善，尤以中藥等效劑量組最為明顯，表現(xiàn)為食欲增加，活動(dòng)較多，一般狀態(tài)尚可。中藥大劑量組和西藥對(duì)照組與模型對(duì)照組相比，一般狀態(tài)也有所改善，但不如中藥等效劑量組明顯。

3.2 各組大鼠心功能的變化結(jié)果見(jiàn)表1。中藥等效劑量組和西藥對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3.3 各組大鼠血清ANP、BNP含量比較見(jiàn)表2。中藥大劑量組、等效劑量組和西藥對(duì)照組大鼠血清ANP、BNP含量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

4 討論

隨著對(duì)慢性心力衰竭研究的深入，專家學(xué)者發(fā)現(xiàn)了一種肽類物質(zhì)——利鈉肽類與心衰有關(guān)。人類有三種利鈉肽類：心鈉肽（ANP）、腦鈉肽（BNP）和C型利鈉肽（CNP）。ANP主要由心房分泌，生理作用為擴(kuò)張血管和利尿排鈉，BNP主要由心室合成和分泌[2]，生理作用與ANP相似但較弱，CNP的生理作用尚不明確。在某種意義上，慢性心力衰竭是一種神經(jīng)激素細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失衡狀態(tài)。在初始的心肌損傷以后，腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）和交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮性增高，多種內(nèi)源性的神經(jīng)內(nèi)分泌和細(xì)胞因子激活，加重心肌損傷和心功能惡化，進(jìn)而又導(dǎo)致神經(jīng)內(nèi)分泌和細(xì)胞因子被進(jìn)一步激活，從而形成惡性循環(huán)[3]。另一方面，心力衰竭時(shí)，心室壁張力增加，ANP及BNP分泌明顯增加，其增高的程度與心衰的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，可以拮抗這些激素和細(xì)胞因子對(duì)心血管的不利效應(yīng)。因而，無(wú)論在診斷、治療CHF方面，還是在判斷預(yù)后方面，ANP、BNP都有著極為重要的臨床意義[4]。

CHF多歸屬于中醫(yī)學(xué)“心悸”、“怔忡”、“心痹”等范疇。本研究認(rèn)為CHF的基本病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，心氣虧虛為本，血瘀為標(biāo)。益氣通脈飲是基于心氣虛衰為CHF發(fā)病的基礎(chǔ)、血瘀是其中心病理環(huán)節(jié)的理論認(rèn)識(shí)基礎(chǔ)上，結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)而組方的。全方由黃芪、人參、紅花、丹參、三七、益母草、葶藶子組成，方中重用補(bǔ)益心氣之劑，輔以活血化瘀之品，使正復(fù)邪去，氣充血行，血無(wú)“留滯”，氣機(jī)調(diào)暢。

本研究結(jié)果表明，益氣通脈飲能夠改善大鼠的一般狀況，使其食欲增加，活動(dòng)靈活。中藥等效劑量組、大劑量組以及西藥對(duì)照組的心功能指標(biāo)（ESV、LVEF、EDV、SV）同模型對(duì)照組比較均有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01），說(shuō)明益氣通脈飲和科素亞均能有效地改善大鼠心功能；西藥對(duì)照組和中藥等效劑量組之間比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），說(shuō)明益氣通脈飲改善大鼠心功能的療效與科素亞相當(dāng)。中藥各劑量組和西藥對(duì)照組大鼠血清ANP、BNP含量均較模型對(duì)照組顯著降低（P＜0.05或P＜0.01），而中藥各劑量組和西藥對(duì)照組之間血清ANP、BNP含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 各組大鼠治療后心功能比較（±s）

表1 各組大鼠治療后心功能比較（±s）

注：與模型對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與西藥對(duì)照組比較，△P＜0.05。

組別動(dòng)物數(shù)（只）劑量（g/kg）LVEF （%）正常對(duì)照組ESV （mL）8 EDV （mL）81±11**SV （mL）79±21**149±16**68±29*模型對(duì)照組191±2833±58265±3454±17 8西藥對(duì)照組80.004586±32**71±36**150±19**62±13*中藥大劑量組816.2106±21*△53±28*△167±17**61±27△中藥等效劑量組85.498±29**68±26**165±18**63±28*

表2 各組大鼠血清ANP、BNP含量比較（±s）

表2 各組大鼠血清ANP、BNP含量比較（±s）

注：與正常對(duì)照組比較，##P＜0.01；與模型對(duì)照組比較，*P＜0.01，**P＜0.01。

組別動(dòng)物數(shù)（只）劑量（g/kg）ANP（pg/mL）正常對(duì)照組8 8 8 BNP（pg/mL）38.95±8.3617.48±7.27模型對(duì)照組75.56±9.52##39.32±6.64##西藥對(duì)照組42.23±5.19**21.79±9.39**中藥大劑量組45.42±11.74**27.49±12.28*中藥等效劑量組60.74±13.41*29.16±10.06*0.0045 8 16.2 8 5.4

目前已經(jīng)證實(shí)，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑和血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑除了改善心衰癥狀之外，更重要的是降低心衰患者代償性神經(jīng)-體液的不利影響，從而延緩心衰進(jìn)展，降低患者的遠(yuǎn)期死亡率。益氣通脈飲是否通過(guò)類似的機(jī)制，通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞因子以及影響利鈉肽系統(tǒng)而改善心功能，有待于進(jìn)一步的研究。

[1]王朔仁，趙明鏡，王振濤，等.建立心肌梗死心氣虛血瘀證和心陽(yáng)虛血瘀證病癥動(dòng)物模型的研究.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2008，28 （3）：245

[2]Maekawa K，Sudoh T，F(xiàn)urusawa M，et al.Cloning and sequence analysis of cDNA encoding a precursor for porcine brain natrinretic peptide.Biochem Biophys Res Commun，1988，157 （1）：410

[3]Michael CA.B-type natriuretic peptide predicts death inwomen. JAm Coll Cardiol，2006，48：1808

[4]陳灝珠，鐘南山，陸再英.內(nèi)科學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：166

編輯：吳寧

R541.610.5文獻(xiàn)識(shí)別碼A

1672-397X（2014）09-0073-02

吉利（1973-），女，博士，副教授，主要從事心血管內(nèi)科的臨床教學(xué)與科研。lgych@163.net

2014-04-10