朱敏

（懷化市公安局 刑偵支隊(duì)，湖南 懷化 418000）

1 案情簡(jiǎn)介

2011年11月25日，某區(qū)某局三樓辦公室發(fā)生盜竊案，偵查人員在現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)吃剩的棗核數(shù)枚，分別包裝、送檢。

2 檢驗(yàn)過(guò)程及結(jié)果

使用“雙棉簽技術(shù)”[1]提取棗核表面的唾液斑，放入 1.5 mL Eppendorf管，用 QIAamp DNA Investigator試劑盒（德國(guó)Qiagen公司）抽提DNA：加入ATL緩沖液 180μL、PK 20μL，振蕩混勻，56℃保溫 2h以上；加入 AL 緩沖液 200 μL、載體 RNA（Carrier-RNA）2 μL，70℃保溫10min，短暫離心，上清過(guò)柱，其余步驟按說(shuō)明書進(jìn)行，在最后的洗脫步驟時(shí)加入56℃預(yù)熱的純水20 μL，室溫放置 2 min，14000 r/min 離心 3 min（離心半徑5 cm），收集上清備用。

圖1 棗核上唾液斑DNA分型圖譜

3 討論

水果中富含糖類，暴露于空氣中的水果殘骸受到微生物滋生影響，其上附著的人源性唾液斑DNA迅速發(fā)生降解，另外，果酸對(duì)PCR有抑制作用，這些因素可能導(dǎo)致DNA檢驗(yàn)失敗，因此，對(duì)于此類檢材，必須及時(shí)送檢。遺留于現(xiàn)場(chǎng)的水果殘骸應(yīng)該分別提取、分別檢驗(yàn)，避免因混合分型而影響比對(duì)。

對(duì)于微量的生物檢材，在提取DNA之前要對(duì)常用的抽提方法如Chelex法、磁珠法、離心柱法等進(jìn)行篩選，針對(duì)載體的不同，考慮其中可能存在的雜質(zhì)或污染物的成分，選定合適的提取方法。在本案中，載體為體積很小的棗核，我們采取“二步轉(zhuǎn)移法”，充分轉(zhuǎn)移了載體表面的唾液斑，為后續(xù)DNA擴(kuò)增的成功創(chuàng)造了條件。用QIAamp DNA Investigator試劑盒提取DNA的過(guò)程中，采取了一些行之有效的措施：在AL緩沖液中加入載體RNA、將洗脫液預(yù)熱、將洗脫液體積減小，這樣提高了PCR擴(kuò)增的成功率。

為了更好地發(fā)揮DNA數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)破案的作用，作為基層DNA實(shí)驗(yàn)室，在重視 “大要案”的偵破、全力推進(jìn)違法犯罪人員DNA采集建庫(kù)的同時(shí)，也要重視對(duì)“小案”的現(xiàn)場(chǎng)生物物證檢驗(yàn)，以充分發(fā)揮DNA數(shù)據(jù)庫(kù)在破案中的作用。

[1] Bulter JM.法醫(yī)DNA分型專論：方法學(xué)[M].侯一平，李成濤，譯.北京： 科學(xué)出版社，2013：5.