江 峰 彭獻東陳 華 陳國武 孫曉溪 趙偉鵬

上海集愛遺傳與不育診療中心（上海200011）

老年男性采用單精子卵泡漿內(nèi)注射（ICSI）治療結(jié)果分析

江 峰 彭獻東*陳 華 陳國武 孫曉溪 趙偉鵬

上海集愛遺傳與不育診療中心（上海200011）

目的回顧性分析老齡男性對單精子卵泡漿內(nèi)注射（ICSI）結(jié)果影響。方法將男性患者分成兩組，平均年齡（64±3）歲以上為研究A組（27例），平均年齡（35±2）歲為對照B組（54例），該兩組的女性配偶平均年齡相仿。結(jié)果兩組之間的受精率無明顯統(tǒng)計學差異（75.3%與82.4%），但B組的臨床妊娠率要明顯高于A組（P＜0.01），但仍需要更多研究。另外A組患者精液分析顯示精液量、精子濃度、正常精子形態(tài)率均明顯低于B組（P＜0.05），但這并不影響卵子的受精率。結(jié)論 男性年齡會影響ICSI治療后的臨床妊娠率。

精子注射, 細胞質(zhì)內(nèi); 年齡因素; 妊娠

女方年齡對夫婦生育力的影響是顯而易見的，其中部分人群需借助輔助生育技術(shù)，甚至借卵等方能完成生育愿望，相反臨床上對男性年齡可能對生育力影響的關(guān)注并不多，最近的一些研究表明男性年齡的增長可能增加精子DNA損傷的風險、女方妊娠后自然流產(chǎn)、死胎、出生缺陷等[1]。以往60歲以上擬生育的男性數(shù)量少，且往往需采用輔助生育進行治療，故報道并不多見。本文是對本中心2005年至2012 年60歲以上老年男性采用單精子卵泡漿內(nèi)注射（intracytoplasmic sperm injection ICSI）技術(shù)治療的情況進行回顧性分析。

資料和方法

一、臨床資料

我們選擇2005年至2012年在上海集愛遺傳與不育診療中心總共27對男性年齡在60歲以上，配偶年齡在40歲以下的夫婦作為實驗組（A組），同時抽取同期54對夫婦年齡均在40歲以下夫婦作為對照組（B組），特別女方年齡與實驗組（A組）匹配，并且按1:2的比例進行配比分析。兩組超過60%以上病例是男性因素導致不育，或考慮避免受精失敗故均采用ICSI治療方式。

27對夫婦男方年齡（64.61±3.57）歲，女方年齡（36.73±5.23）歲。27對夫婦中14對為男方非中國國籍，女方為中國國籍，值得一提的是該14對夫婦中有7對男方曾行雙側(cè)輸精管結(jié)扎手術(shù)后，說明國外有些國家男性曾采用該方法避孕，而相對國人采用該方法的并不多或因地域主要避孕措施的不同，或可能與其傳統(tǒng)習俗教育背景有關(guān)。另外27對夫婦中同時女方伴有輸卵管炎因素7例，子宮內(nèi)膜異位癥2例。27對夫婦男方均為再婚，前次婚姻中19例（70.37%）男性有生育史，女方曾有14例（51.85%）也曾有妊娠史。

我中心2005年至2012年共行輔助生育21963周期，其中27對老年男性夫婦共行32個周期，約占比例僅為0.146%，對27對夫婦均以最末次行輔助生育時各項指標狀況作為統(tǒng)計數(shù)據(jù)。

二、方法

（一）女方促排卵方式

采用超長方案（每月一支3.75mg的長效曲普瑞林，瑞士輝淩制藥下同，使用2～3個月）、長方案（在前一周期的黃體期開始每天使用0.05mg～0.1mg的曲普瑞林至HCG日）、短方案（周期的第3天開始每天使用0.1mg的曲普瑞林至HCG日）或拮抗劑方案（在給予Gn促性腺激素的第6天或當卵泡接近直徑14mm或LH有上升趨勢給予每天0.25mg思則凱Cetrotide德國默克雪蘭諾，至HCG日）降調(diào)節(jié)，然后根據(jù)患者的自身條件，促性腺激素的起始劑量從150-225IU開始。促排卵過程中根據(jù)B 超監(jiān)測結(jié)果和血清E2值適當調(diào)整促性腺激素劑量。當2個或2個以上主導卵泡的直徑達18mm時肌注hCG5000-10000IU（廣東珠海 麗珠集團），并于34～36h后在B 超監(jiān)測下穿刺取卵。

（二）胚胎移植

根據(jù)精子質(zhì)量情況采用ICSI授精，胚胎移植選擇在取卵后第3～5天進行，根據(jù)相關(guān)法規(guī)選擇移植胚胎數(shù)2～3個。采卵后第2天開始接受黃體支持。移植14d后測血βhCG，陽性者繼續(xù)黃體支持。移植后4周B超見妊娠囊者為臨床妊娠。

（三）主要考察指標

受精率、有效胚胎率和臨床妊娠率等。

三、統(tǒng)計學方法

結(jié) 果

一、兩組患者一般臨床資料

兩組夫婦男方年齡均有著明顯差別，A組嚴重少弱精子比例和程度也較高（表1）。

二、兩組患者ICSI治療結(jié)果

兩組行ICSI治療在獲卵數(shù)、成熟卵數(shù)是略有差異的，但在受精率等差異不明顯，在A組最終妊娠率有明顯差異（表2）。A組獲得妊娠4對夫婦，最終生育1男4女（其中1例雙胞胎姐妹），嬰兒體智力均無異常。

表1 兩組病人特性及精液參數(shù) （±s）

表1 兩組病人特性及精液參數(shù) （±s）

與A組比較,*P＜0.01

分組特性 A組(n=27) B組(n=54)男方年齡(歲) 64.61±3.57 35.68±3.31*女方年齡(歲) 36.73±5.23 35.82±1.82不育年限 4.80±3.07 4.65±2.82病因(%)男性因素 18(66.7) 33(61.1)輸卵管因素 7(25.9) 17(31.5)子宮內(nèi)膜異位癥 2(7.4) 4(7.4)精液量(mL) 1.96±0.57 2.45±1.52*精子濃度(×106/mL) 14.99±15.56 34.00±26.44*活動精子百分率(%) 7.79±1.1 8.30±1.0正常精子百分率(%) 11.37±3.1 16.89±7.6*

表2 兩組病人采用ICSI治療后結(jié)果（±s）

表2 兩組病人采用ICSI治療后結(jié)果（±s）

與A組比較,*為P＜0.01,**為P＜0.05

分組特性 A組 B組獲卵數(shù) 8.56±6.60 10.96±6.31**成熟卵數(shù) 6.96±5.93 8.94±5.24**2PN數(shù) 5.56±4.93 7.54±4.78優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù) 3.11±3.31 4.13±3.61受精率(%) 75.31±34.44 82.40±17.25有效胚胎數(shù) 4.52±4.16 5.11±3.98冷凍胚胎數(shù) 3.56±3.99 4.33±4.06移植胚胎數(shù) 2.0±1.11 2.69±0.94妊娠例數(shù)(%) 4(14.82) 16(28.07)*

討 論

延遲生育已經(jīng)成為一種趨勢，在發(fā)達國家很常見，在我國也越來越普遍，伴隨夫婦年齡的增長，生殖風險也隨之增加，同時老夫少妻、再婚再生育等現(xiàn)象在現(xiàn)實生活中也越來越常見，相對于女性而言，60歲以上的老年男性仍有生殖功能，不過精液參數(shù)和生殖概率已經(jīng)明顯下降。Kidd等[2]認為男性年齡增加與精液量、精子活力和正常精子形態(tài)有關(guān)，與精子濃度無關(guān)。Dain等[3]報道了男性的年齡與精液量呈負相關(guān)，而與精子濃度，精子活力、形態(tài)沒有關(guān)系。唯一一致的結(jié)果似乎是隨著男性年齡增加其精液量減少，進而導致總精子數(shù)下降，總活動精子計數(shù)下降。本研究兩組因均行ICSI治療，故在活動精子百分率均無明顯差異，但老年A組中精液量、精子濃度、正常精子百分率均是下降明顯，精液參數(shù)與男性年齡還是有影響的，由于老年男性易同時有身體其他病患等混雜因子的影響，故用精子功能是否受年齡影響的研究更有臨床意義。

Aboulghar等[4]對ICSI治療中男性年齡比較，認為其超過50歲與小于50歲相比較，前者受精率顯著降低，并用男性老齡化精子活力降低來解釋受精率降低。在本研究兩組均為嚴重精子活力減低，并沒有觀察到男性年齡增加，受精率更多下降。相反因為老年A組男性配偶年齡增加（表1），兩組獲卵數(shù)及成熟卵子數(shù)有統(tǒng)計學意義，而在有效胚胎數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)及冷凍胚胎數(shù)、移植胚胎數(shù)并無差別。以往研究[4-6]反映男性年齡對接受輔助生育患者受精及早期卵裂的影響很小，但胚胎冷凍數(shù)目和種植率[7]會明顯下降,這與我們觀察到的不一致。另外，在兩組妊娠率上的差別還是明顯的，說明男性年齡的潛在影響，但本研究出生胎兒的體智力方面未見異常，父親年齡是否影響輔助生育出生結(jié)局還需要進一步研究。

關(guān)于男性年齡與輔助生育之間的關(guān)聯(lián)，許多研究得出相互矛盾的結(jié)論，受到諸多因素影響，包括這些研究大部分是回顧性分析，雖然許多研究也作出女方年齡匹配或單獨研究供卵病例[8,9]，但對于研究中的其他混雜因素影響，這些調(diào)整顯然還是不夠的。特別是年齡較大的男性（＞60歲）病例數(shù)非常少，在同期要求輔助生育總周期數(shù)的比例僅占0.146%，了解高老齡男性借助輔助生育情況是我們進行該研究的初衷之一，但可以肯定的是隨著男性年齡的增加是生殖失敗風險也隨之增加。

另外，老齡男性對輔助生育的心理狀態(tài)及性功能的減退，且40歲以后老齡男性患其他疾病概率增加，有學者[10]已經(jīng)提出，根據(jù)現(xiàn)有男性年齡對輔助生育失敗的風險，也可能對結(jié)果產(chǎn)生不良影響分析，建議男性40歲如同女性35歲一樣是“高危界限”，在臨床治療中保持一定的警惕。

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3 Dain L, Auslander R, Dirnfeld M. The effect of paternal age on assisted reproduction outcome.Fertil Steril2011; 95(1): 1-8

4 Aboulghar M, Mansour R, Al-Inany H,et al. Paternal age and outcome of intracytoplasmic sperm injection.Reprod Biomed Online2007; 14(5): 588-592

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10 Elise de, la Rochebrochard, Ken McElreavey, Thonneau P,et al. Paternal Age Over 40 Years: The “Amber Light”in the Reproductive Life of Men?J Androl2003; 24(4): 459-465

（2014-02-10收稿）

Effects of paternal age on intracytoplasmic sperm injection outcome

Jiang Feng, Peng Xiandong*, Chen Hua, Chen Guowu, Sun Xiaoxi, Zhao Weipeng Shanghai Jiai Genetics & IVF Institute, Shanghai, 200011, China

Peng Xiandong, Email: pxd541188@hotmail.com

ObjectiveTo investigate the effects of advanced paternal age on intracytoplasmic sperm injection outcome.MethodsThere were two age groups of men in the study including Group A(n=27, with a mean age of 64± 3 years) and Group B(n=54, with a mean age of 35±2 years). The ages of female partners were matched between the two groups. Results: There was no significant difference in fertilization rate between the two groups (75.3 versus 82.4%). There was a signif cantly higher pregnancy rate in younger men group (P<0.01). However, the long-term outcome of these pregnancies needs further investigation. Semen analysis showed that semen volume，sperm concentration and sperm morphology in Group A than that in Group B (P<0.05), but these changes did not affect the fertilization rate. Conclusion: Advance paternal age might have an effect on the pregnancy rate after ICSI.

sperm injections, intracytoplasmic; age factors; pregnancy

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.05.008

R 321-33

*通訊作者, Email: pxd541188@hotmail.com