“502”膠顯現(xiàn)指紋后對脫落細胞DNA提取的影響研究

高婧宇梁克偉李鵬飛王天華賈士友鄒廣發(fā)

（1 大慶市公安局刑事技術(shù)支隊 黑龍江 大慶 163000；2 中國刑警學(xué)院 遼寧 沈陽 110035；3 蘇州市公安局刑警支隊 江蘇 蘇州 210000）

“502”膠顯現(xiàn)指紋后對脫落細胞DNA提取的影響研究

高婧宇1梁克偉2李鵬飛3王天華1賈士友1鄒廣發(fā)1

（1 大慶市公安局刑事技術(shù)支隊 黑龍江 大慶 163000；2 中國刑警學(xué)院 遼寧 沈陽 110035；3 蘇州市公安局刑警支隊 江蘇 蘇州 210000）

探討“502”膠對指紋脫落細胞DNA檢驗的影響。對60份不同材質(zhì)上指紋捺印樣本進行DNA檢驗并比較數(shù)據(jù)結(jié)果。不同材質(zhì)上指紋捺印樣本經(jīng)過“502”熏顯后采用M48磁珠提取法仍可獲得STR分型。“502”膠未對檢材的DNA含量及檢出有顯著影響。

“502”膠 指紋 M48磁珠法 DNA提取

人類的指紋終生不變，沒有兩個完全相同的指紋，是世界上公認的也是最重要的個體特征之一，被廣泛應(yīng)用于刑事偵查和保密工作之中。非滲透性客體上很容易獲得指紋，但是完整的指紋因為保存條件不同有時停留時間很短，往往得到的是不完整的指紋，給技術(shù)工作帶來困難。

人類的DNA分析是將分子生物學(xué)方法應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，對案件所涉及的生物檢材的DNA進行分型，達到個人識別或親子鑒定的目的?，F(xiàn)代研究顯示：由于摩擦、接觸，指紋中也存在脫落細胞，也可以獲得指紋的DNA分型結(jié)果。指紋的承受客體一般分為滲透性、非滲透性、半滲透性客體。非滲透性客體表面的汗液手印的顯現(xiàn)常應(yīng)用“502”膠顯現(xiàn)技術(shù)?！?02”膠是一種瞬間黏合劑，主要成分是α-氰基丙烯酸乙酯?！?02”膠在常溫下易揮發(fā)，遇到汗液手印時，在水、氨基酸及弱堿的引發(fā)下，可以進行單體聚合，在手印紋線上形成白色固體狀聚合物，從而將手印顯現(xiàn)出來。該熏顯方法對某些半滲透性客體上的手印顯現(xiàn)也適用。常用顯現(xiàn)方法有冷熏法、加熱熏顯法、真空熏顯法。

在實踐工作中公安技術(shù)人員常常陷入兩難的境界，顯示指紋又怕提不了DNA，先提DNA又破壞了指紋。本實驗采用Chelex-100法及M48磁珠法分別進行前期提取，研究非滲透性客體表面的指紋經(jīng)“502”膠顯現(xiàn)后是否對DNA的檢出造成影響。

1 材料與方法

1.1 樣本

非滲透性客體——塑料薄膜上指紋捺印樣本30份，半滲透性客體——紙張上指紋捺印樣本30份，各取15份經(jīng)公安部物證二所的AFC-1L型502自動熏顯柜加溫加濕熏顯后備檢，其余各15份不做熏顯原物備檢。

1.2 主要試劑與儀器設(shè)備

5%Chelex-100溶液；2mg/ml蛋白酶K溶液；M48磁珠 DNA提取試劑盒 （德國 QIAGEN）；Identifiler?Plus Kit試劑盒（美國ABI公司）；9700型擴增儀（美國ABI公司）；3130XL型基因分析儀（美國ABI公司）。

1.3 方法

每份檢材取相同兩份，分別放入0.5ml和1.5ml的離心管中，分別用Chelex-100法和M48磁珠法提取模板DNA。

1.3.1 Chelex-100法

每個樣本離心管加入5%Chelex-100溶液30μL和2mg/ml的蛋白酶K溶液10μL，56℃孵育2小時（期間震蕩多次）；漩渦震蕩10s；13000r/min離心3min；4℃保存待擴增用。

1.3.2 M48磁珠法

每個樣本離心管加入190μL 190裂解液G2和10μL蛋白酶 K溶液 （10mg/ml），漩渦震蕩10s，56℃孵育2小時（期間震蕩多次）；13000r/min離心5min；轉(zhuǎn)移200μL上清到1.5ml樣品管中；加入1mlMTL和30μL磁珠，混勻，置于搖勻架上搖勻吸附 15min；磁力架吸附磁珠，棄上清；加入500μLMW1溶液搖勻，磁力架吸附磁珠去上清；加入500μL80%的乙醇溶液搖勻，磁力架吸附磁珠去上清；重復(fù)80%乙醇洗滌3次，磁力架吸附磁珠棄上清；將離心管開蓋置于65℃加熱塊上烘干；加入20μL超純水混勻磁珠，65℃加熱10min，期間震蕩2～3次；將離心管置于磁力架上吸附磁珠，取上清液置于新管中4℃保存待擴增用。

圖1 “502”熏顯后的檢材樣本DNA分型

圖2 未熏顯的檢材樣本DNA分型

1.3.3 STR擴增及產(chǎn)物檢測

將上述兩種方法提取的模板DNA分別取適量DNA，用Identifiler?Plus Kit試劑，10μL PCR反應(yīng)體系進行擴增，用3130XL型基因分析儀進行STR分型。

2 結(jié)果與討論

2.1 結(jié)果

未經(jīng)“502”熏顯的塑料薄膜及紙張上的指紋檢材Chelex-100法均未獲得STR分型，M48磁珠法均可獲得STR分型；經(jīng)過“502”熏顯的塑料薄膜及紙張上的指紋檢材Chelex-100法均未獲得STR分型，M48磁珠法均可獲得STR分型。

2.2 討論

通過實驗可見，對于本次實驗所選的非滲透客體和半滲透性客體上的指紋捺印樣本，無論是否經(jīng)過熏顯，Chelex-100法均無法獲得STR分型，而M48磁珠法均能夠獲得STR分型。由此可見，Chelex-100法不適用于提取量小體微的指紋檢材，該類檢材可考慮使用M48磁珠法提取，并在復(fù)合擴增時適當(dāng)調(diào)整模板DNA的用量及體系以獲得較好的分型數(shù)據(jù)。從圖譜的峰值結(jié)果來看，經(jīng)“502”熏顯后的檢材樣本DNA的含量較未經(jīng)熏顯的沒有顯著差異，均能獲得理想的STR分型，“502”膠未對檢材的DNA含量及檢出造成影響。

在實際辦案的現(xiàn)場勘查及物證檢驗過程中，“502”膠顯現(xiàn)技術(shù)是運用的十分廣泛的一種熏顯技術(shù)，尤其對于非滲透性客體及半滲透性客體，但如果得到的指紋是凌亂、重疊的，便無法利用痕跡檢驗技術(shù)比對嫌疑人，通過本實驗對經(jīng)“502”膠顯現(xiàn)后指紋樣本檢驗的驗證，經(jīng)過“502”熏顯的指紋樣本仍可以考慮通過DNA檢驗獲得STR分型，利用DNA數(shù)據(jù)庫比對嫌疑人或認定嫌疑人，固定證據(jù)鏈，充分利用DNA靶向性作用，最大限度利用物證，發(fā)揮破案作用。

[1]鄭秀芬.法醫(yī)DNA分析[M].北京：中國人民公安大學(xué)出版社，2002.

[2]張書杰.痕跡檢驗學(xué)[M].北京：中國人民公安大學(xué)出版社，2007.

（責(zé)任編輯：于 萍）

DF795

A

2013-12-19

公安部應(yīng)用創(chuàng)新計劃項目（編號：2011YYCXXJXY122）。

高靖宇（1985-），女，黑龍江大慶人，大慶市公安局刑事技術(shù)支隊法醫(yī)師，本科，主要從事法醫(yī)物證檢驗的研究。