張宗保

（濟(jì)寧市皮膚病防治院，山東濟(jì)寧 272100）

鹿茸益腎膠囊治療腎陽(yáng)虛證陽(yáng)痿的藥效學(xué)研究

張宗保

（濟(jì)寧市皮膚病防治院，山東濟(jì)寧 272100）

目的：研究鹿茸益腎膠囊治療腎陽(yáng)虛證陽(yáng)痿的藥效學(xué)機(jī)制。方法：觀察鹿茸益腎膠囊對(duì)去勢(shì)雄性大鼠陰莖勃起潛伏期的影響，對(duì)去勢(shì)雄性大鼠附性器官和垂體、腎上腺、胸腺、脾臟質(zhì)量系數(shù)的影響，對(duì)去勢(shì)雄性大鼠性腺內(nèi)分泌激素血清含量的影響，對(duì)氫化可的松致陽(yáng)虛模型小鼠的影響。結(jié)果：鹿茸益腎膠囊能夠提高去勢(shì)雄性大鼠陰莖對(duì)刺激的興奮性,顯著縮短勃起潛伏期，提高去勢(shì)雄性大鼠附性器官的質(zhì)量系數(shù)；提高去勢(shì)雄性大鼠垂體、腎上腺質(zhì)量系數(shù)；降低去勢(shì)雄性大鼠胸腺、脾臟質(zhì)量系數(shù)；顯著升高大鼠血清睪酮（T）、皮質(zhì)醇（F）含量、顯著降低血清促黃體生成素（LH）、促卵泡刺激素（FSH）含量；顯著改善陽(yáng)虛小鼠的陽(yáng)虛癥狀，增強(qiáng)生命力。結(jié)論：鹿茸益腎膠囊具有溫陽(yáng)益腎的作用，可用于治療腎陽(yáng)虛證陽(yáng)痿、性功能減退。.

鹿茸益腎膠囊；藥效學(xué)；腎陽(yáng)虛證；陽(yáng)痿；動(dòng)物模型

鹿茸益腎膠囊主要由鹿茸、淫羊藿、牛膝等七味中藥提取精制而成，功能溫陽(yáng)益腎，主治腎陽(yáng)虛證陽(yáng)痿、性功能減退等；該產(chǎn)品屬國(guó)內(nèi)創(chuàng)新產(chǎn)品，已取得國(guó)家發(fā)明專利權(quán)（ZL200810016437.9）。依照《中藥新藥研究的技術(shù)要求》，對(duì)鹿茸益腎膠囊進(jìn)行了與功能主治相關(guān)的藥效學(xué)研究。

1 材料

1.1 動(dòng)物

雄性Wistar大鼠，體質(zhì)量（200±20）g；雄性昆明種小鼠，體質(zhì)量（20±2）g，以上動(dòng)物均由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，清潔級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)SCXK（魯）20080002。用普通飼料喂養(yǎng)，動(dòng)物房溫度19～24℃、濕度40%～60%。

1.2 藥物

鹿茸益腎膠囊由兗礦集團(tuán)有限公司總醫(yī)院制備，提取淫羊藿、牛膝、人參、黃芪和當(dāng)歸的有效部位，經(jīng)真空濃縮、干燥、粉碎后與蜂王漿凍干粉及鹿茸微粉混勻，裝入膠囊，即得；陽(yáng)性對(duì)照藥益腎興陽(yáng)膠囊由吉林市惠豐制藥有限公司生產(chǎn)，功能益腎興陽(yáng)，主治腎陽(yáng)虧虛引起的陽(yáng)痿、性功能減退等；灌胃給藥時(shí)，取藥物以生理鹽水制成適當(dāng)濃度的混懸液。

1.3 儀器

Beckman Clinical System700型全自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)Beckman公司）；MD110-2型電子天平（上海天平儀器廠）；DC-15型恒溫槽（溫州奧利生物醫(yī)學(xué)儀器廠）；系列ELISA試劑盒（上海江萊生物科技有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)去勢(shì)大鼠的影響

2.1.1 實(shí)驗(yàn)方法參[1-2]，取雄性Wistar大鼠60只，皮下注射烏拉坦（1.5 g/kg）麻醉，用75%乙醇消毒陰囊皮膚，摘除雙側(cè)睪丸，術(shù)后肌內(nèi)注射青霉素鈉4萬(wàn)U/kg，制備去勢(shì)動(dòng)物模型。去勢(shì)術(shù)后第3天將去勢(shì)大鼠隨機(jī)分6組（n=10），鹿茸益腎膠囊高、中、低劑量組（3.2，1.6，0.8 g/kg）、益腎興陽(yáng)膠囊陽(yáng)性對(duì)照組（1.5 g/kg）、去勢(shì)模型組（等容積生理鹽水）和正常對(duì)照組（不給藥）。各給藥組皆灌胃給藥，每日1次，連續(xù)20日。給藥20日后，將電刺激儀刺激電極放置于大鼠陰莖部位，給予4 mA、25 V的刺激，記錄從刺激開(kāi)始到陰莖勃起的時(shí)間（陰莖勃起潛伏期，s）；次日稱定體質(zhì)量，眼球后取血，分離血清，用于測(cè)定血清睪酮（T）、促黃體生成素（LH）、促卵泡刺激素（FSH）、皮質(zhì)醇(F)含量；再殺取大鼠，將各組大鼠的包皮腺、精液囊-前列腺、提肛肌、垂體、腎上腺、胸腺、脾臟取出稱重，分別計(jì)算各器官的質(zhì)量系數(shù)（器官質(zhì)量/體質(zhì)量）。

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用±s表示，分類資料用χ2檢驗(yàn)，組間兩兩比較用Tukey檢驗(yàn)，顯著性檢驗(yàn)水平為α=0.05；數(shù)據(jù)不滿足正態(tài)和方差齊則用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)（Kruskal-Wallis），組間兩兩比較用Mann-Whitney檢驗(yàn)。

2.1.2 對(duì)去勢(shì)雄性大鼠陰莖勃起潛伏期的影響結(jié)果見(jiàn)表1。去勢(shì)模型組大鼠的陰莖勃起潛伏期較正常對(duì)照組顯著延長(zhǎng)（P＜0.01）；鹿茸益腎膠囊高、中、低劑量組大鼠的陰莖勃起潛伏期，同去勢(shì)模型組比較均顯著縮短（P＜0.05），同正常對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；表明鹿茸益腎膠囊能顯著促進(jìn)性功能、改善性功能障礙。

表1 對(duì)去勢(shì)大鼠陰莖勃起潛伏期的影響(±s)

表1 對(duì)去勢(shì)大鼠陰莖勃起潛伏期的影響(±s)

注：與去勢(shì)模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別n陰莖勃起潛伏期(s)正常對(duì)照組1020.3±3.8**去勢(shì)模型組1037.0±9.2陽(yáng)性對(duì)照組1023.4±3.5*高劑量組1021.2±4.1**中劑量組1022.6±4.4**低劑量組1024.3±3.2

2.1.3 對(duì)去勢(shì)雄性大鼠附性器官質(zhì)量系數(shù)的影響結(jié)果見(jiàn)表2。去勢(shì)模型組大鼠附性器官的質(zhì)量系數(shù)較正常對(duì)照組均顯著降低（P＜0.05）；鹿茸益腎膠囊給藥組大鼠附性器官的質(zhì)量系數(shù)，同去勢(shì)模型組比較，高、中劑量組均顯著增高（P＜0.05），低劑量組增高但不顯著（P＞0.05）；表明鹿茸益腎膠囊有提升性功能的作用。

表2 對(duì)去勢(shì)大鼠附性器官質(zhì)量系數(shù)的影響(±s,μg/g體質(zhì)量)

表2 對(duì)去勢(shì)大鼠附性器官質(zhì)量系數(shù)的影響(±s,μg/g體質(zhì)量)

注：與去勢(shì)模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別n質(zhì)量系數(shù)包皮腺精液囊-前列腺提肛肌正常對(duì)照組10337.4±42.0**603.7±123.1**505.2±45.1**去勢(shì)模型組10208.0±26.8312.1±27.8215.5±29.4陽(yáng)性對(duì)照組10269.6±26.7*392.2±48.7*235.5±21.4*高劑量組10294.3±29.5*434.5±53.9*292.4±23.2*中劑量組10281.2±24.6*418.9±46.3*278.3±20.7*低劑量組10251.3±31.2365.2±53.0253.3±15.8

2.1.4 對(duì)去勢(shì)雄性大鼠垂體、腎上腺、胸腺、脾臟質(zhì)量系數(shù)的影響結(jié)果見(jiàn)表3。同正常對(duì)照組比較，去勢(shì)模型組大鼠垂體、腎上腺的質(zhì)量系數(shù)降低但不顯著（P＞0.05），胸腺的質(zhì)量系數(shù)顯著增高（P＜0.05），脾臟的質(zhì)量系數(shù)增高但不顯著（P＞0.05）；鹿茸益腎膠囊高、中、低劑量組同去勢(shì)模型組比較，各劑量組垂體的質(zhì)量系數(shù)均增高但不顯著（P＞0.05），高、中劑量組腎上腺的質(zhì)量系數(shù)顯著增高（P＜0.05）、胸腺的質(zhì)量系數(shù)顯著降低（P＜0.05），高劑量脾臟的質(zhì)量系數(shù)顯著降低（P＜0.05）；表明鹿茸益腎膠囊能改善陽(yáng)虛體質(zhì)和免疫功能。

2.1.5 對(duì)去勢(shì)雄性大鼠性腺內(nèi)分泌激素血清含量的影響結(jié)果見(jiàn)表4。同正常對(duì)照組比較，去勢(shì)模型組大鼠的血清T、F含量均顯著降低（P＜0.05），血清LH、FSH含量均顯著增高（P＜0.05）；鹿茸益腎膠囊高、中、低劑量組同去勢(shì)模型組比較，各劑量組的血清T含量均顯著增高（P＜0.05），高、中劑量組血清LH、FSH含量均顯著降低（P＜0.05），高劑量組的血清F含量顯著增高（P＜0.05）；表明鹿茸益腎膠囊能通過(guò)改善內(nèi)分泌激素的血清含量而提升性功能。

2.2 對(duì)氫化可的松致陽(yáng)虛小鼠的影響參考文獻(xiàn)方法[2-3]，取雄性昆明種小鼠60只，隨機(jī)分成6組（n=10），鹿茸益腎膠囊高、中、低劑量組（4.8，2.4，1.2 g/kg）、益腎興陽(yáng)膠囊陽(yáng)性對(duì)照組（2.25 g/kg）、陽(yáng)虛模型組（等容積生理鹽水）和正常對(duì)照組（不給藥）。各給藥組皆灌胃給藥，同時(shí)肌內(nèi)注射氫化可的松0.5 mg/只，每日1次，連續(xù)給藥7日。第7日給藥后1 h，觀察各組動(dòng)物一般狀況，測(cè)定動(dòng)物體溫、10 min自由活動(dòng)次數(shù)及低溫游泳存活時(shí)間，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。陽(yáng)虛模型組小鼠體溫下降（P＞0.05），活動(dòng)次數(shù)及低溫游泳存活時(shí)間均顯著下降（P＜0.05）；鹿茸益腎膠囊高、中、低劑量組同陽(yáng)虛模型組比較，各劑量組小鼠體溫均升高（P＞0.05）、活動(dòng)次數(shù)及低溫游泳存活時(shí)間均延長(zhǎng)（P＜0.05）；表明鹿茸益腎膠囊能改善陽(yáng)虛癥狀、增強(qiáng)生命力。

表3 對(duì)去勢(shì)大鼠垂體、腎上腺、胸腺、脾臟質(zhì)量系數(shù)的影響(±s,μg/g體質(zhì)量)

表3 對(duì)去勢(shì)大鼠垂體、腎上腺、胸腺、脾臟質(zhì)量系數(shù)的影響(±s,μg/g體質(zhì)量)

注：與去勢(shì)模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別n質(zhì)量系數(shù)垂體腎上腺胸腺脾臟正常對(duì)照組1034.6±2.7*132.7±18.5*1 958.3±206.6**2 532.2±164.7去勢(shì)模型組1031.3±2.3120.0±21.92 922.1±314.62 875.3±249.4陽(yáng)性對(duì)照組1032.9±2.7143.6±19.7*2 309.0±184.8*2 451.4±203.1高劑量組1035.1±2.2164.3±19.1*2 072.0±127.8*2 326.7±193.5*中劑量組1033.8±2.1155.4±20.3*2 241.1±171.8*2 407.9±206.0低劑量組1032.0±2.6142.6±24.32 615.8±203.52 537.2±212.6

表4 對(duì)去勢(shì)大鼠性腺內(nèi)分泌激素含量的影響(±s)

表4 對(duì)去勢(shì)大鼠性腺內(nèi)分泌激素含量的影響(±s)

注：與去勢(shì)模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別nT（nmol/L）LH（IU/L）FSH（IU/L）F（nmol/L）正常對(duì)照組103.43±0.83**0.96±0.40**1.59±0.44**36.42±5.45*去勢(shì)模型組100.24±0.081.52±0.362.65±0.5228.87±4.93陽(yáng)性對(duì)照組100.51±0.08*1.23±0.34*2.25±0.50*31.31±4.55*高劑量組100.59±0.12*1.14±0.22*2.01±0.45*36.29±4.39*中劑量組100.52±0.12*1.21±0.30*2.22±0.46*34.91±4.33*低劑量組100.43±0.11*1.32±0.432.29±0.5230.71±5.02

表5 對(duì)氫化可的松致陽(yáng)虛小鼠的影響(±s)

表5 對(duì)氫化可的松致陽(yáng)虛小鼠的影響(±s)

注：與陽(yáng)虛模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別n體溫（℃）活動(dòng)（次/min）存活（min）正常對(duì)照組1039.1±0.2625.3±1.12**11.02±1.08**陽(yáng)虛模型組1037.5±0.1817.3±0.897.03±0.87陽(yáng)性對(duì)照組1038.6±0.3423.7±1.03*10.06±1.02**高劑量組1039.0±0.3626.1±1.05**11.15±1.09**中劑量組1038.8±0.3524.6±1.04*10.41±1.07**低劑量組1038.2±0.3220.9±1.08*9.33±1.01*

3 討論

中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為“人之根本在于腎，性之動(dòng)力在于精”，要治愈腎陽(yáng)虛證陽(yáng)痿，必須既補(bǔ)先天之本（腎），又補(bǔ)后天之命（脾胃），“強(qiáng)腎而固精”，治則應(yīng)溫陽(yáng)益腎[4]。鹿茸益腎膠囊基于上述治則組方，方以鹿茸壯腎陽(yáng)、益精血，既能促進(jìn)性功能、改善性功能障礙，又有增強(qiáng)免疫和強(qiáng)壯機(jī)體的作用，用作君藥。淫羊藿補(bǔ)腎壯陽(yáng)，具有提升性功能的作用，通過(guò)促進(jìn)精液分泌，間接興奮性欲而促進(jìn)性功能；牛膝補(bǔ)腎填精壯陽(yáng)，有較強(qiáng)促進(jìn)蛋白質(zhì)合成和mRNA合成的作用，以上兩味助君藥溫陽(yáng)益腎共為臣藥。人參大補(bǔ)元?dú)猓稍鰪?qiáng)人的生命力、促進(jìn)陰部血液循環(huán)而提高性欲；黃芪補(bǔ)中益氣，能明顯增強(qiáng)細(xì)胞免疫和非特異性免疫功能；當(dāng)歸強(qiáng)形體、補(bǔ)血活血，有明顯增強(qiáng)免疫作用；蜂王漿凍干粉滋補(bǔ)強(qiáng)壯、健腦益智，含有免疫球蛋白和促性腺激素樣物質(zhì)，能明顯提高人體免疫力，以上四味既能補(bǔ)后天之命（脾）以養(yǎng)先天之本（腎），又有欲助陽(yáng)必先益氣之意，共為佐藥。牛膝尚能引諸藥下行入腎以溫陽(yáng)益腎，兼作使藥之用。上述七味中藥配伍共達(dá)溫陽(yáng)益腎之功，能改善性功能障礙并提高人體免疫力。

作者曾進(jìn)行臨床綜合療效觀察，鹿茸益腎膠囊治療組納入510例，臨床痊愈260例（51.0%）、顯效145例（28.4%）、有效55例（10.8%），總有效率為90.2%；益腎興陽(yáng)膠囊對(duì)照組納入345例，臨床痊愈142例（41.2%）、顯效83例（24.0%）、有效53例（15.4%），總有效率為80.6%；兩組臨床痊愈率、顯效率比較，治療組優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.05），表明鹿茸益腎膠囊治療腎陽(yáng)虛證陽(yáng)痿、性功能減退療效顯著。

腎陽(yáng)虛證是中醫(yī)學(xué)理論體系中重要的證候之一，是涉及機(jī)體多器官、多系統(tǒng)、多水平的整體反應(yīng)[5]。藥效學(xué)研究結(jié)果表明，鹿茸益腎膠囊能顯著提高去勢(shì)雄性大鼠陰莖對(duì)外部刺激的興奮性、縮短陰莖勃起潛伏期，增高大鼠附性器官的質(zhì)量系數(shù)，顯著升高大鼠T、F含量，并促使垂體、腎上腺質(zhì)量系數(shù)增高，調(diào)節(jié)胸腺、脾臟的質(zhì)量系數(shù)，調(diào)節(jié)血清LH、FSH含量；顯著改善陽(yáng)虛小鼠的陽(yáng)虛癥狀增強(qiáng)生命力。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果與中醫(yī)學(xué)理論及臨床療效觀察結(jié)果相符，為鹿茸益腎膠囊臨床用于治療腎陽(yáng)虛證陽(yáng)痿、性功能減退提供了理論基礎(chǔ)，表明鹿茸益腎膠囊具有溫陽(yáng)益腎的作用，通過(guò)促進(jìn)性功能、改善性功能障礙和提高機(jī)體免疫力，能有效改善陽(yáng)痿、性功能減退患者的陽(yáng)痿不舉、性欲減退、腰膝酸軟、畏寒肢冷、精神萎靡、夜尿頻多等，顯著緩解腎陽(yáng)虛癥狀甚至痊愈。

[1]何幫劍，肖魯偉，童培建.腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J].中國(guó)中醫(yī)急癥，2012，21（8）：95-96.

[2]張宗保.陽(yáng)春腎舒膠囊的制備及藥理學(xué)研究[D].濟(jì)南：山東大學(xué)，2012.

[3]劉欣，張冰，劉小青，等.氫化可的松誘導(dǎo)大鼠類陽(yáng)虛狀態(tài)的動(dòng)態(tài)觀察[J].中華中醫(yī)藥雜志，2011，26（1）：126-128.

[4]李煒弘，嚴(yán)石林，湯朝暉，等.腎陽(yáng)虛證辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)的專家評(píng)價(jià)[J].遼寧中醫(yī)雜志，2010，37（7）：15-17.

[5]陳棟煒，蒙一純，方湘娟，等.腎陽(yáng)虛證本質(zhì)的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究進(jìn)展和展望[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2005，14（23）：3175-3177.

Pharmacodynamic Study of Lurongyishen Capsules on the Treatment of Impotence with Kidney Yang Deficiency Syndrome

Zhang Zongbao（Dermatology Hospital of Jining City，Shandong Jining 272100，China）

Objective:To study the pharmacodynamic mechanism of lurongyishen capsules in the treatment of impotence with kidney yang deficiency syndrome.Methods:To observe the effects of lurongyishen capsules on penile erection latency in castrated male rats，the effects on the accessory sex organs，pituitary，adrenal，thymus and spleen weight coefficient of castrated male rats，the influence on their serum gonadal hormone content and the impact on hydrogen hydrocortisone induced yang deficiency model mice.Results:Lurongyishen capsules can improve the excitation of the penis to stimulation of castrated male rats and significantly shorten the erectile latency，improve the accessory sex organs，pituitary and adrenal weight coefficient，reduce the thymus and spleen weight coefficient，significantly increase rats’serum testosterone（T）and cortisol（F）levels，decrease serum luteinizing hormone（LH）and follicle-stimulating hormone（FSH）contents，improve yang deficiency syndrome and enhance the vitality of mice.Conclusion:Lurongyishen capsules have a function of reinforcing kidney，and can be used in the treatment of kidney yang deficiency impotence and sexual dysfunction.

Lurongyishen Capsules；Pharmacodynamics；Syndrome of Kidney Yang Deficiency；Impotence；Animal Model

10.3969/j.issn.1672-5433.2014.06.005

2014-03-28）

濟(jì)寧市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（[2010]第27號(hào)），山東省保健科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)獲獎(jiǎng)項(xiàng)目

張宗保，男，碩士，副主任藥師。研究方向：新制劑開(kāi)發(fā)與應(yīng)用研究。通訊作者E-mail：15092755086@163.com