李明 王曉琦 王永新 竇紅允 黃東杰

（滄州市食品藥品檢驗(yàn)所，河北 滄州061000）

吡拉西坦片為腦代謝藥，適用于急、慢性腦血管病、腦外傷、各種中毒性腦病等多種原因所致的記憶減退及輕、中度腦功能障礙。也可用于兒童智能發(fā)育遲緩?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)收錄于 《中國(guó)藥典》（2010年版）二部，但標(biāo)準(zhǔn)中沒有吡拉西坦的溶出度限度要求。溶出度是片劑質(zhì)量控制的一個(gè)重要指標(biāo)，藥物在體內(nèi)吸收速度常由溶解的快慢而決定，固體制劑中的藥物在被吸收前，必須經(jīng)過崩解和溶解然后轉(zhuǎn)為溶液的過程，如果藥物不易從制劑中釋放出來(lái)或藥物的溶解速度極為緩慢，則該制劑中藥物的吸收速度或程度就可能存在問題。為更好地控制藥品的內(nèi)在質(zhì)量，本研究建立了測(cè)定吡拉西坦溶出度的檢查方法，并進(jìn)行了相關(guān)的方法學(xué)研究。此法操作簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)，可有效地控制藥品的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

RZQ-8D溶出實(shí)驗(yàn)儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；高效液相色譜儀（Agilent1100型高效液相色譜儀）； C18色譜柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm）（Agilent公司）吡拉西坦片（11個(gè)廠家共31批樣品）；吡拉西坦對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院提供，批號(hào)：100386-200702，含量 100%）；甲醇（色譜純，黃驊市江峰化學(xué)品有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備

取本品6片，照溶出度測(cè)定法[1]，以水1 000 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速100 r/min，依法操作，經(jīng) 20 min時(shí)，取溶液適量，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL，置20mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度作為供試品溶液。

2.2 吡拉西坦對(duì)照品的制備

精密稱取吡拉西坦對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋成每1 mL含0.1 mg的溶液。

2.3 陰性對(duì)照溶液的制備

不加供試品，其他操作同2.1。

2.4 吡拉西坦溶出量的測(cè)定

照高效液相色譜法（HPLC）[1]測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（10∶90）為流動(dòng)相；流速為0.8 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm。取上述供試品溶液和對(duì)照品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算每片中吡拉西坦的溶出量。限度為標(biāo)示量的80%，符合規(guī)定。

圖1 吡拉西坦HPLC圖

3 溶出度方法學(xué)試驗(yàn)

3.1 線性關(guān)系試驗(yàn)

分別精密稱取吡拉西坦對(duì)照品0.005 01，0.007 50，0.010 09，0.012 55，0.015 08 g 分置 100 mL量瓶中，加甲醇-水（10∶90）稀釋至刻度，混勻。 照上述色譜條件測(cè)定。以面積（A）對(duì)進(jìn)樣量（C）線性回歸，回歸方程為

結(jié)果表明，吡拉西坦在0.05～ 0.15 mg/mL的范圍內(nèi)，面積與進(jìn)樣量呈良好的線性關(guān)系。

3.2 精密度試驗(yàn)

精密稱取吡拉西坦對(duì)照品，照2.4項(xiàng)下的方法，溶解稀釋。按溶出度測(cè)定項(xiàng)下操作，同法連續(xù)測(cè)定6次，結(jié)果吡拉西坦峰面積的RSD為0.50%。結(jié)果表明吡拉西坦精密度均良好。

3.3 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取3.2項(xiàng)下的濃度的溶液，測(cè)定不同間隔時(shí)間色譜峰面積的變化。結(jié)果顯示測(cè)定溶液在12 h內(nèi)色譜峰面積基本無(wú)變化（RSD=0.45%），溶液穩(wěn)定。

3.4 回收率試驗(yàn)

按處方量的 80%、100%、120%，精密稱取吡拉西坦原料適量，同時(shí)按處方配比加入輔料，分置1 000 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，混勻，過濾，精密量取續(xù)濾液5 mL置20 mL量瓶中，加甲醇-水（10∶90）稀釋至刻度，混勻，作為對(duì)照品溶液。

分別精密稱取吡拉西坦對(duì)照品0.010 19，0.010 09 g 分置 100 mL 量瓶中，加甲醇-水（10∶90）溶解并稀釋至刻度，混勻。作為對(duì)照品溶液。

用HPLC法測(cè)定吡拉西坦的峰面積，計(jì)算回收率。測(cè)得吡拉西坦回收率為99.5%，RSD為0.44%。結(jié)果見表1。

表1 吡拉西坦回收率試驗(yàn)結(jié)果

3.5 溶出曲線

隨機(jī)取廠家A、B、C各一個(gè)批次，照溶出度測(cè)定法[1]，以水 1 000 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，依法操作，分別在在 5，10，15，20，25，30，35，40 min取樣 10 mL過濾，精密量取續(xù)濾液5 mL，置 20 mL 量瓶中，加甲醇-水（10∶90）稀釋至刻度，照上述測(cè)定方法測(cè)定溶出量，以每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6個(gè)溶出杯平均溶出量為縱坐標(biāo)，溶出時(shí)間為橫坐標(biāo)，繪制溶出曲線，見圖2。結(jié)果表明，20 min時(shí)，吡拉西坦溶出度均達(dá)到標(biāo)示量的80%以上；溶出均一性良好，故將限度定為20 min。

圖2 吡拉西坦累積溶出速率曲線

4 樣品的測(cè)定

取31批樣品，照上述方法測(cè)定溶出度，每批測(cè)定一次，結(jié)果見表2。

表2 31批樣品溶出度測(cè)定結(jié)果

5 討論

溶出度是指藥物從片劑等固體制劑在規(guī)定溶劑中溶出的速度和程度，是片劑質(zhì)量控制的一個(gè)重要指標(biāo)，對(duì)難溶性的藥物一般都應(yīng)作溶出度的檢查。過去認(rèn)為只有難溶性藥物才有溶出度的問題，但近年來(lái)研究證明，易溶性藥物也會(huì)因制劑的配方和工藝不同導(dǎo)致藥物溶出度有很大差異，從而影響藥物生物利用度和療效，在《美國(guó)藥典》中規(guī)定測(cè)定溶出度的制劑有相當(dāng)數(shù)量是易溶性藥物。吡拉西坦在水中易溶[1]，故選擇水為溶出介質(zhì)。檢測(cè)波長(zhǎng)與流動(dòng)相的選擇參照《中國(guó)藥典》（2010年版）二部中吡拉西坦片含量測(cè)定項(xiàng)下檢測(cè)方法。分別采用3種不同生產(chǎn)廠家的色譜柱進(jìn)行考察：①C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm，Thermo），②C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm，Agilent），③C18（4.6mm ×150 mm，5 μm，Waters），均符合試驗(yàn)的要求，最終選擇 C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm，Agilent）。 對(duì)31批樣品進(jìn)行溶出度測(cè)定的結(jié)果顯示上述樣品均符合擬定的溶出度限度要求。

依靠崩解時(shí)限檢查作為所有片劑、膠囊等固體制劑在體內(nèi)吸收的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)顯示然是不夠完善的，因?yàn)樗幬锶芙夂笸ㄟ^崩解儀篩網(wǎng)粒徑常在1.6～2.0 mm之間，而藥物需呈溶液狀態(tài)才能被機(jī)體吸收，其粒子大小以A來(lái)計(jì)算，所以崩解僅僅是藥物溶出的最初階段，而后面的繼續(xù)分散和溶解過程，崩解時(shí)限檢查是無(wú)法控制的，且固體制劑的崩解還要受到處方設(shè)計(jì)、制劑制備、貯存過程及體內(nèi)許多復(fù)雜因素的影響，所以崩解時(shí)限檢查不能客觀反映藥物與賦形劑之間的關(guān)系和影響，而溶出度檢查卻包括了崩解及溶解過程，因此研究溶出度就有更重要的意義。本研究通過對(duì)吡拉西坦片中吡拉西坦溶出度檢驗(yàn)方法的研究，為進(jìn)一步完善其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（2010年版）二部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄XC，337-338.