羅才慶

摘 要：目的：通過(guò)對(duì)某豬場(chǎng)母豬實(shí)施豬瘟控制（凈化）方案，研究分析能否提高該豬場(chǎng)的母豬分娩率。方法：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）對(duì)龍巖市某規(guī)?；i場(chǎng)的母豬進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，對(duì)豬瘟抗體檢測(cè)不合格（阻斷率小于40%）且同時(shí)滿足兩條及以上淘汰標(biāo)準(zhǔn)的種豬實(shí)行淘汰以達(dá)到豬瘟控制（凈化）目的，并對(duì)豬瘟控制（凈化）前后配種分娩結(jié)果進(jìn)行收集、統(tǒng)計(jì)。結(jié)果：豬瘟控制（凈化）后，母豬返情、流產(chǎn)、空胎數(shù)量減少，分娩率明顯提升。結(jié)論：豬瘟控制（凈化）可以提高母豬分娩率，實(shí)行豬瘟控制（凈化）對(duì)規(guī)?；i場(chǎng)具有重大意義。

關(guān)鍵詞：豬瘟；控制（凈化）；分娩率

Abstract： Objective： Investigate and analyze whether the sow parturition rate could be improved by controlling （eradicating） classic swine fever in a large scale pig farm. Method： The antibodies of classic swine fever of sow were detected with Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） on a large scale pig farm in Longyan city. The sows which the antibodies of classic swine fever were below standard were sifted out controlling （eradicating） classic swine fever. The data of the sow parturition rate were analyzed before controlling （eradicating） classic swine fever and after. Results： The numbers of the sows which showed returning to estrus， abortion and non-pregnancy have reduced and the sow parturition rate was improved obviously by controlling （eradicating） classic swine fever. Conclusion： Controlling （eradicating） classic swine fever can improve the sow parturition efficiency. It is of a great significance for a large scale pig farm to control （eradicate） classic swine fever.

Keywords： classic swine fever； control （eradicate）； parturition rate

豬瘟（Classical Swine Fever，CSF）是由豬瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的豬的一種急性或慢性、熱性和高度接觸性傳染病。豬瘟被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為法定的A類傳染病，并規(guī)定為國(guó)際重點(diǎn)檢疫對(duì)象[1]。它的危害程度極高，乃是當(dāng)今養(yǎng)豬業(yè)的頭號(hào)大敵，是萬(wàn)病之源。其可怕之處在于它是一種能夠引起繁殖障礙的傳染病，會(huì)影響其配種、分娩及新生仔畜的健康等。丘惠深的研究表明，豬瘟的“帶毒母豬綜合征”即妊娠母豬自然感染低毒力或中等毒力的豬瘟病毒后能引起潛伏性感染，病毒可通過(guò)胎盤傳給胎兒，胎兒之間也可以互相感染[2]。這種母豬的垂直傳播率高達(dá)45%～100%[3]，經(jīng)常導(dǎo)致母豬流產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎、死胎等，會(huì)減低母豬分娩率及新生仔畜健康度等。

目前全世界養(yǎng)豬國(guó)家防治豬瘟的主要辦法有兩種，一是撲殺，二是免疫。前者是以切斷傳染源的方式，后者是提高易感豬群對(duì)豬瘟的抵抗力。在我國(guó)，在同一豬場(chǎng)中各類豬群均可遭受豬瘟病毒感染的情況下，通過(guò)采用全場(chǎng)撲殺的辦法來(lái)控制和根除豬瘟是不符合我國(guó)國(guó)情的，而且難于實(shí)行。實(shí)踐證明，凈化是當(dāng)前有效控制豬瘟、消滅豬瘟的重要手段[4]。凈化就是利用先進(jìn)的、適宜的動(dòng)物疫情檢驗(yàn)檢測(cè)手段、技術(shù)及儀器尋找發(fā)現(xiàn)動(dòng)物疫病，確定動(dòng)物疫病的存在形式、種類和數(shù)量，然后采取各種措施，主動(dòng)消滅疫情于隱性或者發(fā)生前。在豬瘟污染的規(guī)?；i場(chǎng)，實(shí)施以凈化種豬和后備種豬為主的豬瘟綜合防控措施是切實(shí)可行的，甚至可以達(dá)到事半功倍的效[5]。目前常見(jiàn)的豬瘟抗體檢測(cè)方法主要包括病毒中和試驗(yàn)（VNT）、間接血凝試驗(yàn)（IHA）和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA） [6]。

本試驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法，對(duì)龍巖市某規(guī)?；i場(chǎng)的母豬進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，淘汰不合格母豬以達(dá)到豬瘟控制（凈化）要求，并對(duì)豬瘟控制（凈化）前后母豬配種分娩結(jié)果進(jìn)行收集、統(tǒng)計(jì)，分析該豬場(chǎng)通過(guò)實(shí)施豬瘟控制（凈化）后能否提高母豬分娩率。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清來(lái)源與數(shù)量

龍巖市某規(guī)?；i場(chǎng)種豬血樣共603份，按常規(guī)方法分離血清并置-20℃冰箱保存，待測(cè)。

1.1.2 疫苗

高效價(jià)豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）。

1.1.3 試劑與儀器

豬瘟病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京IDEXX 生物科技有限公司，微量移液器為德國(guó)BRAND公司產(chǎn)品，酶標(biāo)儀為美國(guó)伯樂(lè)公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 豬瘟抗體檢測(cè)步驟

按照IDEXX 生物科技有限公司的試劑盒說(shuō)明書操作：

（1）分別將50 μL樣品稀釋液加入每個(gè)檢測(cè)孔和對(duì)照孔中；

（2）分別將50 μL的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照加入到相應(yīng)的對(duì)照孔中；

（3）分別將50 μL的被檢樣品加入到剩下的檢測(cè)孔中；

（4）輕彈微量反應(yīng)板或用振蕩器振蕩，將反應(yīng)板中的溶液混勻；

（5）將微量反應(yīng)板用封條封閉或于濕箱中（18～25℃）孵育2 h，也可將微量反應(yīng)板用封條封閉或于濕箱中孵育過(guò)夜；

（6） 用300 μL左右的洗滌溶液洗滌每個(gè)板孔3次。在每次洗滌后，甩去每個(gè)板孔的液體，在最后一次甩掉后，在吸水材料上用力扣板，吸去剩余的液體；

（7）在每孔中加入100 μL辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的豬瘟病毒的酶標(biāo)抗體，用封條封閉反應(yīng)板并于室溫下或濕箱中孵育30 min；

（8） 重復(fù)步驟（6）；

（9）每個(gè)反應(yīng)孔中加入100 μL的底物溶液N.12，并于避光、室溫條件下放置10 min；

（10）每個(gè)反應(yīng)孔中加入100 μL的終止液液N.3終止反應(yīng)；

（11）在450 nm 處測(cè)定樣本以及對(duì)照的吸光度值，也可用雙波長(zhǎng)（450 nm 和620 nm）測(cè)定樣本以及對(duì)照的吸光度值，空氣調(diào)零；

（12）計(jì)算樣本和對(duì)照的平均吸光度值。

1.2.2 判斷標(biāo)準(zhǔn)

陽(yáng)性對(duì)照阻斷率大于40%，陰性對(duì)照平均OD450nm 大于0.5，檢測(cè)結(jié)果有效；被檢樣本的阻斷率大于或等于40%，該樣本可判為豬瘟病毒抗體陽(yáng)性。被檢樣本的阻斷率小于40%，該樣本可判為豬瘟抗體陰性[7]。

1.2.3 淘汰標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)第1次豬瘟抗體檢測(cè)不合格（阻斷率<40%）且同時(shí)滿足兩條及以上淘汰標(biāo)準(zhǔn)的種豬實(shí)行淘汰。

淘汰標(biāo)準(zhǔn)為：體況差，過(guò)肥（超過(guò)4分膘）或過(guò)瘦（低于2分膘）；胎次高（8胎及以上）；連續(xù)兩胎或累計(jì)三次產(chǎn)活仔數(shù)窩均7頭以下；配種后連續(xù)兩次返情、屢配不孕；連續(xù)兩次或累計(jì)三次妊娠期習(xí)慣性流產(chǎn)；斷奶后49 d不發(fā)情；發(fā)生普通病連續(xù)治療兩個(gè)療程仍未康復(fù)。

剩余種豬中豬瘟抗體不合格的，采用肌肉注高效價(jià)豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）2頭份，4周后采血，按常規(guī)方法分離血清，用同樣的方法再次檢測(cè)豬瘟抗體。對(duì)第二次豬瘟抗體檢測(cè)不合格的種豬實(shí)行淘汰計(jì)劃。

1.2.4 后備種豬進(jìn)群標(biāo)準(zhǔn)

在每次有新種豬進(jìn)群前，進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，抗體檢測(cè)合格的種豬（阻斷率≥40%）才能進(jìn)群。

1.2.5 數(shù)據(jù)收集

應(yīng)用GPS豬場(chǎng)生豬管理系統(tǒng)對(duì)豬瘟控制（凈化）前后的配種分娩結(jié)果進(jìn)行收集、統(tǒng)計(jì)。

1.2.6 數(shù)據(jù)處理

用Microsoft Office Excel 2003軟件對(duì)豬瘟控制（凈化）前后分娩率進(jìn)行單因素方差分析（One-Way ANOVA）。

2 結(jié)果

2.1 豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果

2011年12月3日進(jìn)行第1次豬瘟抗體檢測(cè)，共檢測(cè)478頭，其中合格（阻斷率≥40%）的有319頭，不合格（阻斷率<40%）的有159頭，淘汰34頭；2012年1月20日進(jìn)行第2次豬瘟抗體檢測(cè)，共檢測(cè)125頭，其中合格（阻斷率≥40%）的有72頭，不合格（阻斷率<40%）的有53頭，淘汰53頭。2次豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 豬瘟控制（凈化）前后分娩率的對(duì)比

從2011年12月開(kāi)始實(shí)行豬瘟控制（凈化）計(jì)劃，歷時(shí)兩個(gè)月淘汰豬瘟抗體不合格的種豬。2012年2月開(kāi)始的種豬群即為凈化后的種豬群。2012年2月配種的母豬，分娩時(shí)間約在同年6月。2011年6至12月共種豬770頭，其中分娩592頭，2012年6至12月共配種761頭，其中分娩636頭。通過(guò)對(duì)比分娩率，并進(jìn)行單因素方差分析，探討豬瘟控制（凈化）對(duì)分娩率是否有影響。由表2可知，與2011年相比，2012年6-12月的分娩率均有提高且差異極顯著（P=0.002 581<0.01），說(shuō)明分娩率有明顯提升。豬瘟控制（凈化）前后分娩率的對(duì)比結(jié)果見(jiàn)表2。

3 討論

規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)穩(wěn)定生產(chǎn)與持續(xù)發(fā)展是以種豬的健康穩(wěn)定為前提，豬場(chǎng)豬瘟控制的好壞直接關(guān)系到整個(gè)種豬群的健康狀況。當(dāng)豬瘟低毒株感染妊娠母豬時(shí)，母豬本身沒(méi)有臨床癥狀，成為隱性豬瘟。種豬群攜帶豬瘟病毒、豬瘟抗體水平低下，會(huì)引起返情、流產(chǎn)、空胎、產(chǎn)木乃伊胎、死胎等繁殖障礙，降低母豬分娩率且影響新生仔畜的健康。在臨床上，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并淘汰豬瘟抗體水平不合格的種豬，是提高分娩率的有效手段之一，因此，實(shí)時(shí)進(jìn)行豬瘟抗體監(jiān)測(cè)尤為重要?？贵w檢測(cè)方法中，病毒中和試驗(yàn)?zāi)苤苯臃从池i只對(duì)豬瘟病毒感染的抵抗力，中和抗體水平代表了豬群的保護(hù)力。但是，病毒中和試驗(yàn)操作復(fù)雜、技術(shù)含量高，不適用于臨床上大規(guī)模地評(píng)估豬群的抗體水平。IHA在臨床上具有快速、簡(jiǎn)便、廉價(jià)的優(yōu)點(diǎn)，但其特異性和穩(wěn)定性均不如ELISA，ELISA 能做到準(zhǔn)確定量測(cè)定豬瘟抗體水平[6]。

在第一次抗體檢測(cè)后淘汰34頭母豬，原因是這些母豬的豬瘟抗體不合格且生產(chǎn)性能差，已沒(méi)有飼養(yǎng)價(jià)值。第二次抗體檢測(cè)后淘汰53頭母豬，是由于這些母豬兩次檢測(cè)的豬瘟抗體均不合格。

影響分娩率的因素有很多，如精液的質(zhì)量、母豬的營(yíng)養(yǎng)因素、母豬的發(fā)病史、配種時(shí)機(jī)的掌握及管理因素等。①精液的質(zhì)量：精液稀薄、無(wú)精、死精、精子畸形或活力低下等，可直接降低分娩率。②母豬的營(yíng)養(yǎng)因素：營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，特別是維生素的不足或缺乏會(huì)影響胚胎著床和胎兒的發(fā)育，缺乏維生素A、維生素E 可導(dǎo)致胚胎死亡或被吸收。在妊娠前期如果采食飼料過(guò)多，會(huì)因代謝旺盛導(dǎo)致子宮壁毛細(xì)血管血流加速，不利于胚胎著床，同時(shí)肝臟性激素的代謝也隨之增加，從而導(dǎo)致外周的性激素減少，特別是孕酮減少，使受精卵的存活率減少[8]。③母豬的發(fā)病史[9-10]：研究發(fā)現(xiàn)，母豬上胎次是否有生殖道感染、人工助產(chǎn)、返情、流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或生殖應(yīng)激等病史，均表現(xiàn)出對(duì)下一胎分娩率具有極其顯著的影響作用；以及各種能夠降低母豬的繁殖力和受胎率的疾病，如：豬瘟、細(xì)小病毒病、乙型腦炎、偽狂犬、藍(lán)耳病、鉤端螺旋體、衣原體等均會(huì)影響母豬的分娩率。④配種時(shí)機(jī)的掌握：根據(jù)母豬排卵時(shí)間及卵子、精子運(yùn)行和存活時(shí)間，母豬最適宜的配種時(shí)間應(yīng)是發(fā)情后24～36h，此時(shí)受胎率最高。因此，母豬最適宜的配種時(shí)間應(yīng)為母豬排卵前2～3h[11]。⑤管理因素：如泌乳天數(shù)：泌乳天數(shù)少于12 d，通常會(huì)顯著降低以后的分娩率，泌乳天數(shù)為14～21 d，則對(duì)分娩率的影響較輕。且泌乳期每天采食量不低于5.5 kg，則以后分娩率所受的影響較小[12]；溫度和光照：母豬在高溫（超過(guò)30℃）和長(zhǎng)光照（超過(guò)16 h光照）的情況下配種，分娩率會(huì)降低[13]。

在眾多因素中，豬瘟占據(jù)一個(gè)十分重要的位置。近年來(lái)，繁殖障礙型豬瘟多發(fā)，它主要發(fā)生于生產(chǎn)母豬.其本身呈隱性感染，并無(wú)明顯的臨床癥狀，但能通過(guò)垂直傳播危害下一代，導(dǎo)致分娩率降低、胚胎死亡和仔豬的成活率下降[14]。

從豬瘟控制（凈化）前后其分娩率的比較可以看出，豬瘟控制（凈化）前后分娩率差異極顯著（P=0.002 581<0.01），說(shuō)明豬瘟控制（凈化）后分娩率有明顯提升，通過(guò)豬瘟控制（凈化）可減少返情、流產(chǎn)、空胎的發(fā)生，提高分娩率。

在臨床上豬瘟病毒低毒力毒株感染的母豬往往不表現(xiàn)臨床癥狀，但該毒株可引起母豬不孕、流產(chǎn)等繁殖障礙，并可通過(guò)胎盤屏障使胎兒發(fā)生胎盤感染產(chǎn)生弱胎、死胎、木乃伊胎，有的胎兒產(chǎn)出后發(fā)生先天性震顫，共濟(jì)失調(diào)等，對(duì)生產(chǎn)造成極大的損失。通過(guò)豬瘟抗體監(jiān)測(cè)，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)隱性感染豬瘟或豬瘟抗體低下的母豬，及時(shí)淘汰豬瘟抗體不合格的母豬實(shí)行豬瘟控制（凈化），可以提高分娩率，提高豬場(chǎng)的規(guī)模效益。

（編輯：狄慧）

參考文獻(xiàn)：

[1] 陳溥言. 獸醫(yī)傳染病學(xué)[M]. 北京： 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社， 2006， 210.

[2] 丘惠深. 豬瘟的持續(xù)感染的根源在于帶毒母豬[J]. 養(yǎng)豬， 2004， （3）： 29-30.

[3] 王琴. 豬瘟流行現(xiàn)狀及中國(guó)豬瘟凈化策略[J]. 豬病防控， 2012， （10）： 45-47.

[4] 劉新華， 郭長(zhǎng)明， 劉亞軒， 等. 談規(guī)模化豬場(chǎng)的豬瘟控制凈化方法[J]. 福建畜牧獸醫(yī)， 2012， 34（2）： 53-55.

[5] 丘惠深. 凈化是有效控制我國(guó)豬瘟的重要手段[J]. 豬業(yè)科學(xué)， 2010， （3）： 119.

[6] 修金生， 吳順意， 周倫江， 等. 不同規(guī)模豬場(chǎng)種豬豬瘟抗體檢測(cè)與豬瘟凈化[J]. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2010， 25（2）： 235-238.

[7] 李維誠(chéng). IDEXX ELISA法在豬瘟之控制與應(yīng)用[J]. 臺(tái)灣中心大學(xué)學(xué)報(bào)， 2000， （8）： 23-30.

[8] 連瑞營(yíng). 規(guī)模豬場(chǎng)影響配種分娩率的因素與防制措施[J]. 飼料與畜牧， 2010， （12）： 18-20.

[9] 韋明宇， 鄧志歡， 李林東， 等. 母豬分娩率影響因素分析[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2012， 43（6）： 861-864.

[10] Lixin Wen， Hui Yuan， Lan Xie. Sow Reproductive Stress and Its Syndrome [J]. Animal Husbandry and Feed Science， 2009， 1（8）： 20-24.

[11] 林延球. 母豬適宜的配種時(shí)間探討[J]. 福建畜牧獸醫(yī)， 2000， （2）： 34-35.

[12] 韓宏軍. 影響母豬分娩率的因素[J]. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問(wèn)， 2011，（8）： 61.

[13] 趙宗偉， 劉翠英， 董煥竹， 等. 影響母豬分娩率的主要因素及措施[J]. 中國(guó)豬業(yè)， 2009， （11）： 36.

[14] 王惠強(qiáng)， 羅烈菊. 繁殖障礙型豬瘟的防治措施[J]. 今日畜牧獸醫(yī)， 2010， （2）： 25-27.