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      妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過(guò)程中相關(guān)指標(biāo)分析

      2014-04-29 00:44:03王一承劉麗琴石勝友魏永贊
      熱帶作物學(xué)報(bào) 2014年3期
      關(guān)鍵詞:酶活性抗氧化

      王一承 劉麗琴 石勝友 魏永贊

      摘 要 以荔枝品種妃子笑(Litchi chinensis Sonn. cv. Feizixiao)為材料,通過(guò)測(cè)定其果實(shí)發(fā)育過(guò)程中重量、體積、糖、酸、維生素C(Vc)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及過(guò)氧化物酶(POD)活性的變化,分析該品種果實(shí)的發(fā)育特性。結(jié)果表明:花后40 d到果實(shí)著色階段為妃子笑果肉發(fā)育與風(fēng)味形成的最重要時(shí)期,此階段果肉開始膨大,糖含量升高,酸含量降低。除此之外,果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果皮和果肉可能具有不同的清除自由基模式。果皮中膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量相對(duì)穩(wěn)定,但隨著果實(shí)的發(fā)育,果皮內(nèi)3種主要的抗氧化功能組分變化不一,其中Vc含量和SOD活性逐漸下降,POD活性則逐漸上升。與果皮不同,果肉中MDA含量隨果實(shí)的發(fā)育逐漸下降,說(shuō)明果肉清除自由基的能力隨果實(shí)發(fā)育逐漸提高,而此過(guò)程中,果肉Vc含量顯著上升,SOD活性下降,POD活性相對(duì)穩(wěn)定。此結(jié)果表明果實(shí)發(fā)育過(guò)程中,果肉抗氧化能力的提高與Vc含量上升直接相關(guān)。

      關(guān)鍵詞 妃子笑荔枝;糖酸含量;酶活性;抗氧化

      中圖分類號(hào) S667.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

      荔枝品種妃子笑因果大、肉厚、色美、核小、味甜等特性成為廣東等地重要的中早熟品種。目前,關(guān)于妃子笑荔枝栽培、生理方面的研究主要集中于樹體營(yíng)養(yǎng)管理[1-3]、花前催花、花后保果技術(shù)[4-5]、果實(shí)著色機(jī)理[6-7]、果肉營(yíng)養(yǎng)差異等方面[8],但針對(duì)該品種果實(shí)發(fā)育的基本特征的研究卻較少。因此,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分析妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過(guò)程中的相關(guān)生理指標(biāo),進(jìn)而理解其果實(shí)的發(fā)育特征,對(duì)荔枝的生產(chǎn)具有重要意義。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      試驗(yàn)材料選取南亞熱帶作物研究所基地內(nèi)正常管理?xiàng)l件下的妃子笑果實(shí)。取樣方法如下:隨機(jī)選取園地里長(zhǎng)勢(shì)均勻的6株果樹,按不同方向,選取大小中等的果實(shí),分花后10、20、30、40、50、60、70 d、果實(shí)未著色及著色9個(gè)時(shí)期取樣。鮮樣取好后,立即用冰盒帶回實(shí)驗(yàn)室,并且進(jìn)行相關(guān)生理指標(biāo)的測(cè)定。

      1.2 方法

      采用常規(guī)方法測(cè)定果實(shí)與果核的重量、體積及橫縱徑??扇苄蕴呛坎捎幂焱y(cè)定,有機(jī)酸含量則用酚酞作為指示劑,NaOH標(biāo)定方法測(cè)定[9]。Vc、MDA含量的測(cè)定參照張志良[10]的方法,取0.2 g果肉,加入10%三氯乙酸5mL研磨至勻漿。6 000 r/min離心10 min 取1.5 mL上清液,加入2.5 mL 0.5% TBA液,沸水浴20 min后,于532、600 nm處測(cè)定吸光度[10]。參考陳建勛[11]的方法測(cè)定SOD及POD活性,取0.5 g樣品,加入5 mL預(yù)冷的提取介質(zhì)中研磨至勻漿,定容至10 mL,在4 ℃條件下10 000 r/min離心15 min,取上清為粗酶液,而后在波長(zhǎng)為560 nm條件下分析SOD活性,470 nm條件下測(cè)定POD的活性[11]。以引起3 mL反應(yīng)體系中抑制NBT光還原50%所需酶量定義1個(gè)SOD酶活單位,POD活性則以每分鐘吸光度變化值表征[12]。

      1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

      所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)運(yùn)用SAS數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析軟件(8.1版本)ANOVA過(guò)程進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)LSD,p<0.05,不同類型數(shù)據(jù)用大小寫字母區(qū)分,同一數(shù)據(jù)內(nèi)不同字母間表示差異顯著。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過(guò)程中重量、體積、果實(shí)與果核橫縱徑的變化

      由圖1可知,妃子笑果實(shí)發(fā)育過(guò)程中其重量與體積的發(fā)育幾乎同步且其發(fā)育過(guò)程大體可分為3個(gè)時(shí)期。第1個(gè)時(shí)期為花后10~30 d,此時(shí)果實(shí)與體積發(fā)育速度相對(duì)最緩慢;第2個(gè)時(shí)期為花后30~60 d,此時(shí)果實(shí)與體積發(fā)育速度加快;第3個(gè)時(shí)期為花后60~70 d,該時(shí)期果實(shí)重量與體積快速增加為果實(shí)膨大期。果實(shí)橫縱徑發(fā)育趨勢(shì)相一致,果核橫縱徑發(fā)育規(guī)律也相對(duì)一致,但果實(shí)與果核的橫縱徑發(fā)育規(guī)律存在細(xì)微的差異。即果實(shí)的橫縱徑從花后10 d到花后70 d發(fā)育相對(duì)較快,而果核在花后20~40 d與花后60~70 d發(fā)育較快,花后40~60 d后則發(fā)育較為緩慢(見(jiàn)圖2和圖3)。

      2.2 妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過(guò)程中糖酸含量的變化

      在果實(shí)發(fā)育過(guò)程中,果皮糖含量一直低于4 mg/g,且隨果實(shí)發(fā)育略有差異。果肉中糖含量隨著果實(shí)發(fā)育顯著增加,其由花后50 d的4.51 mg/g遞增到果實(shí)著色后的18.85 mg/g(圖4)。果實(shí)酸含量則隨著果實(shí)發(fā)育逐漸降低。果皮酸含量由花后10 d的 1.29 g/hg遞減到果實(shí)著色后0.41 g/hg,果肉酸含量下降得更為顯著,由花后50 d的5.58 g/hg降低到果實(shí)著色后0.57 g/hg的水平(圖5)。

      2.3 妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過(guò)程中Vc及MDA含量的變化

      由圖6可知,妃子笑果實(shí)發(fā)育過(guò)程中,果皮與果肉Vc含量的變化趨勢(shì)存在差異。果皮中Vc的含量相對(duì)較低,且其含量隨著果實(shí)的發(fā)育變化略有差異。果肉中Vc含量相對(duì)較高,且隨著果實(shí)的發(fā)育顯著增加?;ê?0~50 d與花后70 d到果實(shí)著色為果肉Vc含量的2個(gè)快速增長(zhǎng)期。在40~50 d果肉Vc含量的快速增長(zhǎng)期,Vc含量由 2.95 mg/hg FW增加至22.66 mg/hg FW;在花后70 d到果實(shí)著色期,Vc含量由 25.91 mg/hg FW增加至44.36 mg/hg FW;而介于2個(gè)快速增長(zhǎng)期之間即花后50~70 d為果肉Vc含量的幾無(wú)差異。同時(shí),果皮與果肉中氧化產(chǎn)物MDA含量的變化趨勢(shì)同樣存在差異。果皮中MDA含量維持在0.03 ~0.05 μmol/g FW的較低水平,且其含量同樣在果實(shí)發(fā)育過(guò)程中略有差異。果肉中MDA含量變化則隨果實(shí)的發(fā)育顯著降低,其含量從花后40 d的0.22 μmol/g FW逐漸降低到著色后0.02 μmol/g FW(圖7)。

      2.4 妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過(guò)程中SOD及POD活性的變化

      果皮中SOD活性隨著果實(shí)的發(fā)育下降。果皮SOD活性由花后30 d的10 250.59 U/g FW降低到未著色時(shí)期的8 832.15 U/g FW。果肉SOD活性低于果皮,且其活性隨果實(shí)的發(fā)育降低?;ê?0 d果肉SOD活性為4 973.99 U/g FW而著色前期果肉SOD活性則降到2 628.84 U/g FW(圖8)。與SOD活性相反,果皮與果肉中POD活性的變化趨勢(shì)存在差異。果皮POD活性隨果實(shí)的發(fā)育上升,花后30 d果皮POD活性為56.56 △OD470/(min·g FM)至果實(shí)著色前期果皮POD活性達(dá)329.44 △OD470/(min·g FM)。果肉POD活性隨果實(shí)的發(fā)育變化不顯著,從花后50 d至著色前期果肉POD活性在50 △OD470/(min·g FM)左右波動(dòng)(圖9)。

      3 討論與結(jié)論

      綜合果實(shí)發(fā)育過(guò)程中重量、體積及橫縱徑的變化趨勢(shì)可知,妃子笑果實(shí)發(fā)育大體表現(xiàn)為初期緩慢,中期加快,至果實(shí)著色前后趨于穩(wěn)定。此結(jié)果說(shuō)明妃子笑果實(shí)的發(fā)育與蘋果、梨、白蘭瓜等果實(shí)發(fā)育特征類似,呈單S曲線。同時(shí),果核橫縱徑的變化顯示其發(fā)育特征呈雙S曲線,花后20~40 d與花后60~70 d為果核發(fā)育較快,花后40~60 d果核的發(fā)育則相對(duì)較緩。果實(shí)與果核發(fā)育不同步的結(jié)果間接證明了花后40 d為妃子笑果肉物理發(fā)育的關(guān)鍵期。果肉糖酸含量是衡量果實(shí)風(fēng)味品質(zhì)的最重要指標(biāo)[12-14]。妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過(guò)程中糖酸含量的變化趨勢(shì)說(shuō)明,相對(duì)于花后前40 d、花后50 d到著色期間是果肉風(fēng)味形成的主要時(shí)期,此階段內(nèi)果肉糖含量迅速升高,酸含量則逐漸下降。綜合果肉物理性狀與品質(zhì)性狀結(jié)果,表明花后40 d至果實(shí)著色為妃子笑果肉發(fā)育與品質(zhì)形成的最重要時(shí)期。

      MDA是生物體內(nèi)自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)的產(chǎn)物,Vc、SOD、POD則具有清除植物體內(nèi)自由基的功能[15-17]。因此,果實(shí)發(fā)育過(guò)程中,MDA含量的變化間接反映果實(shí)不同發(fā)育階段自生清除氧化自由基的能力;Vc含量、SOD及POD活性的測(cè)定則直接說(shuō)明3種功能物質(zhì)清除氧化自由基的水平。從花后10 d到果實(shí)著色過(guò)程中,果皮MDA的含量相對(duì)穩(wěn)定,但3種清除自由基的功能組分Vc含量、SOD及POD活性則隨著果實(shí)的發(fā)育而變化。從花后10 d到果實(shí)著色過(guò)程中,果皮Vc含量和SOD活性逐漸下降,果皮POD活性則逐漸上升。與果皮中MDA含量相對(duì)穩(wěn)定不同,從花后40 d到果實(shí)著色,果肉MDA的含量逐漸下降。同時(shí),果肉中Vc含量上升顯著,SOD活性下降,POD活性則表現(xiàn)相對(duì)穩(wěn)定。此結(jié)果表明,果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果皮和果肉具有不同的清除自由基模式,果皮清除自由基的能力相對(duì)均衡,但果實(shí)發(fā)育后期,果皮中POD為主要清除自由基的功能組分,而隨著果實(shí)發(fā)育果肉清除自由基的能力逐漸加強(qiáng),且此能力與果實(shí)發(fā)育過(guò)程中Vc含量的增加相關(guān)。

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