王 嬌，徐 雪，梁幼雅

(廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)教研室1、中藥學(xué)院2，廣東 廣州 510006)

不同年份沉香藥材鎮(zhèn)痛作用的比較

王 嬌1，徐 雪1，梁幼雅2

(廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)教研室1、中藥學(xué)院2，廣東 廣州 510006)

目的 觀察5、8、12、15年不同年份沉香藥材鎮(zhèn)痛作用的差異，并進行對比研究。方法采用熱板法和扭體法作為鎮(zhèn)痛實驗?zāi)Ｐ停ㄟ^測定小鼠熱板致痛的痛閾值和醋酸致痛的扭體次數(shù)，比較各年份沉香藥材的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果實驗數(shù)據(jù)顯示，陽性藥(羅通定)及5、8、12、15年沉香藥材組均可顯著延長小鼠熱板痛閾值，減少扭體次數(shù)，與空白組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且各年份藥材組在給藥120 min后可顯著延長小鼠熱板反應(yīng)的時間(P＜0.01)。其中8年沉香藥材組對小鼠熱板致痛和醋酸致痛的鎮(zhèn)痛效果明顯高于5年、15年組(P＜0.05)及12年、羅通定組(P＞0.05)。結(jié)論沉香藥材鎮(zhèn)痛藥效與年份有關(guān)，但并不是隨著年份的增長而增強，并且對內(nèi)臟痙攣性疼痛的鎮(zhèn)痛作用較敏感，而對于體表物理性疼痛發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用需要較長時間。

沉香藥材；不同年份；熱板法；扭體法；鎮(zhèn)痛作用

沉香為中醫(yī)常用中藥，來源于瑞香科植物白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg或沉香Aquilaria agallocha(Lour.)Roxb含有樹脂的木材[1]。沉香味辛、苦，性微溫，具有行氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘的功效，用以治胸腹脹悶疼痛、胃寒嘔吐呃逆、腎虛氣逆喘急[2]?，F(xiàn)代藥理研究表明，沉香含有揮發(fā)油、黃酮及其苷類、三萜類、多糖等化學(xué)成分，具有抗炎鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛等多種藥理活性[3-4]。臨床上用于治療胃痛、術(shù)后呃逆、尿道綜合癥等疾病療效確切[5]。目前國內(nèi)外關(guān)于不同年份沉香藥材藥理作用研究的報道鮮少，為此，本實驗采用小鼠熱板法和扭體法對沉香藥材進行鎮(zhèn)痛作用研究，為其在臨床上治療胃痛、前列腺痛、痛經(jīng)等疾病提供藥理實驗依據(jù)，同時也為沉香藥用資源的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。現(xiàn)就研究結(jié)果報道如下：

1 材料與方法

1.1 藥材及受試樣品制備 沉香藥材來源于廣東省汕頭市鵬華沉香種植基地，并經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室鑒定為瑞香科植物白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg含有樹脂的木材。分別將5年、8年、12年、15年干燥沉香原藥材用打粉機粉碎成粉末并過24目篩，依次稱取各年份藥材粉末適量，加入氯仿，冷浸12 h，超聲提取30 min，收集濾液，于80℃水浴揮至無氯仿，加0.5%羧甲基纖維素鈉溶液(CMC-Na)配成0.2 g/ml的藥液。

1.2 主要儀器及試藥 KQ3200B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，YLS-6B智能熱板儀(上海精密儀器儀表有限公司)，JY09電子分析天平(北京賽多利斯天平有限公司)。羅通定片(四川富康來藥業(yè)集團有限公司；批號：130301)；冰醋酸(天津市百世化工有限公司)；羧甲基纖維素鈉(上海舜水化工有限公司)。

1.3 實驗動物 SPF級昆明(KM)小鼠，18～22 g，雌雄兼用。由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：SCXK(粵)2008-0020。

1.4 小鼠熱刺激致痛實驗(熱板法)[6-7]在(55± 0.5)℃的智能熱板儀上篩選出痛閾值在5～30 s的健康雌性小鼠(18～22 g)60只，間隔20 min重新測定痛閾值1次，共測3次，取其平均值作為給藥前小鼠的正常痛閾值。按體質(zhì)量隨機分為空白對照組、羅通定組、沉香藥材5年、8年、12年、15年組，每組10只。標記空白對照組并灌予0.5%CMC-Na溶液10 ml/kg；沉香藥材5年、8年、12年、15年組均以0.2 g生藥/ml灌胃給藥，灌胃體積均為10 ml/kg體質(zhì)量。1次/d，連續(xù)給藥7 d。實驗第7天羅通定組灌胃給予羅通定(60 mg/kg) 0.5%CMC-Na混懸液，前6 d灌予0.5%CMC-Na溶液。于末次給藥后0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h、2.5 h、3.0 h分別測定小鼠投入熱板儀至出現(xiàn)舔后足的反應(yīng)時間(s)作為痛閾值。若小鼠在熱板上60 s仍無舔后足反應(yīng)，即取出，痛閾時間按60 s計算實驗結(jié)果。

1.5 小鼠化學(xué)刺激致痛實驗(扭體法)[8]取體質(zhì)量18～22 g的小鼠60只，雌雄各半，按如上方法隨機分為6組。給藥劑量與方法同熱板法，于末次給藥后1 h，每只小鼠腹腔注射0.7%冰醋酸(按體質(zhì)量10 ml/kg，冰醋酸臨用前配制)。觀察并記錄注射醋酸溶液后30 min內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)(腹部收縮內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臀部歪扭)，比較各組的扭體次數(shù)，并計算抑制率。抑制率(%)=(對照組扭體次數(shù)-給藥組扭體次數(shù))/對照組扭體次數(shù)×100%。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件進行數(shù)據(jù)處理，實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對小鼠熱板致痛實驗的影響 表1數(shù)據(jù)顯示，與空白對照組比較，給藥后各時間點羅通定組的痛閾值都顯著延長(P＜0.01)，5年、15年藥材組在120 min后小鼠痛閾值顯著延長(P＜0.01)，8年、12年藥材組在90 min后小鼠痛閾值顯著延長(P＜0.01)與羅通定組比較，5年藥材組在120 min之前小鼠痛閾值明顯小于羅通定組(P＜0.01)，15年藥材組在90 min前小鼠痛閾值明顯小于羅通定組(P＜0.01)，8年、12年藥材組在給藥90 min后各時間點差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。沉香8年藥材組在給藥后各時間點小鼠痛閾值均大于12年藥材組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。沉香8年、12年藥材組在給藥90 min后各時間點小鼠痛閾值均大于5年、15年藥材組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05，P＜0.01)。

表1 不同年份沉香藥材對小鼠熱板致痛痛閾值的影響(±s，n=10)

表1 不同年份沉香藥材對小鼠熱板致痛痛閾值的影響(±s，n=10)

注:與空白對照組比較，aP＜0.01；與羅通定組比較，bP＜0.01；與8年藥材組比較，cP＜0.05，dP＜0.01；與12年藥材組比較，eP＜0.05，fP＜0.01。

2.2 對小鼠醋酸扭體實驗的影響 表2數(shù)據(jù)顯示，小鼠灌服沉香各年份藥材以及羅通定后，扭體次數(shù)明顯減少，與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。沉香5年、15年藥材組分別與8年、12年藥材組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。與羅通定組比較，5年、15年組可明顯降低小鼠扭體抑制率(P＜0.01)，8年、12年組可提高小鼠扭體抑制率(P＞0.05)。

表2 不同年份沉香藥材對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(±s，n=10)

表2 不同年份沉香藥材對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(±s，n=10)

注:與空白對照組比較，aP＜0.01；與羅通定組比較，bP＜0.01；與8年、12年藥材組比較，cP＜0.01。

3 討論

沉香作為廣東地產(chǎn)藥材和中醫(yī)常用中藥之一，經(jīng)濟價值較高，是我國特有而珍貴的藥用植物?，F(xiàn)代藥理研究表明沉香含有多種生物活性成分，如倍半萜類、三萜類、芳香族類、脂肪酸類等，具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗心律失常和抗心肌缺血等作用[9]。行氣止痛為沉香主要功效之一，主治胃痛、前列腺痛、痛經(jīng)等癥[3]，其療效高，服用安全，未見明顯毒副作用。有臨床試驗研究表明[9]，沉香是治療胃癌的特效藥和很好的鎮(zhèn)痛藥。本研究通過實驗證實了沉香具有良好的鎮(zhèn)痛作用。鑒于其藥理作用和臨床療效廣泛，以及較高的經(jīng)濟價值，故在今后的研究中，多方面對其進行研究，發(fā)掘新的活性和療效，有助于臨床的更合理用藥、減少藥用資源的浪費，以實現(xiàn)珍貴藥用資源的可持續(xù)利用。

本實驗致力于不同年份沉香藥材的藥效學(xué)研究，主要通過小鼠熱板法和扭體法實驗來考察不同年份沉香藥材的鎮(zhèn)痛作用。實驗結(jié)果顯示，沉香各年份藥材組均能明顯延長小鼠熱板舔后足的時間，顯著減少小鼠腹腔注射醋酸后的扭體次數(shù)，與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明沉香藥材對化學(xué)刺激疼痛模型和熱刺激疼痛模型均有顯著的鎮(zhèn)痛作用，且對小鼠熱板法致痛120 min后鎮(zhèn)痛效果最顯著，可見，沉香藥材對于體表物理性致痛發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用需要較長時間。其中，沉香8年藥材組對小鼠熱板鎮(zhèn)痛效果最明顯，且能顯著減少醋酸所致小鼠的扭體次數(shù)，扭體抑制率為57.97%，5年藥材組鎮(zhèn)痛作用最差。但15年藥材組較12年藥材組鎮(zhèn)痛作用差，故可看出，沉香藥材鎮(zhèn)痛藥效并不隨著年份的增長而增強，可能隨著沉香年份的增長，其具有鎮(zhèn)痛作用的有效成分含量會降低。相比羅通定組，沉香藥材5年組和15年組的鎮(zhèn)痛作用較弱，沉香藥材8年組和12年組的鎮(zhèn)痛作用較強，故可知沉香藥材8、12年鎮(zhèn)痛效果好于羅通定。此外，本次實驗收集的沉香樣本量較少，故實驗數(shù)據(jù)僅能顯示不同年份沉香藥材鎮(zhèn)痛作用強弱的基本趨勢，不能提供更完善的實驗數(shù)據(jù)，且組間數(shù)據(jù)差異較小，可能因為用藥劑量較小，藥材有效成分進入體內(nèi)的量可能和給藥劑量在該范圍內(nèi)不呈線性?？傊?，沉香藥材具有鎮(zhèn)痛作用，但并不隨著年份的增長而增強，對于沉香鎮(zhèn)痛藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機制有待進一步研究。

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Comparative study on analgesic effects of different years of Chinese Eaglewood

WANG Jiao1,XU Xue1,LIANGYou-ya2
Department of Chinese Herbal Medicine1,School of Chinese Herbal Medicine2,Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou 510006,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo observe the analgesic effect of 5、8、12、15 years group of Chinese Eaglewood on mice through an experiment,and to make a comparative study.MethodsHot-plate procedure and torsion body method were used as analgesic experimental model to compare the analgesic effect of different years of Chinese Eaglewood,by measuring the pain threshold caused by hot plate and acetic acid-induced stretch in mice.ResultsThe experimental data showed that 5 years,8 years,12 years,15 years Eaglewood group and Rotundine group all could prolong the pain threshold induced by hot-plate and reduce the times of writhing reactions of mice compared with the blank group,and the difference was statistically significant(P＜0.05).Moreover,each year group at 120 min could re-markably prolong the pain threshold of hot plate in mice(P＜0.01).8 years group of Chinese Eaglewood had significant analgesic effect for the pain caused by hot-plate and acetic acid in mice and the analgesic effect was significantly higher than 5 years,15 years group(P＜0.05)and 12 years group,Rotundine group(P＞0.05).ConclusionThe Chinese Englewood's analgesic effect is associated with the year,but did not strengthened with the increase of the year. The Chinese Englewood is more sensitive to the visceral spasm pain and it requires a long time to play the role of analgesic efficacy for surface physical pain.

Chinese Eaglewood;Different years;Hot plate;Writhing method;Analgesic effect

R-332

A

1003—6350(2014)15—2188—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.15.0852

2014-01-21)

梁幼雅。E-mail:zhongyaograce@gzucm.edu.cn