趙耀東,韓豆瑛
1甘肅中醫(yī)學院,甘肅 蘭州 730000;2甘肅省康復中心醫(yī)院
溫通針法對慢性非細菌性前列腺炎大鼠IL-2、IL-6的影響*
趙耀東1,韓豆瑛2
1甘肅中醫(yī)學院,甘肅 蘭州 730000;2甘肅省康復中心醫(yī)院
目的:觀察溫通針法對慢性非細菌性前列腺炎大鼠血清IL-2、IL-6含量的影響,探討溫通針法治療慢性非細菌性前列腺炎的作用機理。方法:將60只雄性W i st ar大鼠隨機分為針刺組、藥物組、模型組、空白組4組,每組15只。采用25%消痔靈注射液0.2 m L(每單側葉注射0.1 m L)注入前列腺背側葉的造模方法,造成CN BP的動物模型。針刺組采用溫通針法治療,藥物組予前列康灌胃,均每日治療1次,共30次,并觀察各組大鼠血清中IL-2、IL-6的含量變化情況。結果:針刺組較藥物組能明顯降低大鼠血清中IL-2及IL-6水平(P<0.05)。結論:溫通針法治療慢性非細菌性前列腺炎的機理與降低IL-2、IL-6含量,調節(jié)機體免疫功能有關。
非細菌性前列腺炎,慢性;溫通針法;IL-2;IL-6
慢性前列腺炎(c h r o n i cp r o s t a t i t i s,C P)是泌尿外科的常見病和多發(fā)病,我國約3 5%~4 0%3 5歲以上的男性患有此病,約5 0%的男性有過慢性前列腺炎的癥狀[1]。在C P中,慢性非細菌性前列腺炎(c h r o n i cn o n-b a c t e r i a lp r o s t a t i t i s,C N B P)發(fā)病率遠高于細菌性前列腺炎,占發(fā)病總數(shù)的9 0%~9 5%。近年來C P發(fā)病率呈明顯上升趨勢,且發(fā)病年齡日趨年輕化[2]。通過多年的基礎研究和臨床實踐,全國著名針灸專家鄭魁山教授運用獨創(chuàng)的“溫通針法”治療C N B P取得了滿意效果,為進一步探討該手法的獨特性及其作用機理,現(xiàn)對其研究如下:
1.1 動物 W i s t a r大鼠,雄性,6 0只,體質量(2 0 0±2 0)g,3月齡,由甘肅中醫(yī)學院科研實驗中心提供,實驗動物合格證號:S C X K(甘)2 0 1 1-0 0 0 1。
1.2 主要藥品及試劑 前列康片(浙江康恩貝制藥股份有限公司生產(chǎn),0.5g/片,國藥準字Z 3 3 0 2 0 3 0 3);消痔靈注射液[吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn),批號:Z Z-4 9 6 5-吉衛(wèi)藥準字(1 9 9 8)第4 0 0 3號]臨用時用蒸餾水稀釋成2 5%濃度;I L-2、I L-6放免試劑盒(中國人民解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免研究所提供,批號:2 0 0 5 0 4 0 3、2 0 0 5 0 4 0 6)。
1.3 實驗方法
1.3.1 動物分組 將6 0只大鼠按體質量編號,用隨機數(shù)字表法隨機分為空白組、模型組、藥物組及針刺組4組,每組1 5只。
1.3.2 造模 實驗動物購回后常規(guī)飼養(yǎng)1周以適應環(huán)境,參考張亞強[3]、雷久士等[4]的方法造模,除空白組外,其余3組大鼠稱取其體質量后用異戊巴比妥鈉(0.0 0 2 3 m L/g)麻醉,剪去大鼠下腹部毛,常規(guī)消毒,無菌條件下沿腹正中線切開皮膚,創(chuàng)口1.5c m左右,逐層剖開下腹壁,暴露膀胱,用特制不銹鋼環(huán)狀套圈套住膀胱,輕輕拉出,清楚暴露前列腺背側葉,注入2 5%的消痔靈注射液0.2 m L(每單側葉注射0.1 m L),取下套圈使膀胱復位,逐層關腹。術后大鼠腹腔注射慶大霉素0.1 m L/只以預防感染??瞻捉M常規(guī)飼養(yǎng)。造模后各組大鼠精神狀態(tài)較差,活動減少,食欲不佳,但均于術后第3天開始逐步恢復。連續(xù)觀察9天,各組大鼠無1例死亡。傷口愈合良好,精神狀態(tài)可,毛色潤澤,食欲、二便無異常。于造模期結束即第9天,每組取2只處死,取前列腺組織做形態(tài)學觀察,檢測W B C數(shù)目和卵磷脂小體密度并做細菌培養(yǎng),符合無菌性炎癥改變,證明炎癥模型成功。
1.3.3 治療方法 針刺組選取關元、曲骨、行間等穴。取穴依據(jù)林文注主編《實驗針灸學》[5],并參考人體有關穴位,依動物比較方法學而定。關元:臍下約2 5 m m處;曲骨:恥骨聯(lián)合上緣中點處;行間:后肢趾背第一二趾縫間。造模后9天開始治療,針刺組每天針刺1次,即穴位局部消毒后,進針得氣即行溫通針法[6]:左手加重力量,右手拇指向前連續(xù)捻按9次,針下沉緊后,針尖拉著感應的部位連續(xù)重插輕提9次,拇指再向前連續(xù)捻按9次,針尖頂著有感應的部位推弩守氣,使針下繼續(xù)沉緊,此時醫(yī)者押手可明顯感覺到經(jīng)氣沖動。每穴操作6 0秒,留針3 0分鐘,每1 5分鐘行針1次,然后慢慢將針拔去,按壓針孔。藥物組每次胃飼前列康混懸液(前列康片研末,加蒸餾水制成0.0 5 4 g/m L的混懸液)1 m L,1次/d??瞻捉M每次胃飼蒸餾水1 m L,模型組經(jīng)抓取、固定等同針刺組全過程,但不做治療。
1.3.4 標本采集及檢測 治療3 0天,禁食不禁水2 4小時后殺檢。血清標本制備:各組動物于末次針刺、給藥2 4小時后,稱取大鼠體質量后用異戊巴比妥鈉(0.0 0 2 3 m L/g)麻醉,分離頸動脈取血5m L,3 7℃水中放置半小時,以35 0 0r/m i n離心1 5分鐘,取上清液放入尖底試管中,置4℃冰箱內保存,待測。用放射免疫法測定血清I L-2、I L-6含量。
1.4 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)采用S P S S1 7.0統(tǒng)計軟件處理,計量資料以(±s)表示,組間比較采用t檢驗,P<0.0 5為差異有統(tǒng)計學意義。
各組大鼠血清I L-2、I L-6含量變化結果見表1。
表1 各組大鼠血清IL-2、IL-6含量變化情況(±s)
表1 各組大鼠血清IL-2、IL-6含量變化情況(±s)
注:與空白組比較,**表示P<0.01;與模型組比較,△表示P<0.05,△△表示P<0.01;與藥物組比較,▲表示P<0.05。
組別 只數(shù) IL-2/(ng·m L-1) IL-6/(ng·L-1)空白組 13 5.8912±1.1546 0.8584±0.2537模型組 13 7.6701±1.2529** 1.6585±0.4211**藥物組 13 6.2680±0.9817△ 1.2490±0.4164△針刺組 13 6.2083±1.5098△△▲ 1.0815±0.2660△△▲
造模后模型組I L-2、I L-6水平與空白組相比顯著增高(P<0.0 1);治療后藥物組和針刺組I L-2、I L-6含量較模型組顯著降低(P<0.0 5),且針刺組與藥物組在降低I L-2、I L-6水平方面相比有顯著性差異(P<0.0 5),提示造模后細胞毒T細胞損傷靶細胞,機體產(chǎn)生免疫反應,I L-2水平隨之升高;抗炎性細胞因子I L-6水平增高,使前列腺局部免疫細胞被激活,產(chǎn)生多種炎性介導的細胞因子及免疫性抗體,而溫通針法的針刺組能顯著改善機體的自身免疫反應,降低血清中的I L-2水平,提高機體免疫力,增強抗炎能力,使血清中I L-6水平顯著降低,其效果優(yōu)于藥物組。
C N B P屬中醫(yī)“精濁”“白濁”“白淫”“淋濁”等范疇。本病的病因病機多為“本虛標實”“本虛為脾腎不足,標實指濕熱瘀血、敗精熱結于精室而形成本虛標實、虛實夾雜之證”[7]。本虛的發(fā)生,一則“邪之所湊,其氣必虛”;二則本病病程較長,濕熱瘀血等邪氣長期停留體內,會進一步耗傷機體正氣。
現(xiàn)代醫(yī)學研究證實,C N B P是由相關細胞因子和免疫炎性細胞介導的局部免疫反應[8]。I L-2是T輔助細胞(T h)分泌產(chǎn)生的一種前炎性細胞因子,其主要生物學活性是促進T細胞和自然殺傷細胞(N K)的增殖,促進B細胞分化、增殖及抗體生成,在C N B P時機體的免疫應答、免疫調節(jié)中具有重要作用;I L-6是重要的抗炎性細胞因子,能下調和抑制I L-1和γ干擾素(I F N-γ)等前炎性細胞因子合成和產(chǎn)生;I L-2和I L-6均參與C N B P的局部免疫反應。
本研究顯示,溫通針法較藥物能更顯著地降低大鼠血清I L-2和I L-6水平,其機理可能有以下幾個方面:第一、從針刺手法方面看,由于本病病理因素中以正虛最為關鍵,因而扶正祛邪成為治療本病的大法。故而運用全國著名針灸專家鄭魁山教授的家傳手法“溫通針法”[9-10],溫可溫補脾腎,溫通陽氣,振奮和提高正氣,通可疏通經(jīng)絡,行氣和血,活血解毒,“溫”對正虛,“通”對邪實,從而在最大范圍和程度上調整了前列腺局部氣血和免疫功能,起到了扶正祛邪的作用。第二、根據(jù)現(xiàn)代研究,溫通針法針刺關元、曲骨等小腹部穴位,一可調節(jié)支配前列腺血液循環(huán)的腹壁淺動、靜脈分支,髂總動、靜脈及會陰動、靜脈,從而有效改善前列腺局部微循環(huán),達到活血化瘀的治療目的;二可調節(jié)、整合支配前列腺的髂腹股溝神經(jīng)及會陰神經(jīng),緩解盆底肌群痙攣,松弛周圍肌肉,有益于前列腺管的引流通暢,解除了諸如會陰、少腹及腰骶部的墜脹疼痛等不適,促使前列腺分泌功能康復[11];針刺行間有抗炎和抗變態(tài)反應,擴張外周血管,改善微循環(huán)等作用[12]。
綜上所述,溫通針法治療C N B P的機理與降低I L-2、I L-6含量,調節(jié)機體免疫功能從而達到扶正祛邪的作用有關。而且本研究顯示溫通針法明顯優(yōu)于藥物治療,療效確切,效果獨特,值得推廣應用。
[1]顧方六.現(xiàn)代前列腺病學[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2002:530-531.
[2]中國中西醫(yī)結合學會男科專業(yè)委員會.慢性前列腺炎中西醫(yī)結合診療指南(試行版)[J].中國中西醫(yī)結合雜志,2007,27(11):1052-1056.
[3]張亞強,劉猷枋,于靈惠,等.中藥前列腺湯對實驗性前列腺炎病理模型的影響[J].中西醫(yī)結合雜志,1991,11(8):480-481.
[4]雷久土,郭子華,朱曉明,等.前炎清對大鼠前列腺炎病理改變的影響[J].湖南中醫(yī)學院學報,1998,18(2):22.
[5]林文注,王佩.實驗針灸學[M].上海:上??萍汲霭嫔?,1999:290.
[6]趙耀東.溫通針法治療小兒腦癱30例臨床觀察[J].中醫(yī)兒科雜志,2005,1(2):43-45.
[7]曾偉剛.中醫(yī)藥治療慢性前列腺炎的新進展[J].井岡山醫(yī)專學報,2001,8(6):21-23.
[8]劉賓,王付,黃明宜,等.抵當湯臨床及實驗研究進展[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(13):281-284.
[9]趙耀東,韓豆瑛,方曉麗.近年來“溫通針法”研究概況[J].西部中醫(yī)藥,2012,25(8):118-120.
[10]田永萍,趙耀東,畢愛平,等.溫通針法治療肺虛感寒型過敏性鼻炎療效觀察[J].西部中醫(yī)藥,2012,25(5):82-84.
[11]趙耀東,韓豆瑛.溫通針法靶向透刺治療慢性前列腺炎臨床觀察[J].中國針灸,2013,33(10):897-899.
[12]沈衛(wèi)東.針灸治療慢性非細菌性前列腺炎臨床觀察[J].上海中醫(yī)藥雜志,2000,34(5):32-33.
Effects of Warm-promotion Needling on IL-2 and IL-6 of Rats with Chronic Nonbacterial Prostatitis
ZHAO Yaodong1,HAN Douying2
1 Gansu University of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730000,China;2 Gansu Rehabilitation Central Hospital
Objective:To explore the mechanism of warm-promotion needling in treating chronic nonbacterial prostatitis(CNBP)by observing the effects of warm-promotion needling on the contents of IL-2 and IL-6 of rats with chronic nonbacterial prostatitis.Methods:All 60 rats were randomized into the acupuncture group,the medicine group,the model group and the blank group,15 rats each group.CNBP animal model was established by giving 25% XiaoZhiLing injection,0.2 mL (each dorsal lobe,0.1mL)to dorsal lobe of the prostate.The acupuncture group received warm-promotion needling,the medicine group accepted gastric administration of QianLieKang,once each day,for 30 days,the contents of IL-2 and IL-6 of rats in each group were observed.Results:The levels of IL-2 and IL-6 of rats in the acupuncture group were decreased more significantly than these of the medicine group (P<0.05).Conclusion:The mechanism of warm-promotion needling in treating chronic nonbacterial prostatitis might be related to regulating the immunity of the body,decreasing the contents of IL-2 and IL-6.
nonbacterial prostatitis,chronic;warm-promotion needling;IL-2;IL-6
R277.5
B
1004-6852(2014)05-0114-03
2014-01-26
國家自然科學基金項目(編號81060304),甘肅省教育廳項目(編號0906B-03),甘肅省科技廳自然基金項目(編號1208RJZA 248)
趙耀東(1972—),男,碩士學位,副教授。研究方向:傳統(tǒng)針刺手法的臨床及實驗研究。