劉丙營　孟翠麗　李曼　齊鳳杰

【摘要】目的研究趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在乳腺癌中的表達方式，并探討其與乳腺癌的臨床病理特征的關系。方法采用免疫組化技術檢測趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在40例乳腺癌細胞組織和40例正常乳腺細胞中的表達，并分析其表達與患者年齡、腫瘤大小、分化程度與淋巴轉移的臨床特征關系。結果趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在乳腺癌細胞中表達率為73.7%、62.5%明顯高于正常乳腺細胞23.6%、20.3%，兩組數(shù)據(jù)具有明顯統(tǒng)計學意義（P<0.01），且CXCL12、CXCR4在乳腺癌組織中表達與患者年齡、腫瘤大小以及分化程度無關（P>0.05），與淋巴轉移有密切相關（P<0.01）。結論CXCL12、CXCR4在乳腺癌組織中有較高表達率，抑制CXCL12、CXCR4在乳腺癌組織中的表達可為臨床阻斷癌細胞轉移提供重要途徑。

【關鍵詞】乳腺癌；CXCL12和CXCR4；表達和意義

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.04.076文章編號：1004-7484（2014）-04-1876-01趨化因子受體是CXCR4是趨化因子CXCL12的唯一受體，并參與體內多種病理和生理過程，趨化因子CXCL12以及受體CXCR4在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程有著重要作用[1]。最近研究發(fā)現(xiàn)，CXCL12、CXCR4在多種惡性腫瘤中表達水平明顯升高，乳腺癌作為是女性最嚴重的惡性腫瘤疾病之一，其在乳腺癌細胞中發(fā)揮重要作用。本研究通過檢測CXCL12、CXCR4在乳腺癌細胞中的表達和臨床病理特征關系，探討其在乳腺癌組織轉移的作用，從而為臨床阻斷癌細胞轉移提供重要依據(jù)。1資料與方法

1.1臨床資料選取我院2010年2月——2013年2月分期間乳腺手術切除標本80例，在每例乳腺癌標本中取其腫瘤組織與正常乳腺組織分別作為觀察組和對照組。80例乳腺標本均為女性，年齡38-65歲，平均年齡為46.3歲，根據(jù)組織分化程度分別為Ⅰ級15例，Ⅱ級48例，Ⅲ級17例，其中浸潤性導管癌39例，浸潤性小葉癌24例，髓樣癌7例，清潤性微乳頭狀癌5例，小管癌3例，粘液性癌2例；有淋巴轉移48例，無淋巴轉移32例；全部標本術前無放療與化療處理，均用甲醛固定以及石蠟包埋。

1.2方法將石蠟包埋的組織切成4μm厚的切片，經(jīng)二甲苯脫蠟和梯度酒精水化后滴加3%的H2O2阻斷內源性過氧化酶，孵育10min，然后用三羥甲基氨基甲烷緩沖液（trisbuffered saline，TBS）洗滌3次，置于95℃-100℃、pH6.0的檸檬酸緩沖液煮沸20min，再用TBS洗滌3次，滴加一抗（CXCR4 1：400）濕盒中37℃下孵育60min；TBS洗滌3次，滴加E-VISIONTM反應液，50μl/片，37℃下孵育30min；TBS洗滌3次，0.4%色源底物溶液3，3-二氨基聯(lián)苯胺（3，3-diaminobenzidine，DAB）+0.3%H2O2孵育，光鏡下觀察到棕黃色反應后終止。最后用流水洗，蘇木素復染，遞增梯度酒精脫水，二甲苯透明，常規(guī)樹脂封片[2]。

1.3療效判定CXCL12、CXCR4半定量評分標準參照Shimizu等方法，按陽性強度和面積分別記為0、1、2、3分，根據(jù)兩項記分之和判斷其結果：<3分為（-），3分為（+），4分為（++），5-6分為（+++）[3]。

1.4統(tǒng)計學意義采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理，計量資料以χ±s表示，計數(shù)資料中的兩因素構成比使用x2檢驗分析，相關性分析用非參數(shù)Spearman相關檢驗。當兩組數(shù)據(jù)統(tǒng)計差異P<0.05時，說明具有統(tǒng)計學意義[4]。2結果

2.1CXCL12和CXCR4在乳腺細胞中的表達趨化因子CXCL12及其受體CXCR4主要在腫瘤細胞的細胞質中表達，免疫化組織呈棕黃色，且CXCL12和CXCR4在乳腺癌細胞中表達率分別為73.7%、62.5%明顯高于正常乳腺細胞23.6%、20.3%，兩組數(shù)據(jù)有明顯統(tǒng)計學差異（P<0.01），統(tǒng)計有意義。

2.2CXCL12和CXCR4與臨床病理的關系趨化因子CXCL12及其受體CXCR4在乳腺癌細胞的表達與患者的年齡、腫瘤大小和分化程度無關，根據(jù)統(tǒng)計學分析處理（P>0.05），無統(tǒng)計學意義。而其與淋巴轉移有密切聯(lián)系，經(jīng)統(tǒng)計學分析處理（P<0.01），具有統(tǒng)計學意義，見表1。