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      不同方法炮制對杜仲中松脂醇二葡萄糖甙含量影響的實驗

      2014-06-30 05:55:31樓麗蘋
      藥物與人 2014年9期
      關(guān)鍵詞:杜仲炮制

      樓麗蘋

      摘要:用HPLC方法測定生杜仲及不同炮制品中松脂醇二葡萄糖甙含量的結(jié)果表明,杜仲經(jīng)炮制后其含量均明顯下降,其下降量與炮制時的溫度具有相關(guān)性,其中以120℃恒溫烘60min和120℃恒溫烘30min后再蒸30min二種方法所得的樣品中的所含松脂醇二葡萄糖甙較高,該二種炮制方法在減少杜仲在炮制過程中有效成分的損失和藥材損耗方面優(yōu)于傳統(tǒng)炮制方法和其他炮制方法。通過本實驗還提示杜仲經(jīng)傳統(tǒng)方法或其它高溫處理的方法炮制使其斷絲后,其降壓作用有否提高值得進一步探討。

      關(guān)鍵詞:杜仲;炮制;松脂醇二葡萄糖甙

      【中圖分類號】R453【文獻標識碼】 A【文章編號】1002-3763(2014)09-0075-01杜仲具有補腎安胎、降血壓等功效,臨床應(yīng)用較廣、藥材需要量大。杜仲入藥多為炮制品,其炮制方法現(xiàn)行《藥典》及各地炮制《規(guī)范》均按傳統(tǒng)方法規(guī)定將杜仲刮去粗皮后用定量食鹽水拌勻吸盡后,以武火炒至斷絲表面焦黑色。按此方法炮制,其實質(zhì)是將杜仲炙制成炭狀,在炮制過程中藥材損耗極大,質(zhì)量難于控制,其有效成份是否受損亦還未知,且杜仲資源日趨減少,價格昂貴,傳統(tǒng)炮制方法是否合理科學(xué),有必要進行研究。

      松脂醇二葡萄糖甙(Pinohesiol-di-β-0-glus)為杜仲中降壓的有效成分,本實驗用高效液相色譜法對杜仲及不同方法炮制品中松脂醇二葡萄糖甙含量進行測定比較,為改進杜仲的炮制方法提供一定的客觀依據(jù)。

      1 實驗方法與結(jié)果

      儀器與材料

      儀器:Waters公司高效液相色譜儀

      對照品及試劑:松脂醇二葡萄糖甙對照品由陜西省藥檢所提供。實驗所用試劑均為分析純。

      供試樣品炮制:

      杜仲原藥材購于本省臨安縣醫(yī)藥公司昌化批發(fā)部,經(jīng)鑒定確認為杜仲科植物杜仲Eucommia uimoides oliv.的干燥樹皮。將上述杜仲原藥材括盡粗皮,切成2cm左右方塊,混合均勻,隨機分份,分別按以下方法炮制:

      生杜仲

      (鹽炙法)將生杜仲與定量食鹽水(每100g杜仲用食鹽2g下同)拌勻待吸盡后,置鐵鍋內(nèi)炒至一定程度,其中:

      B1:用武火加熱,翻炒至斷絲,表面焦黑色、取出、放涼。

      B2:用文火加熱翻炒至表面具焦斑,取出放涼。

      (炒燙法):將凈河沙加熱翻炒至靈活狀態(tài),投入鹽水拌過吸盡的杜仲,翻炒斷絲時,立即取出,篩凈河沙。

      (恒溫烘烤法):將杜仲置恒溫烘烤箱中,一定溫度下烘烤一定時間,取出拌入食鹽水,待吸盡,干燥。其中:

      D1: 120℃烘60min。

      D2: 160℃烘30min。

      D3: 200℃烘15min。

      E、(烘蒸法):取生杜仲置恒溫烘箱中120℃烘30min,取出,拌入食鹽水,待吸盡后置蒸具內(nèi)以流通蒸汽蒸30min(上氣后開始計時)取出干燥。

      (二)樣品供測試液的制備

      取杜仲試樣品搗成絮狀,取約2g,精密稱定,置索式提取其中,加氯仿190ml,回流6小時,以除去所含杜仲膠等雜志,殘留物揮去氯仿,加入甲醇190ml浸泡過夜,置索式提取器中回流提取6小時,回收甲醇后置10ml容量瓶中以甲醇定容,待測。

      (三)HPLC測定方法與結(jié)果:

      1、色譜條件:色譜柱:Waters公司8SI10徑向加壓柱;檢測器UV280mm;流通相:氯仿-正乙烷-甲醇-乙酸(39:26:32:3);流速:1ml/min。

      2、線性考察:取對照品10mg,以甲醇為溶劑,配置成濃度為1mg/ml的標準溶液,按下述色譜條件在進樣量為0.5-3ug時,峰面積與樣品濃度呈良好的線性關(guān)系?;貧w方程為Y=0.0016×+0.0108t=0.9987

      3、精密度試驗:每次進標準品1.5ug,重復(fù)5次,求得變異系數(shù)C.V=0.35%。

      4、回收率試驗:分別取樣品一定量,準確加入定量標準品,依上法測定,計算回收率為x=100.16%,n=4,s=0.9836,CV=0.98%。

      5、樣品測定:

      取不同方法炮制的杜仲樣品甲醇提取液,測定其松脂醇二葡萄糖甙的含量,結(jié)果見附表一。

      附表一生杜仲及不同炮制品中松脂醇二葡萄糖甙含量

      樣品松脂醇二葡萄糖

      甙含量 %

      X±SOP值A(chǔ)0.578±0.072--B10.127±0.012P<0.01B20.255±0.038P<0.01P<0.01C*D10.422±0.026P<0.01P<0.01D20.200±0.011P<0.01P<0.01D30.097±0.023P<0.01P>0.05E0.427±0.025P<0.05P<0.01*樣品C未能測出松脂醇二葡萄糖甙

      2 討論

      (一)杜仲鹽炙炒斷絲的加工炮制方法是沿襲舊制的傳統(tǒng)方法,現(xiàn)代對改進這一方法的研究有不少報導(dǎo),入炒燙發(fā),恒溫烘烤發(fā)等,但如何評定炮制方法的優(yōu)劣及炮制品內(nèi)在質(zhì)量的客觀指標均較缺乏,本實驗用HPLC法測定生杜仲及其不同炮制品的有效成分之一松脂醇二葡萄糖甙的含量,為杜仲炮制方法的研究提供了客觀依據(jù),對杜仲炮制品質(zhì)量指標的建立具有一定的參考意義。

      (二)實驗結(jié)果表明,杜仲經(jīng)炮制后,松脂醇二葡萄糖甙的含量均有不同程度的降低,其降低幅度與溫度有相應(yīng)關(guān)系。其中樣品C(炒燙品)所含松脂醇二葡萄糖甙損失殆盡。B組中B2(炒微焦)含量高于B1(炒焦黑)D組中隨著溫度升高,其含量依次下降D1>D2>D3,樣品E(120℃烘30min,流通蒸汽蒸30min)在炮制過程中松脂醇二葡萄糖甙損失最小。

      (三)從以上實驗結(jié)果得到啟示,用傳統(tǒng)方法及砂糖發(fā),高溫烘烤發(fā)炮制杜仲使其斷絲,其中降壓成分損失很大,所得炮制品是否能保證或提高杜仲的降壓作用,應(yīng)進一步研究探討。從樣品E盒D1所含松脂醇二葡萄糖甙含量高于其它炮制品以及生品含量高于炮制品這一結(jié)果中,可得到改革杜仲炮制方法具有可行性的理論依據(jù)。

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