游蓉麗韓佩蓮,2胡曉琴喬玉峰李明花

注射用法莫替丁細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的建立

游蓉麗1韓佩蓮1,2胡曉琴1喬玉峰1李明花1

目的確立注射用法莫替丁細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法。方法參照2010年版《中國藥典》二部附錄Ⅺ E細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法要求進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果每1mg法莫替丁內(nèi)毒素不得過7.5EU。結(jié)論該藥采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法代替熱原檢查法，方法可行。

注射用法莫替??；細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法

注射用法莫替丁為H2受體拮抗劑。國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)YBH18322004[1]項(xiàng)下規(guī)定注射用法莫替丁進(jìn)行熱原檢查，為了避實(shí)驗(yàn)用免家兔及環(huán)境等各方面的干擾，通過試驗(yàn)說明其采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法控制注射用法莫替丁質(zhì)量的可行性。試驗(yàn)結(jié)果表明，該藥品可采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法代替熱原檢查法檢測(cè)。

1 鱟試劑與工作標(biāo)準(zhǔn)品

1.1 細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格：10EU/支，批號(hào)：1009020（湛江博康生物有限公司）。

1.2 鱟試劑 標(biāo)示靈敏度：0.5EU/ml，批號(hào)：1101050（湛江博康海洋生物有限公司）；標(biāo)示靈敏度：0.5EU/ml，批號(hào)：1106202（湛江安度斯生物有限公司）。

2 供試品

名稱：注射用法莫替丁，規(guī)格：20mg，批號(hào)：1002071、1003041、1003281，生產(chǎn)單位：山西泰盛制藥有限公司。

3 方法與結(jié)果

3.1 供試品細(xì)菌內(nèi)毒素限值的確定[2]按照計(jì)算公式“L=K·M-1”，L代表供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值；K代表規(guī)定的給藥途徑，人用每千克體重每小時(shí)最大可接受的內(nèi)毒素劑量，注射劑 K=5EU/（kg·h）；M代表人用每千克體重每小時(shí)最大劑量，依據(jù)藥品使用說明書，按中國人均體重為60kg計(jì)算，該藥品最大用量為40mg，確定細(xì)菌內(nèi)毒素限度為7.5EU·mg-1。供試品最大有效稀釋倍數(shù)的確定：采用靈敏度為0.5EU/ml的鱟試劑，測(cè)試濃度為0.5/7.5=0.067mg/ml。

3.2 鱟試劑靈敏度的復(fù)核[2]按照2010年版《中國藥典》二部附錄方法：將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查專用水溶解，并在旋渦混合器上混勻15min，制成1.0、0.5、0.25、0.125EU/ml的細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，每稀釋一個(gè)濃度均在旋渦混合器上混勻30min，每一個(gè)濃度平行做4管，同時(shí)用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查專用水做陰性對(duì)照管2支（表1）。結(jié)果顯示，兩種鱟試劑靈敏度與標(biāo)示靈敏度相符，均為0.5EU/ml，符合規(guī)定。

3.3 干擾試驗(yàn)[2]

3.3.1 預(yù)試驗(yàn) 取熱合格的3批注射用法莫替丁，用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查專用水稀釋成 0.134mg/ml、0.067mg/ml、0.034mg/ml濃度，分別按表2的方法溶解細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品并稀釋成相應(yīng)濃度的內(nèi)毒素溶液。并與用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查專用水配制的相應(yīng)濃度的內(nèi)毒素溶液同時(shí)檢查。結(jié)果顯示，注射用法莫替丁濃度在 0.067mg/ml對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查無干擾作用，可進(jìn)行正式干擾試驗(yàn)。

表1 鱟試劑靈敏度的復(fù)核

3.3.2 干擾試驗(yàn) 見表3。結(jié)果顯示，注射用法莫替丁最大不干擾濃度為0.067mg/ml。

表 2 預(yù)試驗(yàn)結(jié)果

表 3 干擾試驗(yàn)結(jié)果

3.4 供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查[2]將上述3批注射用法莫替丁稀釋成每1ml含0.067mg的溶液，用靈敏度為0.5EU的鱟試劑對(duì)3批供試品進(jìn)行檢測(cè)（表4）。結(jié)果顯示，三批供試品均符合規(guī)定。

表4 三批供試品檢測(cè)結(jié)果

4 小結(jié)

以上試驗(yàn)結(jié)果說明，注射用法莫替丁在濃度0.067mg/ml后對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查無干擾作用，所以可采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法進(jìn)行質(zhì)量控制。

[1] 中華人民共和國國家食品藥品監(jiān)督管理局.國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)(試行)·YBH18322004[S].北京.

[2] 中華人民共和國國家藥典委員會(huì).中國藥典[M].二部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.

R927.1

A

1673-5846(2014)02-0260-02

1山西振東制藥股份有限公司，山西長治 047100

2山西振東泰盛制藥有限公司，山西大同 037300